I glicosidi di Cistanche hanno una forte attività di ossidazione antiradicalica nel sistema di ossidazione

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Studio sull'attività antiossidante del glicoside di Cistanche nelle cellule HL-60

Obiettivo:Osservare l'attività biologica antiossidante dei glicosidi di Cistanche nelle cellule HL-60.

Metodi: i glicosidi cistanche sono stati estratti da Cistanche che è stato prodotto nello Xinjiang; il sistema di ossidazione nelle cellule HL-60 è stato utilizzato per determinare l'attività antiossidante dei glicosidi di Cistanche. Il grado di induzione dei radicali liberi nelle cellule HL-60 è rilevato dalla concentrazione del DCF, un prodotto di ossidazione della sonda DCFH-DA. Estratto di Ginkgo biloba EGB 761 è stato utilizzato come controllo positivo.

Risultati:Glicosidi di Cistanche con concentrazioni di 0,25, 0,50 g e 0,75 g / L, i tassi di inibizione dei radicali liberi erano rispettivamente del 56%, 62% e 67%. La sua attività antiossidante è simile a EGB 761.

Conclusione:I glicosidi di Cistanche hanno una forte attività di ossidazione antiradicalica nel sistema di ossidazione delle cellule HL-60.

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Parole chiavi: Cistanche;Cistanche Glicosidi Totali; Celle HL-60; attività antiossidante

Cistanche, noto anche come Dayun, è la medicina tradizionale cinese. Secondo i rapporti della letteratura,Cistanchepuò migliorare l'immunità del corpo e ritardare l'invecchiamento(1).Glicosidi di Cistancheè un principio attivo estratto dalla cistanche, e il suo principio attivo èglicosidi feniletanoidi. Moderni studi farmacologici hanno dimostrato cheGlicosidi di CistancheAvereanti-ossidazioneeeffetti anti-perossidazione lipidica. Ha un effetto protettivo sull'ischemia miocardica causata dalla legatura dell'arteria coronaria e può proteggere il DNA dai danni causati dall'ossidazione.

Recentemente, ricerche sperimentali sullaeffetto protettivo diGlicosidi di Cistanche sulla lesione cerebraleE laprevenzione e trattamento della malattia di Alzheimerè diventato un argomento caldo. Meng Xinzhen et al. (5) hanno scoperto cheGlicosidi di Cistanchehanno un effetto protettivo sull'ischemia cerebrale/danno da riperfusionenei topi svegli, che può ridurre il contenuto di malondialdeide (MDA) nel tessuto cerebrale e aumentare l'attività della SOD. Liu Fengxia e altri hanno scoperto cheGlicosidi di Cistanche può migliorare i livelli di apprendimento e memoria della malattia di Alzheimer (AD)topi modello causati da peptide amiloide e acido kainico (QA), che è una delle ragioni per la causa del peptide amiloide e QA-[9'11]. Tuttavia, l'effetto dei GC sui ROS nelle cellule umane HL-60 non è stato riportato in letteratura. In questo studio, le cellule umane HL-60 sono state utilizzate come modello sperimentale antiossidante in vitro e lo standard di estratto di Ginkgo biloba è stato utilizzato come controllo positivo per osservare l'effetto diGlicosidi di Cistanchesu ROS in celle HL-60.

Utilizzando i principali reagenti e strumentiGlicosidi di Cistanchesono stati estratti dalErbaCistancheprodotto nel nord dello Xinjiang. Il componente principale è il glicoside benzenico. La prima categoria di etanolo; i reagenti farmacologici per esperimenti farmacologici in vitro includono PMA (Phorbolmyristate acetate) e DCFH-DA (2', 7'-dicloro-diclorofluoresceina diacetato) acquistati da Sigma (Francia), estratto di Ginkgo biloba prodotto standard EGB 761 (da estratto essiccato da foglie di Ginkgo biloba) è stato fornito da Beaufour-Ipsen (Parigi, Francia). LeGlicosidi di Cistanchee gli estratti EGB 761 sono stati preparati con acqua ultrapura per preparare un liquore madre con una concentrazione di 10 g-Li. DCFH-DA è stato diluito con etanolo ad una concentrazione di 30 La soluzione di mmol-f è pronta per l'uso. La PMA viene trasformata in una soluzione di concentrazione di 1,6 mmol con DMSO e conservata a -20° per l'uso. FL 600 Microplate Fluorescence Reader tipo rivelatore di fluorescenza (Bio-Tek, Highland Park, USA).

