L'efficacia e il meccanismo del metodo tonificante dei reni e della milza nella prevenzione e nel trattamento della mielosoppressione indotta dalla chemioterapia adiuvante del cancro del colon-retto

Mielosoppressioneindotta dalla chemioterapia è un problema che non può essere ignoratoterapie antitumorali. La Medicina Cinese (CM) è stata utilizzata per prevenire e trattare la mielosoppressione causata dachemioterapia adiuvantenei pazienti concancro del colon-retto(CRC) da anni. Sono stati disegnati studi clinici per valutare l'efficacia della CM sulla mielosoppressione indotta dalla chemioterapia (CIM) nei pazienti con CRC. Tuttavia,prove di alta qualitàè necessaria per il processo decisionale nella pratica clinica e il meccanismo alla base della CM rimane poco chiaro. Pertanto, sono state condotte una revisione sistematica e una meta-analisi per fornire prove di alta qualità sull’efficacia dei CM sulla soppressione del midollo osseo causata dachemioterapia adiuvantenei pazienti con CRC. In secondo luogo, il microbiota intestinale dei pazienti con CRC con diagnosi di stadio II (ad alto rischio)/III, destinati a ricevere chemioterapia adiuvante e qualificati come milza einsufficienza renaleè stato indagato. Infine, abbiamo cercato di esplorare il meccanismo del Qitu Erzhi Decoction (QED), che è stato utilizzato per prevenire la CIM nei pazienti con CRC dal Professor Yufei Yang, sulla base della farmacologia di rete e sperimentale.

NUOVA ERBA PER IL TRATTAMENTOCARENZA RENALE

Parte 1 Efficacia della medicina cinese orale nella mielosoppressione indotta dalla chemioterapia adiuvante in pazienti con CRC: una revisione sistematica e una meta-analisi

Obiettivo: valutare l'efficacia della CM orale sulla prevenzione e il trattamento della mielosoppressione indotta dalla chemioterapia adiuvante in pazienti con CRC.

Metodi: sono state consultate 8 banche dati elettroniche dal loro inizio al 20 gennaio 2021. Lo screening e l'estrazione dei dati sono stati eseguiti in modo indipendente da due revisori. Due ricercatori hanno valutato la qualità metodologica di ricercatori qualificati utilizzando lo strumento Risk of Bias (ROB). Per la meta-analisi è stato applicato RevMan 5.3.

Risultati: nello studio sono stati inclusi un totale di 37 documenti, tutti studi randomizzati e controllati (RCT), che hanno coinvolto un totale di 2705 soggetti. I risultati della meta-analisi mostrano che il CM orale ha ridotto significativamente l'incidenza di leucopenia (RR=0.67, 95%CI[0.61,0.75], P<0.00001), hemoglobin         reduction         (RR=0.75,95%CI[0.63, 0.89], P<0.0009), thrombocytopenia                  (RR=0.71,95%CI[0.60,0.82], P<0.0001), neutropenia(RR=0.60,95%CI[0.46,0.79], P=0.0003), grade       3/4        leukopenia(RR= 

{{0}}.36,95%CI[0.21,0.64],P=0.04),grado 3 /4 riduzione dell'emoglobina (RR=0.36,95% CI[0.13,0.95],P=0.04) e grado 3/4 neutropenia (RR=0.38,95%CI[0.16,0.89], P=0.03) indotta dalla chemioterapia adiuvante in pazienti con CRC. Tuttavia, i CM orali non possono ridurre l'incidenza dell'eritropenia , trombocitopenia di grado 3/4 o eritropenia di grado 3/4. Inoltre, la CM orale non sembra utile per aumentare la conta dei globuli bianchi (WBC), la conta dei globuli rossi (RBC), le piastrine (PLT) o l'emoglobina (HGB).

