Efficacia e meccanismo di cistanches Extract Herba nel trattamento della disfunzione riproduttiva nei ratti con carenza di rene-yang basato sulla metabolomica ⅱ

3.2 Effetto dell'estratto di cistanche sullo stato generale dei ratti con carenza di yang rene

Prima dell'esperimento, i topi di ciascun gruppo erano di buon umore, con capelli normali e alimentazione e bere normali. Durante l'esperimento, non sono state trovate anomalie nei normali ratti di gruppo e il loro peso corporeo è aumentato costantemente con l'estensione del tempo di alimentazione; Man mano che il tempo di modellazione dell'adenina prolungava, i capelli dei ratti del gruppo modello caddero e diventavano ruvidi, i loro spiriti erano bassi, le loro reazioni erano lente, si rannicchiavano e inarcarono le spalle, il loro volume di urina aumentava, il loro peso corporeo diminuiva significativamente e la loro temperatura rettale diminuiva significativamente (p <0. 001), mostrando evidenti sintomi di yang yang;Estratto di cistanche e trattamento di intervento LCpuò alleviare quanto soprasintomi a vari gradi, tra cui la temperatura rettale è stata significativamente regolata (p <0. 001), vedere la Figura 1.

Fig.1 Effetto dell'estratto di erba di cistanches sul peso corporeo e sulla temperatura rettale dei ratti con carenza di rene-yang (𝑥̅ ± s (n =10 (

3.3 Effetto dell'estratto di cistanche sul coefficiente del rapporto viscerale-cervello dei ratti con carenza di rene-yang

Rispetto al gruppo normale, i coefficienti del rapporto viscerale-cervello del testicolo e dell'epididimo nel gruppo modello sono stati significativamente ridotti (p <0. 0 0 1); Rispetto al gruppo modello, i coefficienti del rapporto viscerale-cervello del testicolo e dell'epididimo in ciascun gruppo di dose di estratto di cistanche sono stati significativamente aumentati (p <0. Anche il gruppo LC è stato significativamente aumentato (p <0,01, p <0,001), vedere la Figura 2.

Tabella 2 Effetto dell'estratto di erba di cistanches sui parametri di motilità degli spermatozoi nei ratti con carenza di rene-yang (𝑥̅ ± s, n =10)

3,5 Effetto dell'estratto di cistanche sul conteggio degli spermatozoi, sulla motilità e sul tasso di deformità nei ratti con carenza di yang renale

Lo sperma normale ha una testa a forma di falce, un corpo snello, una coda naturalmente curva e una forma complessiva liscia. La morfologia di altri spermatozoi deformati è mostrata nella Figura 3. Rispetto al gruppo normale, la densità dello sperma e la motilità degli spermatozoi dei ratti nel gruppo modello erano significativamente ridotti (P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.001); compared with the model group, the sperm density and motility of the rats in each dose group of Cistanche extract and the LC group were significantly increased (P<0.05, P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.001), as shown in Figure 4.

3.6 Effetto dell'estratto di cistanche sulla morfologia del tessuto testicolare ed epididimale nei ratti con deficit di yang renale
I tubuli seminiferi testicolari di ratti nel gruppo normale erano intatti, con una disposizione regolare di cellule spermatogeniche a tutti i livelli e gli strati chiari. Abbondanti spermatociti e spermatidi allungati erano visibili nel lume. Rispetto al gruppo normale, la proporzione di tubuli seminiferi a lesion nei ratti nel gruppo modello è aumentata significativamente (P<0.001), which was manifested as irregular structure of seminiferous tubules, thinning of tubular walls, enlargement of lumen, increased number of exfoliated cell blocks in the lumen, decreased number of linear sperm, and disordered arrangement of spermatogenic cells. Compared with the model group, the proportion of testicular seminiferous tubule lesions in rats in all dose groups of Cistanche extract and LC group was significantly reduced (P<0.05, P<0.01), among which the low dose group of Cistanche extract had better improvement effect, which was equivalent to the LC group, as shown in Figure 5.