I risultati dell'esperimento mostrano che quandoCistanche Glicosidi Totaliad una concentrazione di 0,25 g / Ltr, puòinibiscono la concentrazione di radicali liberiindotta dal sistema di ossidazione intracellulare MPO/HC1O/H2O2 del 56% (la forte fluorescenza generata dalossidazionedella sonda DCFH-DA da radicali liberi) La concentrazione di fluorescenza rimanente della sostanza DCF è espressa e la concentrazione di fluorescenza rimanente è del 44%). Quando la concentrazione diCistanche Glicosidi Totaliè aumentato a 0,50 e 0,75 g-L/ Ltrpuò inibire la concentrazione di radicali liberi nel sistema rispettivamente del 62% e del 67% (l'intensità di fluorescenza rimanente è rispettivamente del 38% e del 33%). L'intensità di attività dell'inibizione dei radicali liberi è simile a quella dell'estratto di Ginkgo biloba EGB 761 (nelle stesse condizioni, EGB 761 può inibire la concentrazione di radicali liberi nel sistema rispettivamente del 39%, 78% e 81%) (test di Mann-Whitney).

Poiché le cellule HL-60 hanno un forte sistema ROS, vale a dire MPO/H,0,/HC10, le cellule HL-60 sono ora utilizzate come nuovo modello sperimentale in vitro per sostanze conantiossidantepotenziale nei prodotti naturali Determinazione delscavenging dei radicali libericapacità di E]. In questo studio, due medicine naturali che hanno un certo potenziale perprevenire e trattare l'ADsono stati utilizzati come soggetti sperimentali e la loro attività anti-radicale nelle cellule umane HU60 è stata osservata preliminarmente. I risultati hanno mostrato che entrambe le sostanze hanno effetti anti-ROS, che possono essere uno dei suoianti-morbo di AlzheimerMeccanismi. Il meccanismo dell'interazione traCistanche Glicosidi Totalie questo sistema e l'effetto sul sistema di ossidazione MP0 nel corpo animale nel suo complesso devono essere confermati da ulteriori studi in futuro.

Referenze:

[1 ] Zhang T, Liu C Y, Wang J J, et al. Effetto dei glicosidi cistanchi sulla funzione immunitaria del topo anziano indotto dal D-galattosio [J]. Chin Loum Gerontol f 2004,24(5):441 -2.

[2] Li L L, Wang X W, Mao X M, et al. Effetti della perossidazione antilipidica e anti-radiazione dei glicosidi di Cistanche [ J]. Cina J Chin Mat Med, 1997,22 364-7.

[3] Mao X M, Wang X W, Li L L, et al. Effetti protettivi dei glicosidi della cistanche sull'ischemia miocardica nel ratto [ J ]. Chin Trad Herb Dru^s, 1999,30:118 -20.

[4] Wang X W, Jiang X Y, Wu L Y, et al. Effetto scavenging dei radicali liberi e protezione dell'OH • effetto di danno al DNA indotto dai radicali dei glicosidi della cistanche[ J]. Chin Pham J,2001,36:29 -32.

[5] Meng X Z, Wang X W, Jiang X Y, et al. Effetti protettivi dei glicosidi della cistanche sulle lesioni da ischemia-riperfusione cerebrale nei topi svegli[ J]. Chin J Clin Neurosci,2003, (3)234 - 42.

[6] Liu FX, Wang X W, Luo L, et al. Gli effetti dei glicosidi della cistanche sull'apprendimento e sulla memoria nella malattia di Alzheimer indotta da peptidi p-amiloide nei topi e il suo possibile meccanismo[ J]. Chin Pharmacol 2006,22(5):595 -9.

[7] Liu FX, Wang X W, Wang X F. Effetto dei glicosidi della cistanche sull'apprendimento e sulla memoria nei topi con malattia di Alzheimer e nel suo meccanismo[J]. J Xirymng Med,2005,28( 12) 131 -5.

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