Parametri di estrazione e metodi di essiccazione delle Cistanche Deserticola

Cistanche è la Cistanche deserticola YC Ma oCistanche tubulosa (Schenk) Wightfusto secco e carnoso con foglie squamose della pianta OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Il principale ingrediente attivo di Cistanche deserticola sono i glicosidi del feniletanolo [2-4]. Studi farmacologici hanno dimostrato che ha le funzioni diafrodisiaco, migliorare l’immunità, Epotenziando la memoria[4-9].

Negli ultimi anni, la metodologia della superficie di risposta è stata ampiamente utilizzata nell'estrazione della medicina tradizionale cinese [{{0}}]. Il metodo della superficie di risposta presenta i vantaggi intrinseci di un'elevata precisione di rilevamento, un minor numero di esperimenti richiesti, una previsione accurata dei modelli di funzione e la capacità di riflettere la relazione tra fattori e valori previsti [15-17]. Pertanto, questo esperimento utilizza il punteggio completo del contenuto dei cinque glicosidi del feniletanolo come valore di risposta e utilizza il software Design-Expert 8.0.6.1 per progettare l'esperimento, ottimizzare il processo di estrazione di Cistanche deserticola e fornire informazioni per l'identificazione e definizione di standard di qualità diCistanche deserticola.

Attualmente, l'indicecomponenti echinaceaside e verbascosidesono temi di ricerca caldi nella tecnologia di estrazione e lavorazione diCistanche deserticola. L'edizione 2015 della Farmacopea cinese stabilisce che il metodo di lavorazione della Cistanche deserticola è "rimuovere le impurità, lavare, inumidire, tagliare a fette spesse e asciugare". [1], non esistono norme chiare sul metodo di essiccazione. Pertanto, questo esperimento ha utilizzato otto diversi metodi di essiccazione, tra cui l'essiccazione al sole, l'essiccazione all'ombra, l'essiccazione in forno (40, 60, 80, 100, 120 gradi) e la liofilizzazione, per elaborare la Cistanche deserticola [18], che ha fornito la base teorica per la processo di essiccazione della Cistanche deserticola.

Sulla guida.

ESTRATTO DI CISTANCHE CON IL 30% DI ECHINCAOSIDE

1 Materiali e strumenti

La Cistanche deserticola fresca è stata raccolta nell'ottobre 2018. Il luogo di origine è il comune di Mitan, contea di Minqin, Baiyin, provincia di Gansu. Il professore associato Guo Yehong dell'Università agraria del Gansu l'ha identificato come Cistanche deserticola YC Ma, uno stelo carnoso con foglie squamose. Sostanze di riferimento echinaceaside (numero di lotto 82854-37-3, frazione di massa maggiore o uguale al 98%), cistancheaside A (numero di lotto 93236-42-1, frazione di massa maggiore o uguale al 95%), verbascoside (numero di lotto { {5}}, frazione di massa maggiore o uguale al 98%), isomurabasina (numero di lotto 61303-13-7, frazione di massa maggiore o uguale al 98%), 2′-acetil verbascoside (numero di lotto 94492-24-7 , frazione di massa maggiore o uguale al 95%) sono stati acquistati da Chengdu Pu. Feide Biotecnologia Co., Ltd.; l'acido formico e il metanolo sono di grado cromatografico, Merck Company of Germany; l'acqua è acqua purificata e gli altri reagenti sono di grado analitico.

Cromatografo liquido Waters Acquity, rilevatore PDA, workstation cromatografica Empower e sistema di gestione dei solventi quaternari; Pulitore a ultrasuoni KQ-100E, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.

Azienda; Bilancia analitica AL104, Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.; Liofilizzatore LyoQuest-85, Telstar, Spagna.

2 Metodi e risultati

2.1 Preparazione della soluzione di riferimento

Pesare con precisione le quantità appropriate diechinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascosidee standard di riferimento 2'-acetil verbascoside e aggiungere il 70% di metanolo per ottenere le concentrazioni di massa 1.04, 0.61, 0.63, 0,39 e 0,48 mg/ml di soluzione di riferimento mista.