Ottieni maggiori dettagli su Cistanche per migliorare la funzione sessuale

I tubuli epididimali dei ratti nel gruppo normale erano intatti, le cellule epiteliali erano ordinate ordinatamente e si poteva osservare uno sperma distribuito uniformemente; I tubuli epididimali dei ratti nel gruppo modello erano gonfi, le cellule epiteliali erano disposte disordinate e il numero di spermatozoi nel lume era significativamente ridotto; Rispetto al gruppo modello, le lesioni lumen epididimali dei ratti nei gruppi di estratto di cistanche e il gruppo LC sono stati significativamente migliorati, le cellule epiteliali erano strettamente e ordinatamente disposte e il numero di spermatozoi normali nel lume è aumentato ed è stato distribuito uniformemente, come mostrato nella Figura 6.

4 Discussione

La sindrome da carenza di yang renale è un tipo di sindrome nella medicina tradizionale cinese, che si riferisce alla carenza di Yang renale e all'incapacità del corpo di riscaldarsi. La medicina moderna crede che la carenza di yang renale sia correlata alla disfunzione della ghiandola bersaglio ipotalamica-ipofisaria (principalmente ghiandole surrenali, gonadi e ghiandola tiroidea) [11]. L'adenina può agire sull'asse HPG dei ratti, causando la sua disfunzione, interferendo così con l'omeostasi dei livelli ormonali del corpo, mostrando sintomi simili alla carenza di yang renali. Il livello T può essere usato come uno degli indicatori di rilevamento di questo modello [12]. Gli altri criteri diagnostici generali per la carenza di yang renali vengono applicati ai ratti del modello, vale a dire la riduzione della temperatura corporea, la perdita di peso, il curling, i capelli sparsi, l'aumento del volume delle urine, le feci sciolte, ecc. [9,13]. Cistanche Deserticola è uno dei farmaci più comunemente usati nelle prescrizioni tradizionali di medicina cinese per la tonificante yang renale. La sua sostanza attiva chiave, i glicosidi feniletanoidi, è stato anche riferito che ha le funzioni di regolazione dell'omeostasi dell'asse HPG e dell'anti-fatica [14]. In questo studio, i ratti con carenza di adenina sono stati usati come modello di carenza di yang renali. L'effetto di miglioramento dell'estratto di cistanche deserticola sui ratti con carenza di yang renale è stato valutato dalle manifestazioni generali dei ratti e dai cambiamenti negli ormoni relativi all'asse HPG. I risultati hanno mostrato che tutte le dosi di estratto di deserticola cistanche potrebbero migliorare i sintomi della carenza di yang renale nei ratti causati dall'adenina e ridurre l'effetto inibitorio dell'asse HPG.

L'oligospermia e l'asthenospermia possono essere classificate nelle categorie di "senza figli", "infertilità", "sperma freddo" e "blocco dello sperma" nella medicina tradizionale cinese. La principale patogenesi comprende la carenza di yang renali, il calore umido, la carenza di yin e l'iperattività del fuoco, la stagnazione del Qi e la stasi del sangue, tra cui la carenza di yang renali è la più comune [15-16]. La carenza di yang renale non può riscaldare il palazzo degli spermatozoi, con conseguente sperma freddo e Qi, quindi in mancanza di figli [17]. Anche l'efficacia delle prescrizioni di Yang rene di riscaldamento e tonificante per la carenza di yang renali e l'infertilità è stata ampiamente riportata [18]. I risultati di questo esperimento hanno mostrato che gli estratti di cistanche deserticola a tutte le dosi, una medicina tradizionale cinese per lo yang renale corroborante, potrebbero alleviare significativamente la diminuzione del rapporto tra gli organi testicolari ed epididimali al cervello causato dall'adenina; I risultati dell'analisi dei parametri della dinamica dello sperma hanno mostrato che gli estratti di cistanche deserticola a tutte le dosi potrebbero migliorare significativamente i parametri della dinamica dello sperma tra cui VCL e VAP e aumentare significativamente la motilità dello sperma e la concentrazione di sperma; I risultati della fluorescenza degli spermatozoi hanno mostrato che gli estratti di cistanche deserticola potrebbero migliorare significativamente la diminuzione della motilità degli spermatozoi causata dall'adenina; I risultati della colorazione HE hanno mostrato che gli estratti di cistanche deserticola potrebbero alleviare in modo significativo la deformità dello sperma causata dall'adenina e alleviare i cambiamenti morfologici del testicolo e dell'epididimo causati dall'adenina; I risultati di ELISA hanno mostrato che gli estratti di cistanche deserticola hanno regolato significativamente il livello sierico di T, che è necessario per la spermatogenesi testicolare e gli estratti a basso dosaggio di cistanche deserticola hanno mostrato risultati migliori. I risultati di cui sopra mostrano che gli estratti di cistanche deserticola hanno un effetto miglioramento sul danno riproduttivo dei ratti con carenza di yang rene.