Conclusioni: i CM orali possono essere efficaci nel ridurre l'incidenza di leucopenia, anemia, trombocitopenia, neutropenia, leucopenia di grado 3/4, riduzione dell'emoglobina di grado 3/4 e neutropenia di grado 3/4 indotte dalla chemioterapia adiuvante nei pazienti con CRC. Si può considerare di raccomandare CM orali per la prevenzione e il trattamento della mielosoppressione causata dalla chemioterapia adiuvante in pazienti con cancro del colon-retto.

Parte 2 Studio sulle caratteristiche del microbiota intestinale di pazienti con cancro del colon in stadio II (alto rischio)/II che saranno sottoposti a chemioterapia adiuvante e con diagnosi di deficit di Yang della sindrome della milza e dei reni basato sulla medicina cinese

Obiettivo: studiare le caratteristiche del microbiota intestinale nei pazienti con cancro del colon, che riceveranno chemioterapia adiuvante e a cui è stata diagnosticata la sindrome da deficit di Yang della milza e dei reni (gruppo D) o meno (gruppo N).

Metodi: Sono stati reclutati soggetti dell'Ospedale Xiyuan dell'Accademia cinese di scienze mediche cinesi, dell'Ospedale di medicina cinese della provincia di Jiangsu e così via, e sono stati divisi in due gruppi in base alla differenziazione della sindrome CM. Campioni di feci di pazienti qualificati sono stati raccolti e analizzati utilizzando la tecnologia di sequenziamento ad alto rendimento del rDNA 16s.

Risultati: 32 pazienti sono stati qualificati, di cui 11 e 21 rispettivamente nel gruppo D e nel gruppo N. Non è stata riscontrata alcuna differenza statistica tra i due gruppi in termini di sesso, età o sede primaria del cancro. Non c’era alcuna differenza statistica tra i due gruppi in termini di ricchezza, diversità o uniformità della comunità. Il rapporto Firmicutes/Bacteroidetes (FBR) nel gruppo D era inferiore a quello del gruppo N, sebbene sia Firmicutes che Bacteroidetes fossero le popolazioni preponderanti dei due gruppi. Le enterobatteriacee sono aumentate nel gruppo D mentre le sutterellaceae sono aumentate nel gruppo N. Inoltre, sia i Clostridia che i Flavobacteriales sono aumentati nel gruppo D con

Differenza statistica

Conclusioni: Non è stata riscontrata alcuna differenza tra la sindrome da deficit di Yang della milza e dei reni e altre sindromi della MTC nei pazienti con cancro del colon che hanno intrapreso la chemioterapia adiuvante per quanto riguarda la ricchezza, la diversità o l'uniformità della comunità. L'FBR può differire tra le due sindromi della MTC. Le Sutterellaceae sono aumentate nel gruppo N mentre le Enterobacteriaceae, i clostridi e i Flavobacteriales sono aumentati nel gruppo D.

Parte 3 Studio sul meccanismo molecolare della QED nel trattamento della mielosoppressione indotta dalla chemioterapia basato sulla farmacologia di rete

Obiettivo: esplorare il meccanismo molecolare della QED nel trattamento della CIM.

Metodi: (1) Gli ingredienti principali della QED sono stati ricercati nel database farmacologico e nella piattaforma di analisi dei sistemi di medicina tradizionale cinese (TCMSP) e nell'Enciclopedia della medicina tradizionale cinese (ETCM). (2) Carica i potenziali ingredienti efficaci su Swiss Target Prediction per ottenere gli obiettivi. (3) Gli obiettivi correlati alla malattia sono stati ottenuti interrogando il database TTD, il database Gene Card, Drugbank Online e il database OMIM. (4) L'analisi di Wayne è stata utilizzata per ottenere l'intersezione tra i target correlati alla malattia CIM e i potenziali target della QED. Una rete di interazione proteina-proteina (PPI) è stata realizzata nel database di stringhe. (5) L'analisi dell'ontologia genetica (GO) e l'analisi del percorso di arricchimento dell'enciclopedia dei geni e del genoma di Kyoto (KEGG) delle proteine ​​bersaglio chiave sono state condotte tramite la piattaforma dati Metascape. Sono stati presentati entrambi i risultati dell'analisi GO e KEGG.