2.2 Condizioni cromatografiche di Cistanche deserticola

Simmetria delle acque C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm); temperatura della colonna 30 gradi, flusso di volume 1,0 ml/min; la fase mobile è metanolo-0, soluzione acquosa di acido formico all'1%, gradiente di eluizione: 0~12 min, 29%~34% di metanolo; 12-40 min, 34%-40% di metanolo; 30-35 min, 40%-35% di metanolo; 35-40 min, 30% di metanolo;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acetylacteoside

Fig. 1 HPLC del campione misto di riferimento (A) e C. deserticola (B)

2.3 Preparazione della soluzione di prova

Pesare con precisione 1 g di polvere essiccata di Cistanche deserticola in una beuta (passata attraverso un setaccio a rete), aggiungere 50 ml di metanolo al 50%, pesare la massa, ad ultrasuoni a 40 kHz a 150 W, raffreddare a temperatura ambiente , e compongono la massa per ottenerlo.

2.4 Studio della relazione lineare

Prendi {{0}},1, {{20}},5, 1, 2, 4 e 8 ml della soluzione di riferimento mista di cui sopra in un contenitore da 10 ml matraccio tarato e aggiungere il 70% di metanolo fino alla tacca. Prelevare esattamente 10 μL e misurare secondo le condizioni cromatografiche di "2.2". La concentrazione di massa è l'ascissa (X) e l'area del picco è l'ordinata (Y). Eseguire la regressione lineare e le equazioni di regressione sono: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, intervallo lineare 10,4~832,0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, intervallo lineare 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasina Y＝92 831 Glicoside Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, intervallo lineare 4,8~384,0 ug/mL.

2.5 Revisione metodologica

2.5.1 Ispezione di precisione

Prendere 20 μL della soluzione di riferimento mista al punto "2.1" e iniettare 6 volte ininterrottamente per misurare le aree dei picchi di echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascoside e 2'-acetilverbascoside. Gli RSD sono rispettivamente pari allo 0.23%. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, indicando che lo strumento ha una buona precisione.

2.5.2 Test di ripetibilità

Prelevare 6 porzioni dello stesso campione di Cistanche deserticola, preparare la soluzione di prova secondo il punto "2.3", iniettare il campione nelle condizioni cromatografiche del punto "2.2" e misurare l'area del picco. Risultati Le frazioni di massa medie di echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside e 2′-acetil verbascoside erano 1,83%, 0 0,21%, 2,34%, 0 0,13% e {{15 }}.68% rispettivamente, e gli RSD erano rispettivamente 1,32. %, 0.83%, 1,24%, 2,19%,

0.78%, indicando che il metodo ha una buona ripetibilità.

2.5.3 Prova di stabilità

Determinare la stabilità della stessa soluzione di prova (preparata secondo "2.3") a 0, 2, 4, 8, 12, 24 e 48 ore per ottenere echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside e isolebascoside. , area del picco del 2′-acetil verbascoside, RSD erano rispettivamente 0,58%, 0,21%, 1,58%, 1,46%, 2,19%, indicando che la soluzione test era stabile entro 48 ore.

2.5.4 Test di recupero del campione

Prelevare 1 g di 6 campioni di Cistanche deserticola con contenuto noto e aggiungere accuratamente una certa quantità di soluzione mista di riferimento (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /mL, Verbascoside 2,17 mg/mL, Isolebascoside 0,79 mg/mL, 2′-acetil verbascoside 0,91 mg/mL), aggiungere metanolo al 70% per ottenere un volume di 50 mL e iniettare i campioni secondo le condizioni cromatografiche di "2.2". I recuperi medi misurati sono rispettivamente 101,52%, 99,21% e 102,62%. , 98,62%, 97,36%, RSD sono rispettivamente 1,64%, 1,95%, 0,87%, 1,59%, 1,13% e il tasso di recupero del campione è buono.

La Cistanche è una nota erba tonica che può nutrire e proteggere i reni. Nella teoria della medicina tradizionale cinese, la Cistanche è l'erba migliore per i reni. La Cistanche è ricca di echinacoside, acteoside e flavonoidi. Questi ingredienti efficaci nella Cistanche possono ridurre l'apoptosi delle cellule renali e aumentare la proliferazione delle cellule renali. Pertanto, Cistanche è un integratore naturale per i reni.