Preparazione e stabilità di emulsione pickering caricata dal resveratrolo stabilizzato dalla proteina di noce/ cistanche deserticola polisaccaridica nanoparticelle composite

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In questo studio, proteina di noce/Cistanche deserticola polisaccaride(WP/CDPS) Le nanoparticelle composite sono state costruite e impiegate come stabilizzatore per preparare un'emulsione piccante. Le nanoparticelle e l'emulsione Pickering sono state valutate in termini di dimensioni delle particelle, indice di polidispersità e potenziale Zeta. È stato studiato l'effetto del rapporto di massa WP/CDPS sulla tensione interfacciale, stabilità di archiviazione, stabilità termica, efficienza di incapsulamento, microstruttura e stabilità di ossidazione dell'emulsione Pickering. I risultati hanno mostrato che con l'aumento della proporzione di CDP, il potenziale zeta delle nanoparticelle WP/CDPS è gradualmente diminuito da -22 a -37 mV. L'emulsione Pickering (C1W1R) con un rapporto di massa di WP e CDP di 1: 1 aveva la più piccola dimensione media delle particelle (5,927 μm), la più bassa tensione interfacciale (11,88 mn/m), una buona stabilità di conservazione e stabilità termica. Dopo 480 ore di conservazione, la proporzione dello strato emulsionato era del 95,6%. La dimensione delle particelle di C1W1R ha avuto il più piccolo cambiamento con la temperatura. I risultati della microscopia a scansione laser confocale (CLSM) hanno mostrato che l'emulsione stabilizzata con WP/CDPS potrebbe incapsulare efficacemente il resveratrolo (RT) con un'efficienza di incapsulamento di oltre l'85%, che era superiore a quella dell'emulsione stabilizzata del WP e l'efficienza di incapsulazione ha raggiunto il 92,9% dopo 35 giorni di conservazione. Le emulsioni di Pickering stabilizzate da WP/CDPs offrono un promettente vettore alternativo per la consegna a stato stazionario del resveratrolo nell'industria alimentare funzionale e in altre industrie correlate.

Parole chiave:proteina di noce;Cistanche deserticola polisaccaride; resveratrolo; Emulsione pickering; stabilità

Cistanche Heral integratori con elevato echinacoside e acteoside

 

 

 

 