LC, noto anche come L-carnitina, è una sostanza essenziale del metabolismo energetico nel corpo umano. Di solito esiste nel sistema riproduttivo maschile in due forme: libero e acetilato. Fornisce energia per il movimento e la maturazione dello sperma nell'epididimo promuovendo l'ossidazione degli acidi grassi ed è ampiamente utilizzata nel trattamento delle malattie del sistema riproduttivo maschile [19]. Gli studi hanno dimostrato che LC può alleviare il disturbo dell'asse HPG causato dalla glutammina, regolare i livelli di ormone luteinizzante e ormone stimolante il follicolo e aumentare il livello T regolando i livelli di espressione dei geni come il citocromo P450 11Subamily a Zymes a Zymes. Sintesi t [20]. Inoltre, LC può rimuovere eccessive specie reattive di ossigeno nel testicolo causate da varicocele, ridurre il danno da stress ossidativo e quindi ripristinare la spermatogenesi testicolare [21]. In questo esperimento, LC è stato selezionato come controllo positivo. I risultati hanno mostrato che LC potrebbe efficacemente alleviare il danno riproduttivo dei ratti causati dall'adenina, che era coerente con i precedenti risultati della ricerca; e l'estratto di deserticola cistanche ha mostrato un effetto terapeutico paragonabile a LC.

La metabolomica può analizzare qualitativamente e quantitativamente i metaboliti di piccole molecole nel corpo nel suo insieme, e quindi combinare l'integrazione delle informazioni di più database per l'analisi statistica multidimensionale, che può caratterizzare la complessa relazione tra fisiologia, patologia e azione farmacologica [{{0}}]. Sulla base della tecnologia LC-MS, questo esperimento ha condotto l'analisi della metabolomica su campioni sierici di ratti nel gruppo normale, nel gruppo di modelli e nel gruppo deserticola a basso dosaggio, con l'obiettivo di esplorare il meccanismo metabolico della cistanche deserticola nell'intervallo di danni riproduttivi causati da adenina nei ratti con deviazione Yang. I risultati hanno mostrato che sono stati sottoposti a screening un totale di 22 metaboliti differenziali correlati e 3 vie metaboliche. L'estratto di cistanche deserticola influisce principalmente sui livelli di 13- hpode, 20- acido carbossy-arachidonic (20- cooh-aa), lpc (o {{1 0}}: {13}}/0: 0: 0) Percorsi metabolici come il metabolismo lipidico, l'acido pantotenico e il coenzima una biosintesi, esercitando così un effetto protettivo riproduttivo.

