Progressi della ricerca e applicazione della tecnologia delle impronte digitali sulla materia medica cinese Ⅱ
Sep 19, 2024
1.2 Impronta elettrochimica
L'elettrochimica è un semplice metodo analitico basato sulle proprietà elettrochimiche e sui principi della sostanza da testare, che è a basso costo, altamente sensibile e richiede pochi materiali di consumo [19]. Tuttavia, questo metodo presenta alcune limitazioni ed è attualmente applicabile principalmente all'analisi di medicinali cinesi che contengono componenti chimici come terpeni (come Angelica sinensis), flavonoidi (come Scutellaria baicalensis), alcaloidi (come Aconitum) e antrachinoni ( come il rabarbaro) che possono subire reazioni elettrochimiche.
Wu Di et al. [20] hanno utilizzato un'impronta digitale elettrochimica per stabilire il processo di estrazione ottimale della Scutellaria baicalensis Georgi, fornendo un buon metodo per utilizzare razionalmente materiali medicinali cinesi. Shi Huihui et al. [21] hanno utilizzato la tecnologia dell'oscillazione chimica della reazione Belousov-Chabotinsky (BZ) per studiare gli effetti della temperatura, della velocità di rotazione e del numero di materiali medicinali aggiunti ai risultati sperimentali e hanno stabilito condizioni sperimentali ragionevoli per ottenere l'impronta elettrochimica della Magnolia biondii Pamp ., fornendo un nuovo metodo per il controllo di qualità della Magnolia biondii. Zou Guihua et al. [22] hanno stabilito l'impronta elettrochimica non lineare di Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. E Gentiana macrophylla Pall. Le impronte elettrochimiche dei due materiali medicinali sono visivamente diverse, il che può essere utilizzato come metodo semplice ed efficace per distinguere Codonopsis pilosula da Gentiana macrophylla. Dai Hongxia et al. [23] hanno condotto un'analisi elettrochimica su 20 lotti di Angelica sinensis (Oliv.) Diels con un periodo di crescita di 1, 2 e 3 anni. In combinazione con l'analisi delle componenti principali, si è scoperto che le impronte elettrochimiche e i parametri di oscillazione (incluso tempo di induzione dell'oscillazione, potenziale massimo, durata dell'oscillazione, ampiezza massima, potenziale di arresto e numero di cicli) di Angelica sinensis in diversi periodi di crescita erano significativamente diversi, che può essere utilizzato come base per identificare l'Angelica sinensis in vari periodi.
MATERIALE CINESE ERBE MEDICHE CISTANCHE HPLC IMPRONTA DIGITALE
1.3 Impronta cromatografica
1.3.1 Cromatografia su strato sottile
La cromatografia su strato sottile è un metodo cromatografico che ottiene la separazione facendo affidamento sulle diverse capacità di adsorbimento dello stesso adsorbente per diversi componenti chimici. È il metodo più comunemente utilizzato per identificare le medicine tradizionali cinesi, con i vantaggi di facilità d'uso, attrezzatura semplice, buona sensibilità, elevata comparabilità, forte specificità e facile sviluppo del colore. L'autenticità del materiale medicinale può essere determinata dalla presenza o dall'assenza di macchie sulla lastra a strato sottile. La profondità e la dimensione del colore delle macchie possono riflettere in una certa misura la qualità del materiale medicinale[24]. Attualmente, la cromatografia su strato sottile ad alte prestazioni(HPTLC) viene spesso utilizzato per sostituire la cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) per identificare qualitativamente e quantitativamente i prodotti della medicina tradizionale cinese grazie alla sua semplicità, accuratezza, basso costo, alta efficienza e rapidità. Le impronte digitali HPTLC hanno una risoluzione migliore e possono stimare in modo ragionevole e accurato i principi attivi del farmaco in un tempo più breve[25]. Tuttavia, a causa dell'elevato numero di fattori d'influenza (umidità, temperatura, ecc.), la riproducibilità dei risultati è scarsa rispetto all'HPLC. Loescher et al. [26] hanno utilizzato HPLC e HPTLC per analizzare l'estratto di Calendula officinalis e hanno scoperto che l'HPLC era più adatto per l'analisi quantitativa rispetto all'HPTLC.