Il resveratrolo (RT) è un composto organico polifenolo naturale non flavonoide estratto dalle piante. È ampiamente utilizzato per le sue varie attività farmacologiche come antinfiammatorio, antiossidante, anti-tumore, neuroprotezione e miglioramento del danno ischemico. preoccupazione diffusa [1-2]. Negli ultimi anni, RT è stata ampiamente utilizzata in cibo, farmaceutico, cosmetici e altri settori. Tra i vari fattori funzionali, la struttura trans isomero di RT contiene gruppi funzionali come anelli aromatici, gruppi idrossilici fenolici e doppi legami, che ha una maggiore attività biologica [3-4]. Tuttavia, è stato riferito che il fenomeno dell'isomerizzazione e la scarsa solubilità idrica di RT ne limitano lo sviluppo e l'utilizzo nella trasformazione degli alimenti, nella preparazione dei farmaci e nella preparazione attivo della membrana. L'incapsulamento nei sistemi di consegna come nanoparticelle ed emulsioni può migliorare significativamente la sua stabilità e solubilità idrica e può efficacemente controllare il rilascio lento e sostenuto di RT in un ambiente specifico del tratto gastrointestinale, migliorando così la biodisponibilità di RT [5-6].
La proteina vegetale ha una buona biocompatibilità e attività superficiale e viene utilizzata nel campo alimentare [7]. Attualmente, sempre più studi hanno scoperto che le nanoparticelle di proteine ​​insolubili in acqua sono eccellenti materiali di trasporto per la preparazione di emulsioni di pickering [8]. La proteina di noce (WP) può essere trasformata in nanoparticelle di proteina di noce (WPN) attraverso l'autoassemblaggio. WPN ha una buona biocompatibilità e bioadesione ed è un materiale portante ideale [9]. Tuttavia, a causa della scarsa solubilità idrica di WPN, le emulsioni di pickering stabilizzate dal WPN sono spesso instabili. Le nanoparticelle composite vengono preparate attraverso la combinazione di proteina-polisaccaride per regolare la solubilità dell'acqua di WPN, come stevia, nanocellulosa, chitosano, ecc. Abbinato all'accoppiamento proteico è stato dimostrato come un metodo efficace per migliorare le proprietà interfacciali delle emulsioni del pickering [{7}]. In considerazione dell'elevata stabilità e delle elevate caratteristiche di sicurezza dell'emulsione di pickering a particelle solide di livello alimentare preparato dalla proteina vegetale, può essere utilizzato per proteggere e fornire RT, ampliando l'ambito dell'applicazione di RT nel campo alimentare.
Cistanche Deserticola Polisaccaride (CDPS) è il componente principale di Cistanche Deserticola. È un eteropolisaccaride acido composto da glucosio, galattosio, ramnosio, arabinosio, fruttosio e altri monosaccaridi. Ha le funzioni di protezione dei nervi e migliorare la funzione intestinale. Flora del tratto, regolare l'immunità
Ha funzioni come la prevenzione di epidemie e il miglioramento della memoria e può essere utilizzato come materie prime per prodotti sanitari o medicinali [13]. ˆ
La combinazione di CDP e proteoglicano gli conferisce una certa stabilità di emulsificazione e può essere utilizzata nella lavorazione degli alimenti anziché in alcuni emulsionanti. Pertanto, sfruttando la forte carica negativa, l'idrofilia maggiore e la migliore dispersibilità dei CDP, si può provare a preparare particelle composite aggravando con WP caricato positivamente per stabilizzare le emulsioni di ickeing. Tuttavia, pochi studi hanno tentato di preparare nanoparticelle composite WP/CDPS con diversi rapporti di massa di WP e CDP per stabilizzare le emulsioni di Pickering.
Sulla base di questo, questo studio ha preparato nanoparticelle composite WP/CDPS modificando il rapporto di massa di WP e CDP e le ha utilizzate per stabilizzare RT. Studia le proprietà fisiche di diverse nanoparticelle composite WP/CDPS e studia gli effetti delle diverse nanoparticelle composite WP/CDPS sulle prestazioni dell'emulsione pickering, al fine di fornire una base teorica per migliorare la performance di emulsificazione e la stazione di emulsificazione di RT.

Cistanche Heral integratori con elevato echinacoside e acteoside

 

1 Materiali e metodi

1.1 Materiali e reagenti

WP Powder (Purity 90%) Peptide Love Biotechnology (Xi'an) Co., Ltd.; NaOH, HCI, etanolo anidro, RT (Purity 99%), cloruro di sodio (grado analitico) Xinjiang Hongdao Instrument Co., Ltd.; Standard RT (HPLC maggiore o uguale al 98%, peso molecolare 228,24 Da) Chengdu Dester Biotechnology Co., Ltd.; CDPS (polvere dopo 80-120 setaccio mesh, purezza 98%, componenti principali: feniletil glicosidi, echinacoside, verbascoside, glicoside Eugenol, Ltd.; Nilo Red Dye Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd.; fluoresceina isotiocianato ester (FITC) Beijing Solebow Technology Co., Ltd.; Kit di acido grasso non esterificato Suzhou Keming Biotechnology Co., Ltd.; metanolo, n-esano, diclorometano (grado cromatografico) Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.

 

1.2 Strumenti e attrezzature

Cientz -30 nd Freeze Dryer, Jy 92- Iine UltraSonic Cell Crusher Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.; Df -101 s Magorr Magnetic Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.; PHS -3 CE Acidità Meter Shanghai Yidian Scientific Instrument Co., Ltd.; VINCER2005E Analyzer per dimensioni delle particelle laser Jinan Micro-Nano Particle Instrument Co., Ltd.; JS94H Zeta potenziale metro Shanghai Zhongchen Digital Technology Equipment Co., Ltd.; Microscopia a scansione laser confocale AXRP (CLSM) Nikon Corporation, Giappone.

