Determinazione dei farmaci che migliorano il sesso aggiunti illegalmente nei prodotti sanitari da parte della tecnologia combinata TLC-NI

Astratto:Stabilire il modello di rilevamento didroghe che migliorano il sessoaggiunto illegalmente dalla cromatografia a strato sottile (TLC) e dalla spettroscopia a infrarossi vicino (NIS) tecnologica combinata, per la rapida analisi qualitativa e quantitativa dei farmaci aggiunti illegalmente inProdotti sanitari． Con the contenuto di farmaci chimicinei prodotti sanitari sono determinati dal metodo HPLC come valore di riferimento． TLC è stato usato nello studio． Il triclorometano-metil-alcol-alcol-ammonio idrossido (1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) è stato usato come solvente in via di sviluppo e la piastra è stata rilevata sotto una lampada ultravioletta． Lo spettro ni di punti di componenti chimici su TLC è stato raccolto da Ni Il modello rapido qualitativo e quantitativo di farmaci chimici è stato stabilito utilizzando l'analisi di regressione dei minimi quadrati parziali (PLS) combinata con il metodo di validazione incrociata． E validato per il modello． Stabilito il metodo di analisi HPLC con un migliore grado di separazione e ampio intervallo lineare． Stabilito i modelli di analisi TLC-NiSs di sildenafil e noracetildenafil con ampio intervallo lineare e i migliori risultati stabili e previsti． Il coefficiente di correlazione (he2), l'errore quadrato medio di root della validazione di calibrazione (hemsecv) e l'errore quadratico medio radice della previsione (hemsep) erano {{1 0}． 984, 0． 0 85 e 0． 081; 0． 982,0． 098 e 0． 087, rispettivamente． Utilizzando il modello TLC-NiSs, sono stati rilevati 9 lotti in 10 lotti di prodotti che migliorano il sesso per essere aggiunti sildenafil e un tasso non qualificato del 90%, la deviazione relativa media del contenuto di sildenafil e noracetildenafil dei previsti erano 1． 86%, 1． 96%, rispettivamente． I risultati hanno mostrato che i modelli di analisi TLC-NI Possono essere utilizzati per i componenti chimici di cui sopra la rapida determinazione dei prodotti che migliorano il sesso． Il metodo con specifico e semplice． Che ha fornito le idee per la rapida determinazione di aggiunte droghe illegali nei prodotti sanitari．

 

Supplementi a base di erbe naturali per prestazioni sessuali

 

Parole chiave: Prodotti sanitari; aggiunto illegalmente; Tlc-ni as; HPLC; Prodotto che migliora il sesso

 

Con l'aumentare della consapevolezza del pubblico sull'assistenza sanitaria, la domanda di prodotti sanitari è in crescita, in particolare i prodotti sanitari etichettati come medicina tradizionale cinese. I prodotti sanitari sono un termine popolare per gli alimenti sanitari, che sono chiamati integratori alimentari all'estero. Non sono droghe e hanno la funzione di regolare le funzioni umane. Sono usati da specifici gruppi di persone, ma non hanno lo scopo di trattare le malattie [1]. Di fronte alla tentazione di alti profitti, i venditori illegali aggiungono dosi eccessive di materie prime chimiche economiche con evidenti effetti collaterali per i prodotti sanitari per migliorare l'efficacia dei prodotti. Ciò ha notevolmente interrotto il mercato dei prodotti sanitari del mio paese e rappresentava una grave minaccia per la salute delle persone. Ad esempio, nel 2009, il prodotto ipoglicemico ausiliario della regione ausiliaria della regione Xinjiang "Tangzhining Capsule" ha aggiunto dosi eccessive della droga chimica vietata glibenclamide, causando molte morti. Nel 2014, la "capsula di perdita di peso Xianxian" nella provincia di Shanxi ha aggiunto farmaci chimici vietati sibutramina e sildenafil, facendo sì che molte persone abbiano reazioni avverse o addirittura muoiono. Negli ultimi anni, nell'ispezione casuale e nella valutazione dei prodotti sanitari, è stato riscontrato che i produttori illegali hanno aggiunto dosi eccessive di sildenafil ai prodotti per la salute sessuale e ai preparativi per la salute della medicina cinese tradizionale per ingannare i consumatori, mettendo in pericolo gravemente la salute dei consumatori [2,3]; Fenomeni simili come dosi eccessive di farmaci chimici vietati come fenafil, biguanidi, furosemide e fenolftaleina nella salute sessuale, i prodotti per la salute della perdita di peso sono emersi in un flusso infinito e l'occupazione dell'aggiunta sta diventando sempre più alto [4,5]; Tali fenomeni si verificano spesso anche all'estero [6]. Questi atti illegali con un impatto ad ampio raggio e grandi danni meritano una profonda considerazione da parte delle autorità di regolamentazione farmaceutiche ed è particolarmente importante sviluppare metodi rapidi di campionamento e rilevamento del mercato.