In risposta a questo effetto, Li Xiangjun et al. [27] hanno realizzato una serie di soluzioni corrispondenti, tra cui la conduzione dell'esperimento di sviluppo in un frigorifero o un dispositivo sigillato a temperatura controllata per ridurre l'influenza della temperatura e l'aggiunta di diverse proporzioni di acido solforico a un'estremità del cilindro di sviluppo per controllare l'umidità.
ETICHETTA HPLC CISTANCHE DI ERBE MEDICHE IN MATERIALE CINESE
Patil et al. [28] hanno stabilito l'impronta digitale HPTLC dell'estratto di etere di petrolio di Catsia tora Linn. I risultati hanno mostrato che foglie, semi e fiori contenevano rispettivamente 10, 7 e 11 tipi di ingredienti. Questo metodo può essere utilizzato per identificare l'autenticità di Catsia tora Linn. Xiao Honghua et al. [29] hanno utilizzato la cromatografia su strato sottile combinata con la spettrometria di massa per stabilire un'impronta cromatografica su strato sottile di cromoni, acidi organici e saponine triterpeniche in Cimicifuga foetida L., e hanno eseguito analisi di similarità, analisi di cluster e analisi dei componenti principali su 16 lotti di Campioni Cimicifuga provenienti da cinque fonti, che forniscono una base per il controllo di qualità di Cimicifuga.
Guzelmeric et al. [30] hanno utilizzato acetato di etile-acido formico-acido acetico-acqua (30:1,5:1,5:3) come solvente di sviluppo per sviluppare l'impronta digitale HPTLC dell'apigenina-7-glucoside, un marcatore attivo di Matricaria chamomilla L., che può essere utilizzato come guida principale per la valutazione della qualità della camomilla. Bazylko et al. [31] hanno stabilito l'impronta digitale HPTLC di cinque composti flavonoidi, vale a dire tagetoidi, quercetina, flavonoidi, acido caffeico e acido clorogenico, da Galinsoga parviflora Cav. Questo metodo può essere utilizzato per identificare Galinsoga parviflora. Etanolico et al. [32] hanno stabilito l'impronta digitale dell'estratto etanolico di Acacia catechu (L. f.) Willd. Utilizzando HPTLC è stata eseguita una valutazione quantitativa semplice e rapida di rutina e quercetina nell'estratto. Agatonovic-Kustrin et al. [33] hanno utilizzato HPTLC per analizzare quantitativamente l'apigenina, la Matricaria e il bisabololo negli estratti di foglie e fiori di Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. e Calendula officinalis L., combinandoli con il metodo DPPH per confrontare l'antiossidante capacità di questi componenti. Questo metodo è semplice, rapido, affidabile e poco costoso e può essere utilizzato anche per monitorare l’attività antiossidante degli estratti vegetali.
1.3.2 Metodo HPLC L'HPLC è un metodo analitico universale per il rilevamento di vari componenti chimici nella medicina tradizionale cinese.
È ampiamente utilizzato nel rilevamento di componenti chimici nella medicina tradizionale cinese grazie ai suoi vantaggi di alta pressione, alta sensibilità, alta efficienza e automazione [34]. Il rilevatore UV, il rilevatore a serie di diodi (DAD), il rilevatore elettrochimico, il rilevatore di luce evaporativa, ecc. che possono essere collegati a tutti questi dispositivi dimostrano la loro insostituibile superiorità.
Qiao et al. [35] hanno utilizzato la cromatografia liquida bidimensionale completa fase inversa × fase inversa (RP × RP 2DLC) per separare i composti fenolici ottenuti mediante estrazione con acetato di etile della liquirizia Glycyrrhiza uralensis Fisch.