Risultati: 15,6,10,10,11 e 49 ingredienti sono stati identificati come potenziali ingredienti attivi di Hedysarum Multijugum Maxim (Huang qi), Angelicae Sinensis Radix (Dang GUI), Ecliptae Herba (Mo han lian), Fructus Ligustri Lucidi ( Nv zhen zi), Cuscutae Semen (Tu si zi) e Fructus Psoraleae (Bu gu zhi), rispettivamente. Un totale di

575 target sono stati definiti come target principali del QED. 3205 target correlati alla malattia CIM sono stati ottenuti utilizzando i 4 database. 347 target del QED potrebbero avere effetti terapeutici sul CIM. L'analisi della mappa della rete PPI ha rilevato che molti target potrebbero essere coinvolti in questo processo, come l'analisi PIK3CA, PIK3R1, MAPK1, SRC, MAPK3, AKT1, STAT3.GO e l'analisi del percorso di arricchimento KEGG ha mostrato che la QED può prevenire e/o trattare CIM tramite senescenza cellulare, via di segnalazione PI3K-Akt e segnalazione NF-kB

percorso.

Conclusioni: la QED può influenzare la via di segnalazione PI3K-Akt, la senescenza cellulare e/o la via di segnalazione NF-kB per prevenire e/o trattare la CIM.

Parte 4 Creazione e confronto del modello di mielosoppressione indotta dalla chemioterapia nei topi BALB/c mediante 5-Fu/5-Fu più L-OHP

Obiettivo: stabilire un modello CIM in BALB/topi utilizzando 5-Fu più L-OHP e confrontare il nuovo modello con un modello preesistente che utilizzava solo 5-Fu.

Metodi: 100 topi maschi BALB/c sono stati divisi casualmente in 5 gruppi:5-Fu (ad alte dosi)(MH)gruppo(n=20),5-Fu (a basse dosi) (ML)gruppo(n=20),5-Fu+L-OHP

(ad alta dose)(DH)gruppo (n=20),5-Fu+L-OHP (a bassa dose)(DL)gruppo(n=20) ​​e gruppo di controllo(n =20) e la mielosoppressione è stata indotta utilizzando {{10}}Fu 180 mg/kg,5-Fu 150 mg/kg,5-Fu 150 mg/kg più L -OHP 7,2 mg/kg,5-Fu 112,5 mg/kg più L-OHP 5,4 mg/kg e soluzione di cloruro di sodio allo 0,9% mediante iniezione intraperitoneale, rispettivamente. Sono state misurate le condizioni generali, il peso, i globuli bianchi, i globuli rossi, il PLT e l'HGB nel sangue periferico. Le cellule nucleate del midollo osseo (BMNC) sono state testate su d6 e d13 dopo che i topi erano stati sacrificati.

Risultati: (1) Mortalità: ci sono 4 e 6 topi che sono morti nel gruppo MH e nel gruppo DH rispettivamente da d7 a d13. (2)Peso: rispetto al gruppo di controllo, il peso dei topi nei gruppi modello è inizialmente diminuito, soprattutto sia nel gruppo DH che nel gruppo DL, e poi è aumentato. (3) Rispetto al gruppo di controllo, sia WBC che PLT nei quattro gruppi modello sono diminuiti in d6(P<0.01).WBC of mice in the M-H group recovered to a level close to the control group(P>0.05), while the WBC of mice in the ML group, D-H group, and D-L group surpassed both the baseline and control group on d13, though the difference was not statistically significant(P>0.05). Il PLT dei topi nei quattro gruppi modello è aumentato in modo significativo ed è stato superiore sia al gruppo di riferimento che a quello di controllo (P<0.01). The experiment witnessed a sustained downward trend of RBC and HGB in the four model groups during the whole process. (4)Compared to the control group, BMNCs of mice in the four model groups decreased significantly(P< 0.01)on d6. There was an escalating trend of BMNCs on d13 compared to d6, though lower than the BMNCs in the control group(P<0.01).BMNCs of mice in the D-L group were more than those in the M-L group and D-H group(P<0.01).10vwW.