Attualmente, i metodi di rilevamento utilizzati per l'aggiunta illegale di farmaci chimici nei medicinali tradizionali cinesi e sui prodotti sanitari includono principalmente la cromatografia a strato sottile (TLC) [7], cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC) [8], cromatografia liquida spettrometria (10], spettrometria di massicità (10], spettrometria di massiatura (LC-MS) e spettrometria ION e spettrometria ION) Spettrometria (RS) [11].
Tra i vari metodi di rilevamento riportati, LC-MS, GC-MS e IMS sono stati studiati di più, ma a causa dell'elevato prezzo degli strumenti e delle complesse operazioni, non sono facili da promuovere e sono difficili da diffondere nelle aree urbane e montuose con uno sviluppo economico relativamente arretrato. TLC è uno dei quattro metodi tradizionali per l'identificazione del farmaco. È veloce, semplice e ha buoni effetti di separazione. È ampiamente utilizzato nell'identificazione qualitativa e quantitativa dei farmaci. Tuttavia, il suo svantaggio è che deve avere sostanze di riferimento corrispondenti o materiali medicinali di riferimento [12, 13]. La spettroscopia a infrarossi vicino (NIRS) è stata sviluppata negli ultimi anni. Raccoglie le informazioni di assorbimento delle vibrazioni e della rotazione del CH, OH, SH, NH, C=C e C=O gruppi della sostanza rilevata nello spettro a infrarossi per l'analisi qualitativa e quantitativa delle sostanze. È ampiamente utilizzato in agricoltura, petrolio, industria chimica, tabacco e cibo. Al momento, è stato gradualmente applicato alle industrie farmaceutiche e di supervisione dei farmaci. Ha un grande potenziale di sviluppo nel rapido rilevamento qualitativo e quantitativo e analisi dei farmaci [14, 15].

Pertanto, questo documento utilizza gli strumenti popolari esistenti e i metodi di prova per creare tecnologia combinata TLC-NIRS. Assunzione di prodotti per la salute sessuale come esempio, viene stabilito un modello di rilevamento qualitativo e quantitativo universale per l'aggiunta illegale di farmaci chimici di salute sessuale proibiti. Può essere usato in modo efficiente, rapido e semplicemente per lo screening e il rilevamento dell'aggiunta di farmaci chimici proibiti nei prodotti sanitari di mercato, riducendo così i costi di rilevamento.

1 Strumenti e testare i farmaci

1.1 Strumenti

TENSOR TENSORIO 37 NI Spectrometro di Fourier (Bruker, Germania), Opus 5. 0 Software di analisi; LC -20 a cromatografo liquido ad alte prestazioni (Shimadzu, Giappone), workstation di cromatografia a soluzione LC; Bilancio analitico elettronico BS224S (Sartorius, Germania); Gel di silice GF254 Piatto di strato sottile (Qingdao Ocean Biochemical Co., Ltd.).

 

1.2 Test farmaci

Sildenafil (510068-201401, 99,9%) e Narodenafil (520039-201902, 96,5%) sono stati acquistati dal China Food and Drug Research Institute e le strutture sono mostrate nella Figura 1. Il metanolo era cromatograficamente puro, l'acqua era acqua ultrapura e cloroformi, acido fosforico e di ammonia. I campioni di salute erano campioni di mercato.

 

Fig. 1 Strutture di farmaci chimici che migliorano il sesso

 

2 metodi e risultati

2. 1 Preparazione della soluzione di riferimento e della soluzione di campionamento

Preparazione della soluzione di riferimento: prendi circa 25 mg di sildenafil e Narendenafil rispettivamente, peserli accuratamente, posizionarli in un pallone volumetrico da 5 ml e dissolvili in metanolo per preparare una soluzione azionaria di riferimento mista di circa 5 mg/ml ciascuno; Quindi prendi circa 5 mg di sildenafil e Narendenafil rispettivamente, peserli accuratamente, posizionarli in un pallone volumetrico da 5 ml e dissolvili in metanolo per preparare una singola soluzione di riferimento di identificazione di circa 1 mg/ml ciascuno.