 

1.3 Metodi

1.3.1 Preparazione di WPN

WPN è stato preparato con metodo di precipitazione anti-solvente [14]. 2 g wp è stato sciolto in 1 0 0 ml 0. 5 mol/l NaCl Soluzione e agitato a 75 gradi e 300 r/min per 12-24 ore fino a quando non è stato completamente sciolto. Quindi centrifuga a 3 000 r/min per 10 minuti per rimuovere particelle di grandi dimensioni e altre sostanze insolubili. Infine, il valore del pH del surnatante ottenuto è stato regolato a 12,0 con una soluzione 0,1 mol/L HCl o NaOH, e la dispersione è stata pre-frozen in un frigorifero a -80 gradi per 12 h, e quindi asciugare il congelamento a vuoto a -50 gradi per 72 h per ottenere WPN.

 

1.3.2 Preparazione di nanoparticelle composite WP/CDPS

1. 0 G CDPS e WP sono stati dispersi in acqua distillata da 100 ml per preparare la sospensione CDPS all'1% e la sospensione WP. Quindi, la sospensione WP è stata aggiunta alla sospensione CDPS a diversi rapporti di massa di CDP rispetto a WP (4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 e 1: 4) e una miscela di WP e CDP è stata ottenuta sotto agitazione. L'acqua in eccesso è stata evaporata dall'evaporazione rotante sotto vuoto (-0. 1 MPa) a 40 gradi. La dispersione delle nanoparticelle è stata pre-frozen in un frigorifero a -80 gradi per 12 h, e quindi asciugare il congelamento a vuoto a -50 grado per 72 h per ottenere nanoparticelle composite WP/CDPS. Le nanoparticelle composite WP/CDPS con un rapporto di massa CDPS a WP di 4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 e 1: 4 sono state denominate rispettivamente C4W1, C3W2, C1W1, C2W3 e C1W4.

 

1.3.3 Dimensione delle particelle, indice di polidispersità (dimensione delle particelle, PDI) e determinazione del potenziale zeta

 

Secondo la letteratura [15] con lievi modifiche, la dimensione delle particelle di nanoparticelle composite WPN e WP/CDPS è stata misurata utilizzando un metodo bagnato dell'analizzatore di particelle laser. Il PDI è stato determinato usando uno strumento di scattering di luce dinamica. Il potenziale zeta dell'emulsione di Pickering è stato misurato utilizzando un potenziale analizzatore Zeta. Prima dell'analisi, il campione è stato diluito 100 volte con acqua ultrapura per evitare più effetti di scattering.

 

1.3.4 Preparazione di emulsioni pickering

Sono state preparate 100 ml di sospensioni di WPN e diverse nanoparticelle composite WP/CDPS (frazione di massa 1%). RT (frazione di volume 10%) è stato miscelato ad ogni sospensione. L'interruzione delle cellule ad ultrasuoni è stata eseguita a 250 W per 4 minuti. Secondo le diverse nanoparticelle composite WP/CDPS, le emulsioni di Pickering sono state denominate C4W1R, C3W2R, C1W1R, C2W3R e C1W4R. Lo stesso metodo è stato utilizzato per preparare l'emulsione Pickering stabilizzata da WPN e chiamato WPR.

 

1.3.5 Determinazione della tensione interfacciale delle emulsioni pickering

La tensione interfacciale delle emulsioni pickering stabilizzate dalle nanoparticelle composite WP/CDPS è stata determinata secondo il metodo di riferimento [16] con alcune modifiche.
20 μL di emulsione pickering sono stati aggiunti alla siringa e la tensione interfacciale dinamica è stata misurata a 25 gradi. La tensione interfacciale di ciascun campione è stata misurata 3 volte.

 

1.3.6 Determinazione del tasso di incorporamento RT

Il tasso di incorporamento di RT è stato determinato mediante spettrofotometria ultravioletta usando il metodo di Mei Yuqi et al. [17]. L'emulsione diluita (frazione di volume 1%) è stata centrifugata a 9, 000 r/min per 10 minuti a 25 gradi. Il surnatante è stato raccolto e l'assorbanza è stata misurata a 306 nm. Dopo che RT è stato completamente sciolto, è stato opportunamente diluito e il contenuto di RT è stato calcolato in base alla sua curva standard (y=0. 124 2 x + 0. 035 4, r 2=0. 997 7). Il tasso di incorporamento è stato calcolato usando la formula (1):