I lipidi svolgono un ruolo vitale nella trasduzione del segnale, nella produzione di energia e nel mantenimento dell'omeostasi cellulare [24]. Le molecole lipidiche possono essere divise in otto categorie in base alle loro strutture: acidi grassi, glicerolipidi, fosfolipidi, sfingolipidi, steroli, pre-alcol, glicolipidi e polichetidi. I disturbi nel metabolismo degli acidi grassi sono strettamente correlati alla capacità anormale dello sperma [25] e al danno renale cronico [26]. 13- hpode e 20- COOH-AA sono metaboliti di acido linoleico e acido arachidonico, che partecipano alle reazioni di perossidazione lipidica. Quando i loro livelli aumentano, indica che il corpo è più sensibile allo stress ossidativo. Ciò può portare a una produzione eccessiva di specie reattive di ossigeno, che a sua volta porta a una riduzione della funzione riproduttiva maschile [27]. LPC è il tipo più abbondante di lisoglicerofosfolipide nel sangue umano e può indurre lo stress ossidativo nelle cellule testicolari, causando danni riproduttivi [28]. Alcuni ricercatori hanno scoperto che lpc (o -18: {{1 0}}/0: 0) induce stress e apoptosi dei tubi renali, suggerendo una delle cellule di bioomarca per il proliferatore del proliferatore del recettore attivato dal proliferatore del recettore attivato dal recettore attivato dal proliferatore (PPARAT ACTUNATORI ATTIVATO DEL PEROXISOME. deterioramento della funzione renale [29]. Suggerisce che l'estratto di deserticola di cistanche può svolgere un ruolo protettivo riproduttivo nei ratti con carenza di yang renale downregulando i livelli di perossidazione lipidica e inibendo lo stress ossidativo. L'acido pantotenico ha un effetto importante sulla secrezione di testosterone e sulla motilità degli spermatozoi. La sua pantetina metabolita è la materia prima per la sintesi del coenzima A, che partecipa ulteriormente alla regolazione del metabolismo energetico e al metabolismo degli acidi grassi [30]. L'estratto di deserticola di cistanche può promuovere il metabolismo energetico del corpo e ridurre il danno dello stress ossidativo al sistema riproduttivo di ratti con carenza di yang renale regolando il livello di pantetina. Ciò indica che l'estratto di deserticola cistanche può svolgere un ruolo antiossidante regolando il metabolismo lipidico, la biosintesi dell'acido pantotenico e del coenzima A e quindi proteggere la funzione riproduttiva dei ratti con carenza di yang renali.
Inoltre, le cellule Leydig sono il sito principale della produzione di T e la formazione di precursore Tincenolone dipende dalla funzione mitocondriale nelle cellule Leydig. Studi hanno dimostrato che un eccessivo accumulo di specie reattive di ossigeno nelle cellule Leydig è associato a disturbi della sintesi T. Eccessive specie reattive di ossigeno inducono un danno mitocondriale, con conseguente inibizione dell'adenosina trifosfato (ATP) e della sintesi di adenosina ciclofosfato (CAMP), inibendo così l'espressione degli enzimi correlati alla sintesi T e portando a una riduzione dei livelli T [31]. I risultati di questo esperimento hanno mostrato che l'estratto di deserticola di cistanche ha invertito significativamente la riduzione indotta dall'adenina dei livelli sierici di T. I risultati dell'analisi della metabolomica erano simili a quelli riportati in letteratura, cioè l'estratto di deserticola di cistanche può promuovere la sintesi di T alleviando il danno ossidativo delle cellule di Leydig.

I risultati della determinazione del contenuto dell'estratto di cistanche deserticola hanno mostrato che echinacoside, verbascoside, salidroside, betaina e cistanches A può essere potenziali ingredienti attivi. Precedenti studi hanno dimostrato che l'echinacoside può proteggere il testicolo dal danno da stress ossidativo attivando gli enzimi antiossidanti e i fattori relativi alla segnalazione della proteina chinasi attivata dal mitogeno (MAPK) [32]; Il salidroside può sovraregolare i fattori antiossidanti del corpo per contrastare il danno della barriera del sangue ematico causato dallo stress ossidativo, promuovendo così la spermatogenesi [33]; La verbastro può migliorare significativamente l'attività di proliferazione delle cellule TM3 trattate con perossido di idrogeno, proteggendole parzialmente dal danno da stress ossidativo [34]; La betaina può sovraregolare i livelli di espressione dei geni correlati agli antiossidanti nel testicolo dei topi esposti al piombo, tra cui superossido dismutasi 1, glutatione perossidasi 1 e catalasi e migliorare significativamente il punteggio di Johnson testicolare [35]; È stato inoltre riportato che Cistancheside A riduce l'aumento anormale delle specie reattive dell'ossigeno nella spermatogonia indotta dall'ipossia e riduce l'apoptosi cellulare [36]. Tutto ciò suggerisce che echinacoside, verbastro, salidroside, betaina e cistancheside A possa essere la base materiale importante per la cistanche per alleviare i sintomi della carenza di yang renale nei ratti indotti dall'adenina. In sintesi, l'estratto di cistanche può alleviare i sintomi della carenza di yang renale nei ratti indotti dall'adenina, nonché il danno patologico del testicolo e dell'epididimo, ripristinare la funzione dell'asse HPG danneggiato, migliorare la qualità dello sperma ridotta e quindi migliorare la funzione riproduttiva dei ratti con difficoltà renamente Yang; Il suo meccanismo d'azione può essere correlato alla regolazione del metabolismo lipidico, alla biosintesi dell'acido pantotenico e al coenzima A, ecc. Echinacoside, verbastro, salidroside, betaina e cistancheside a sono le possibili basi potenziali bioattive, che necessitano di ulteriori verifiche esperimentali.