Preparazione della soluzione di esempio: assumi la dose di questo prodotto una volta, posizionalo in un pallone volumetrico da 5 ml, aggiungi metanolo e ultrasonicate per 3 0 min (100 W, 56 kHz), raffreddalo, aggiungi metanolo al segno e filtro per ottenere il filtrato. Nel determinare il contenuto, misurare accuratamente 1 ml di ciascuna soluzione di campionamento, dissolverlo nella fase mobile a 25 ml e filtrarlo con una membrana del filtro da 0,45 μm. Poiché le concentrazioni di massa dei componenti rilevati nei campioni positivi (prodotti per la salute con farmaci chimici vietati aggiunti) variano notevolmente, il volume di campionamento può essere adeguatamente aumentato o la soluzione campione può essere opportunamente diluita per rendere la sua concentrazione di massa finale all'interno dell'intervallo lineare.
Preparazione di una soluzione di campione positiva: poiché non è stato prelevato un campione positivo per Naringenfil, un campione in bianco (capsula di Huangjingbajitian, Luoyang Kangti Biology, il risultato del test era negativo) una volta è stata presa una soluzione di riferimento di Naringenfil adeguatamente diluita. La soluzione del campione positiva è stata preparata secondo il metodo di preparazione nell'ambito della soluzione del campione, in modo che le concentrazioni di massa di Naringenfil nella soluzione di campione positiva fossero circa 5, 7,5 e 10 mg/mL, rispettivamente e 4, 3 e 3 copie di ciascuna concentrazione di massa sono state preparate in parallelo.

2. 2 condizioni cromatografiche e spettrali

2. 2. 1 Condizioni cromatografiche HPLC

Phenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5μm) colonna cromatografica; Il 45% di metanolo (a) -55% 0. 3% di soluzione acquosa di acido fosforico (B) è stato usato come fase mobile per l'eluizione per 30 minuti; La portata era di 1 ml/min, la lunghezza d'onda di rilevamento era di 290 nm; La temperatura della colonna era di 40 gradi; Il volume di iniezione era di 10 μL.

 

2. 2. 2 condizioni cromatografiche TLC

È stata utilizzata la piastra di cromatografia a strato sottile GF254 Silica GF254 e l'ammoniaca cloroformio-metanolo (1 0: 1: 0. 1) è stata utilizzata come solvente in via di sviluppo per lo sviluppo ed evaporazione. Dopo aver asciugato un essiccatore per 1 ora, il segno è stato ispezionato con una lampada ultravioletta da 254 nm (vedere la Figura 2).

 

2. 2. 3 Condizioni di acquisizione NIRS

La sonda a fibra solida Bruker Nirs è stata utilizzata per la misurazione, con un intervallo di numeri d'onda di 12, 000 a 4, 000 cm -1, 64 scansioni, una risoluzione di 16 cm -1, una temperatura da 10 a 30 gradi e un'umidità di 35%. Una piastra di strato sottile GF254 in silice in bianco è stata utilizzata come riferimento e lo spettro è stato raccolto dopo la sottrazione di sfondo. Ogni punto di componente chimico è stato misurato in parallelo 5 volte e le informazioni NIRS sono state salvate.

 