Conclusioni: (1) Tutti e quattro i regimi possono indurre i topi BALB/c a sviluppare mielosoppressione. (2) La mortalità nel gruppo MH e nel gruppo DH era rispettivamente superiore al 30% e al 50%, il che indicava un dosaggio eccessivo nei due gruppi. (3) Non sono state riscontrate differenze tra il gruppo ML e il gruppo DL in termini di mielosoppressione, peso e mortalità.

Parte 5 Uno studio sperimentale sugli effetti e sul meccanismo della QED nel trattamento della mielosoppressione indotta dalla chemioterapia

Obiettivo: valutare l'efficacia della QED sulla mielosoppressione indotta da 5-Fu e indagare il meccanismo.

Metodi: 120 topi maschi BALB/c sono stati divisi casualmente in 6 gruppi, con 20 topi in ciascun gruppo: gruppo di controllo (gruppo C), gruppo modello (gruppo M), gruppo G-CSF (gruppo G), dosaggio elevato del gruppo QED (QED-H), dosaggio medio del gruppo QED (QED-M) e dosaggio basso del gruppo QED (QED-M). Differenti dosaggi di QED sono stati somministrati al gruppo QED-H, al gruppo QED-M e al gruppo QED-L dal d-6 al d13 mediante somministrazione intragastrica. Al d0, la mielosoppressione è stata indotta mediante iniezione di 5-Fu in tutti i 6 gruppi, ad eccezione dei topi del gruppo C. Ai topi del gruppo G è stato somministrato G-CSF mediante iniezione intraperitoneale da d1 a d13. Nei giorni d-7, d0 e a giorni alterni dopo la modellazione, i topi sono stati pesati ed è stato raccolto il sangue prelevato utilizzando il metodo del polsino della coda per testare WBC, RBC, HGB e PLT dei topi. 10 topi in ciascun gruppo sono stati soppressi rispettivamente in d6 e d13. BMNC, ciclo cellulare dei BMNC e TNF-a/IL-  6/ROS/ È stato testato l'INF-y/SCF nel plasma. Inoltre, i tessuti del midollo osseo di 3 topi del gruppo C, gruppo M e gruppo QED-M sono stati raccolti per studiare l'espressione di p38, E2F e c-myc utilizzando metodi Western blot e qPCR.

Risultati: (1):①Il giorno 6, rispetto al gruppo C, i globuli bianchi del gruppo M erano diminuiti (p<0.01), WBC of both QED-H and QED-M group were higher than M group(P<0.01 or  P<0.05); on  d13, WBC  of  M  group  was  lower  than  C  group(P<0.01), WBC  of QED-M group was increased compared with the M group(P<0.05).②Both RBC and HGB of mice in the M group decreased compared with the C group both on d6 and d13 (P<0.05  or  P<0.01); there  was  no  difference  between  the  M  group  and  the  QED groups  in  terms  of RBC  or  HGB.③PLT  declined  in  the  M  group(P<0.01)on  d6

mentre è aumentato di 13 rispetto al gruppo C. Non c’era alcun dato statisticamente significativo 11

Prefazione

Le ultime statistiche sul cancro dell'Agenzia internazionale per la ricerca sul cancro (IARC) mostrano che nel 2020 si sono verificati 1,9 milioni di nuovi casi di cancro del colon-retto e 930.000 decessi per cancro del colon-retto in tutto il mondo; ci sono stati 560,000 nuovi casi di cancro del colon-retto in Cina e circa 290,000 decessi per cancro del colon-retto. L’incidenza e la mortalità del cancro del colon-retto sono ancora in aumento in tutto il mondo e nel mio Paese.