Sono stati rilevati 311 composti in 40 minuti e le strutture di 21 composti sconosciuti sono state caratterizzate preliminarmente mediante spettrometria di massa e 8 di essi sono stati trovati nella liquirizia per la prima volta. I risultati hanno mostrato che il sistema RP×RP2DLC/MS ha un buon effetto sulla separazione di estratti complessi della medicina tradizionale cinese e sull’analisi qualitativa dei prodotti naturali. Peng Liang et al. [36] hanno analizzato i componenti flavonoidi di 10 lotti di Gynostemma pentaphyllum (Thunb.). Makino ha stabilito l'impronta digitale HPLC di Gynostemma pentaphyllum e ha calibrato 11 picchi caratteristici comuni. I risultati dell'analisi di somiglianza hanno mostrato che la somiglianza più alta tra 10 lotti di impronte digitali di Gynostemma pentaphyllum rispetto allo spettro di riferimento era 0,989, e la più bassa era 0,128, indicando che i componenti flavonoidi di Gynostemma pentaphyllum di origini diverse erano simili in tipo ma presentavano differenze significative nel contenuto. Sole et al. [37] hanno utilizzato il metodo HPLC-DAD per analizzare la somiglianza dei componenti chimici del Bupleurum chinense DC. e B. scorzonerifolium Willd. Per la prima volta, e abbiamo scoperto che i due avevano rispettivamente 12 picchi di flavonoidi comuni e 4 picchi di saponina e, allo stesso tempo, ciascuno aveva rispettivamente 6 picchi di flavonoidi unici e 5 picchi di saponina. I risultati hanno mostrato che questo metodo può riflettere in modo ragionevole ed efficace la differenza nei componenti chimici tra Bupleurum e Bupleurum chinense. La correlazione tra i due è scarsa. Pertanto, Bupleurum chinense deve essere utilizzato con cautela nella pratica clinica. Lui et al. [38] hanno analizzato quantitativamente 10 tipi di acido gallico bioattivo, acido clorogenico, caffeina e catechine contenuti in 10 lotti di tè verde Ziyang. L'impronta digitale HPLC sviluppata era semplice e affidabile. Li et al. [39] hanno stabilito l'impronta digitale HPLC della buccia di melograno. Hanno selezionato 15 picchi caratteristici e valutato che la somiglianza di 10 lotti di buccia di melograno fosse 0,968. Hanno anche separato e analizzato quantitativamente la punicalagina, l’acido gallico, la catechina, l’acido clorogenico, l’acido caffeico, l’epicatechina, la rutina e l’acido ellagico in esso contenuti, fornendo un metodo affidabile ed efficace per identificare l’autenticità e il controllo di qualità della buccia di melograno. Sumathy et al. [1] hanno utilizzato HPLC combinato con HPTLC e gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS) per determinare la composizione chimica dell'estratto metanolo di Ixora chinensis Lam. L'analisi HPLC ha mostrato la presenza di biochina A, miricetina, quercetina, rutina, daidzeina e formononetina; nell'impronta digitale HPTLC è stato trovato acido ursolico; 24 componenti fitochimici sono stati trovati mediante GC-MS; questo metodo combinato qualitativo e quantitativo può facilmente valutare la qualità e la stabilità di Ixora chinensis Lam. Ge et al. [40] hanno stabilito l'impronta digitale UHPLC-DAD di Radix Angelicae Pubescentis, hanno analizzato quantitativamente le cumarine e gli acidi fenolici contenuti in Radix Angelicae Pubescentis e hanno identificato qualitativamente i suoi ingredienti attivi utilizzando la spettrometria di massa in volo con tempo di quadrupolo (Q-TOF-MS). Hanno trovato 9 acidi fenolici, 30 cumarine e 41 composti di mirra e adenosina. Hanno combinato il metodo di analisi discriminante per distinguere in modo efficace e rapido 32 lotti di Radix Angelicae Pubescentis provenienti da diverse province. Questo metodo fornisce una nuova idea per il controllo di qualità di Radix Angelicae Pubescentis.