2.3 Istituzione del metodo di determinazione del contenuto HPLC

2.3.1 Indagine sulla relazione lineare

2. 0 ml della soluzione madre di riferimento misto (sildenafil 5.25 mg/ml; narcolepsy 5.15 mg/ml) era accuratamente aspirato e diluito a 1 0 ml con metanolo, e quindi {0. 25, {11}. 1, {14}. 1. 7. {{4 0}}, 8. 0, 9. 0, 1 0. {{5 0}}, 11. {{54}, 12. {{56} 13. 0, 14. {{6 0}}, 15. 0, 16. 0, 17. 0, 18. {{7 0}}, 19. {{74}, 2 0. 0, 21. {{8 0}}, 22. 0, 23. 0, 24. {{88}, 25. {{9 {92}}}}, 26. 0, 27. 0, 28. 0, 29. {{1 {{1 {{1 {{1 0 6}} 4}} 2}} 0}, 30.0, 31.0 36.0, 37.0, 38.0, 39.0, 40.0, 41.0, 42.0, 43.0, 44.0, 5 ml, dissolversi in fase mobile e fare rispettivamente fino a 5 ml, agitare bene.
Secondo le condizioni cromatografiche sotto "2.2.1", è stata eseguita l'analisi del campione, è stata determinata l'area di picco e l'equazione della linea di regressione è stata calcolata con l'area di picco di ciascun componente come ordinata (y) e la concentrazione di massa della sostanza di riferimento come ascissa (x): sildenafil è y {{3} × 1 {{8} {{{}=0. 9989, intervallo lineare 0. 0525 ~ 1.05 ug; Naphthol è y=1 × 106x -3 184. 4, r=0. 9999, intervallo lineare 0,0515 ~ 1.03 ug. I risultati hanno mostrato che le sostanze di riferimento di cui sopra avevano una buona linearità all'interno delle rispettive gamme lineari.

 

2.3. 2 Test di precisione, stabilità, ripetibilità e recupero

Prendi la soluzione di riferimento misto in "2.3.1" e il campione vuoto (capsula di Huangjingbajitian, Luoyang Kangti biologico, il risultato del test è negativo) e prepara 6 soluzioni di campionamento contenenti sildenafil e nardenafil in parallelo secondo il metodo sotto "2,1". Secondo le condizioni cromatografiche in "2.2.1", la soluzione di riferimento misto è stata iniettata 6 volte continuamente per precisione; Una delle soluzioni di esempio è stata iniettata a 0, 3, 6, 9, 12 e 24 ore per stabilità; 6 soluzioni di campionamento sono state preparate in parallelo per ripetibilità e recupero e ogni campione è stato iniettato una volta. Sono state determinate le aree di picco di sildenafil e nardenafil e sono stati calcolati il ​​recupero e il suo valore RSD. Risultati I tassi di recupero medi di sildenafil e nardenafil sono stati 100. 16%, 100. 49%; I valori RSD erano tutti inferiori al 3% (n=6), indicando che lo strumento aveva una buona precisione, la soluzione di esempio era stabile entro 24 ore e il metodo aveva una buona ripresa e ripetibilità.

 

2.3.3 Determinazione del contenuto

Aspirare accuratamente ciascuna soluzione di campionamento, iniettare e analizzare in base alle condizioni cromatografiche in "2.2.1", misurare 3 volte per ciascun batch, registrare l'area di picco e calcolare il contenuto. I risultati mostrano che tra i 10 lotti di campioni di salute sessuale, sono stati trovati 9 lotti per contenere il sildenafil farmacologico vietato e il dosaggio aggiunto variava notevolmente. Il tasso di rilevamento era del 90%. I risultati sono mostrati nella Tabella 1 e nella Figura 3.

 

Tabella 1 Determinazione Risultati delle sostanze aggiunte illegalmente in 10 prodotti che migliorano il sesso (n=3)

 

Campione	Produttore	Peso del campione	Contenuto (mg/tempo)
Estratto di fiori d'oro	Università agricola della Cina occidentale	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Repellente per insetti	Hong Kong University of Science and Technology	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Camomilla tedesca	Haiyun biologico	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Dew mattutino	Hong Kong University of Science and Technology	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Wormwood	Habitat USA	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. Niger	Università agricola della Cina occidentale	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Filo d'oro	Hong Kong University of Science and Technology	2 × 0.50 g	Non rilevato

 

Fig. 3 HPLC di 10 prodotti che migliorano il sesso

 

2.4 Istituzione del modello qualitativo TLC-NIRS per la salute sessuale farmaci chimici

2.4.1 Raccolta di informazioni spettrali

Secondo le condizioni di "2.2.3", sono stati raccolti i NIR dei punti di riferimento identificati dopo lo sviluppo sulla piastra di strato sottile TLC rispettivamente. I volumi spot della soluzione di riferimento misto erano 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 e 50 μL e i volumi spot della soluzione di campionamento erano rispettivamente 2, 5 e 10 μL. Ogni punto di riferimento del riferimento misto e del campione con diversi volumi spot è stato raccolto 5 volte e il diagramma di sovrapposizione NIRS è mostrato nella Figura 4. Nell'esperimento, gli spettri del riferimento misto con diversi volumi sono stati selezionati come set di calibrazione e lo spettaggio degli spettri dello spettro dello spettra impostato.

Fig. 4 spettri originali di farmaci chimici