Al 40%-50% dei pazienti affetti da cancro del colon-retto viene diagnosticato nelle fasi iniziali e intermedie, momento in cui la chirurgia radicale diventa la chiave del trattamento. Per i pazienti con stadio patologico postoperatorio II (ad alto rischio)/stadio III, o pazienti dopo un intervento chirurgico radicale per lo stadio IV, la chemioterapia adiuvante può migliorare ulteriormente la sopravvivenza libera da malattia (DFS) e/o la sopravvivenza globale (OS) del paziente. Tuttavia, la soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia adiuvante spesso porta a una riduzione dei farmaci chemioterapici, a un ritardo nella chemioterapia o addirittura alla sua interruzione. I fattori di crescita ematopoietici (HGF), ampiamente utilizzati nella pratica clinica, possono essere utilizzati per prevenire e trattare la soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia, ma alcuni pazienti hanno scarsa risposta agli HGF. Allo stesso tempo, l’uso degli HGF può portare nuovi problemi clinici.

Nel mio paese, la prevenzione e il trattamento della soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia mediante la medicina tradizionale cinese sono accettati da molti medici e pazienti.

Tuttavia, la maggior parte degli studi clinici correlati esistenti sono studi su piccoli campioni. L’efficacia della medicina tradizionale cinese nella prevenzione e nel trattamento della soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia deve essere valutata oggettivamente e il suo meccanismo d’azione necessita di essere ulteriormente studiato.

Il professor Yang Yufei, il tutor, ha riassunto la sua pluriennale esperienza clinica e, basandosi sul principio guida di "beneficiare coloro che sono danneggiati" nel Classico di medicina interna dell'Imperatore Giallo, ha formulato la ricetta Qitu Erzhi per prevenire e curare la soppressione del midollo osseo causato dalla chemioterapia adiuvante per il cancro del colon-retto rafforzando la milza e i reni. L'applicazione clinica ha un'efficacia significativa. Tuttavia, il meccanismo d’azione della ricetta Qitu Erzhi non è ancora chiaro.

Questo studio (1) ha utilizzato una revisione sistematica e una meta-analisi per valutare l'efficacia della medicina tradizionale cinese nella prevenzione e nel trattamento della soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia adiuvante per il cancro del colon-retto, al fine di fornire una medicina basata sull'evidenza per la pratica clinica; (2) hanno esplorato preliminarmente le caratteristiche di distribuzione della flora intestinale in pazienti con deficit di yang della milza e del rene dopo un intervento chirurgico radicale per cancro del colon di stadio II (ad alto rischio)/stadio III; (3) esplorato il meccanismo di efficacia della prescrizione di Qitu Erzhi nella prevenzione e nel trattamento della soppressione del midollo osseo causata dalla chemioterapia basata sulla farmacologia di rete; (4) hanno esplorato il metodo di somministrazione e la dose ottimale di 5-Fu combinato con un modello animale di soppressione del midollo osseo indotta da oxaliplatino; (5) hanno esplorato e verificato il meccanismo di efficacia della prescrizione di Qitu Erzhi nella prevenzione e nel trattamento della soppressione del midollo osseo indotta da 5-Fu attraverso esperimenti sugli animali.

Questo studio è stato condotto sulla base del progetto chiave del Programma nazionale di ricerca e sviluppo del Ministero della Scienza e della Tecnologia della Repubblica popolare cinese "Ricerca sulla modernizzazione della medicina tradizionale cinese" "Studio sull'effetto sinergico e sul meccanismo di prescrizione sequenziale del tonificante della milza and tonifying renal on adiuvante chemioterapia del cancro del colon (2017YFC1700604)" e la National Natural Science Foundation of China "Study on the Mechanism of sequential Therapy of tonifying spleen and tonifying renale nel miglioramento della chemioterapia indotta dal tratto digestivo e dalla tossicità del midollo osseo basato sulle cellule staminali rigenerazione regolata da Wnt/ -catenina (8197142427)".