ELENCO SPECIFICHE CISTANCHE
Yang et al. [41] hanno utilizzato il rilevatore DAD per cromatografia liquida ad altissime prestazioni (UPLC) e la tecnologia ESI-MS per ottenere rispettivamente l'impronta digitale HPLC e l'impronta digitale della spettrometria di massa delle compresse Xiaoyanlidan. Hanno analizzato 113 campioni di compresse Xiaoyanlidan e ottenuto 39 picchi, di cui 26 provenivano da Quassia, 9 da Andrographis panicolata e 4 da Rhizoma Cynoglossi. Utilizzando i metodi chemiometrici di similarità e PCA, hanno determinato che i cinque componenti significativi erano 4-metossi-5-idrossiferrocefalostomone, andrographolide, deidroandrographolide, neoandrographolide e acido rosmarinico. Hanno stabilito un'impronta digitale sistematica e completa per migliorare e valutare la qualità delle compresse Xiaoyanlidan. Fan et al. [42] hanno stabilito le impronte digitali HPLC e UPLC dei glicosidi flavonoidi nel Lophatherum gracile Brongn. e hanno isolato un nuovo flavonoide C-glicoside luteolina 6-C- -acido D-glucuronico-(1→2){{19 }}D-piranoglucoside per la prima volta. Hanno anche scoperto per la prima volta gli isomeri ottici di due composti, il flavonoide flavonoide e il flavonoide idrossiflavonoide. Hanno utilizzato la risonanza magnetica nucleare unidimensionale e bidimensionale e la spettrometria di massa per distinguere e determinare le loro strutture, fornendo un nuovo metodo per il controllo di qualità del Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu et al. [43] hanno utilizzato HPLC-DAD combinato con cromatografia su strato sottile, risonanza magnetica nucleare e spettrometria di massa per separare efficacemente i principali composti biflavonoidi GB1, GB2, GB-1a e i flavonoidi dalla Garcinia kola Linn., e hanno confermato le loro strutture , che può essere utilizzato come metodo di analisi di routine per preparati farmaceutici. Zhao et al. [44] hanno stabilito l'impronta digitale HPLC-UV-MS di Andrographis Paniculata (Burm. f.) Nees, hanno determinato quantitativamente l'andrografolide e il deidroandrografolide contenuti in Andrographis Paniculata e hanno valutato le differenze di 10 lotti di Andrographis Paniculata combinando analisi di somiglianza e PCA. Questo metodo fornisce una base per il controllo di qualità di Andrographis panicolata.
Ahmed et al. [45] hanno utilizzato l'HPLC per ottenere l'impronta digitale della resina di Commiphora wightii (Arn.) Bhandari e hanno analizzato quantitativamente il trans e il cis-sterolone in essa contenuti. Allo stesso tempo, questo metodo può distinguere efficacemente 22 lotti di resina di Commiphora wightii e 9 lotti di resina adulterata, che possono essere utilizzati come metodo per identificare l'autenticità della resina di Commiphora wightii.
2 Impronte biologiche
Le impronte digitali biologiche sono l'uso di metodi di analisi della sequenza genetica a livello molecolare per distinguere e classificare la distribuzione geografica e i cambiamenti nei materiali medicinali cinesi, comprese le impronte digitali genomiche, le impronte proteomiche[60] e le impronte digitali del DNA[61]. Al momento, ci sono meno studi sulle impronte biologiche dei medicinali cinesi rispetto alle impronte chimiche. I metodi più comunemente utilizzati sono l'elettroforesi su gel di poliacrilammide (PAGE), la tecnologia dei marcatori molecolari del DNA polimorfico amplificato casuale (RAPD), la reazione a catena della polimerasi.
(PCR) e altri metodi.
Liu Li et al.[62] ha utilizzato marcatori RAPD, combinati con PCR e analisi di cluster, per identificare efficacemente Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. e ginseng americano Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] hanno stabilito per primi l'impronta digitale della proteina SDS-PAGE di Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus e Scolopendra subsidies mutilans L. Koch, fornendo un metodo affidabile ed efficace per l'identificazione di questi tre materiali medicinali. Wei Yicong et al. [64] hanno progettato primer dual-site specifici e costruito una PCR multiplex. L'identificazione rapida di due materiali medicinali, Houttuynia cordata Thunb. E la Gymnotheca chinensis Decne., può simultaneamente identificare positivamente le due specie e determinare se sono mescolate. Wang Fu et al. [65] hanno utilizzato la sequenza ITS2 (distanziatore trascritto interno 2) come codice a barre del DNA per identificare accuratamente la medicina cinese, Zanthoxylumbungeanum Maxim. E la sua spezia Zanthoxylumbungeanum Maxim., che fornisce una base per l'identificazione della medicina cinese Zanthoxylumbungeanum e la sua spezia Zanthoxylumbungeanum.
