I triterpenoidi di Lanostane in Poria Cocos svolgono ruoli benefici nell'attività immunoregolatoria
Jul 08, 2022
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Astratto:Poria cocos (Schwein) FA Wolf (syn. Wolfiporia cocos) sclerozio essiccato, chiamato pieghevole, è un fungo saprofita commestibile comunemente usato come tonico e antietà nella medicina tradizionale cinese. È tradizionalmente usato in combinazione con altre medicine tradizionali cinesi per migliorare l'immunità. Questo studio ha dimostrato che l'estratto di P. cocos (Lipucan⑨) contenente lanostano triterpenoidi non ha immunotossicità e migliora l'immunità non specifica (innata) attivando le cellule natural killer e promuovendo la secrezione di interferone (IFN-y) da parte delle cellule T-helper di tipo 1(Th1) risposta immunitaria. Inoltre, l'estratto di P. cocos ha ridotto significativamente la secrezione di interleuchina (IL-4 e IL{7}}) da parte della risposta immunitaria delle cellule T-helper di tipo 2 (Th2), che è correlata alla risposta allergica. I triterpenoidi di lanostano purificati sono stati identificati per la prima volta come principi attivi di P. cocos con una maggiore immunità non specifica promuovendo la secrezione di interferone (IFN-) in uno studio preliminare. I nostri risultati supportano che l'estratto di P. cocos svolge un ruolo benefico nell'attività immunoregolatoria.
Parole chiave:Cocos di Poria; triterpenoidi lanostano; immunotossicità; Th1/Th2: immunoregolazione
1. Introduzione
Le infezioni virali come i virus respiratori (inclusi virus dell'influenza, rinovirus, adenovirus e coronavirus), herpes e virus dell'immunodeficienza umana (HIV) minacciano seriamente la salute umana. Questi virus respiratori altamente contagiosi infettano la popolazione mondiale, diventano pandemie e causano molti decessi. Questa minaccia si è evoluta in un problema di salute personale e anche in questioni economiche, di sicurezza e sociali internazionali [1]. La vaccinazione è attualmente il mezzo principale per controllare la diffusione delle infezioni da virus dell'influenza. Tuttavia, a causa della famigerata capacità del virus di mutare, ogni anno devono essere sviluppati nuovi vaccini. È urgente sviluppare farmaci antivirali o approcci terapeutici efficaci. Sfortunatamente, sono necessari molti anni e centinaia di milioni di dollari per sviluppare nuovi farmaci, spesso troppo tardi per combattere un'improvvisa epidemia di virus. Rapporti recenti hanno indicato che le persone di età superiore ai 50 anni sono principalmente infette da virus respiratori [2,3]. L'invecchiamento è uno dei motivi strettamente correlati ai difetti del sistema immunitario, tra cui la funzione cellulare e il numero [4-6]. L'auto-cura è un approccio importante utilizzato nella maggior parte dei paesi per ridurre le spese mediche personali e l'onere dell'assistenza sanitaria sociale |7,8]. Lo sviluppo di potenziatori dell'immunità per aumentare la resistenza dell'ospite all'infezione virale e migliorare l'adattabilità dell'ospite è un approccio importante che ha ricevuto molta attenzione di recente [9,10].
La prima linea di difesa del corpo umano contro gli agenti patogeni comprende le barriere fisiologiche come la pelle, il tessuto sottocutaneo e la mucosa. La seconda linea di difesa è il sistema immunitario, composto da organi immunitari, cellule immunitarie e molecole immunitarie. Il sistema immunitario si divide in immunità innata e immunità adattativa [11]. Il sistema immunitario innato è un sistema immunitario non specifico. Può distinguersi tra se stesso e non sé senza esposizione ripetuta ad agenti patogeni come batteri e virus. A causa delle sue caratteristiche non specifiche, ha un'ampia capacità di combattere infezioni multiple [12]. Le cellule natural killer (NK) e l'interferone (IFN sono i componenti antivirali chiave del sistema immunitario innato nella difesa dell'ospite contro l'infezione virale respiratoria [13]. Le cellule NK hanno la capacità di uccidere rapidamente le cellule infettate dai virus. Inoltre, le cellule NK si attivano anche altre cellule immunitarie, cellule T helper (Th1) di tipo 1, rilasciando IFN- 【14,15】 Gli interferoni hanno la capacità di interferire con la replicazione virale e possono essere suddivisi in tre tipi inclusi gli interferoni I (IFN-, IFN-) , II (IFN-y), e ⅢI (IFN-λ)【16,17】.La replicazione del virus è una fase fondamentale importante della vita del virus.Le cellule svolgono un ruolo essenziale nella difesa contro l'infezione virale [18].D'altra parte mano, le cellule T-helper di tipo 2 (Th2) secernono principalmente interleuchine (IL) tra cui IL{22}} e IL{23}} e promuovono le cellule B a secernere anticorpi immunoglobuline E(IgE) per promuovere l'immunità umorale e indurre una risposta allergica [19].

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La limatura (lo sclerozio essiccato di Poria cocos(Schwein.)FAWolf(syn. Wolfiporia cocos)), un noto tonico e antietà nella medicina tradizionale cinese, è stato ampiamente utilizzato come sedativo e diuretico per più di duemila anni [ 20]. È stato dimostrato che P. cocos ha funzioni antinfiammatorie, antitumorali, anti-iperglicemizzanti, sedative e anti-invecchiamento con i lanostane triterpenoidi identificati come componenti attivi [21-30]. Inoltre, è stato dimostrato che la frazione di acetato di etile e la frazione di polisaccaride grezzo di P. cocos migliorano l'immunità in modelli animali basati sul test del contenuto di emolisi sierica, sull'effetto fagocitico dei macrofagi mononucleati e sul livello di trasformazione dei linfociti. I triterpenoidi lanostano sono stati considerati componenti principali nella frazione di acetato di etile secondo l'analisi HPLC [31]. Tuttavia, non è ancora chiaro se l'immunità innata e adattativa abbia effetti sull'attività delle cellule NK, sull'IFN, sulle cellule immunitarie o sulle citochine di P.cocos e sul chiarimento dei composti attivi. Questo studio ha studiato l'effetto sul sistema immunitario degli estratti di P. cocos, un prodotto brevettato per la consistenza del contenuto di triterpenoidi di lanostano, utilizzando modelli animali. I componenti attivi sono stati identificati per primi.

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2. Materiali e metodi
2.1.Materiali vegetali
Il selerozio essiccato di P. cocos (Schwein.) FAWolf è stato estratto utilizzando il 75 percento di etanolo per ottenere l'estratto di P. cocos (Lipucan). Questo estratto è prodotto da Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou Sinphar Group, Cina, e sviluppato da Sinphar R&D Center, Taiwan. L'estratto contiene quattro principali triterpenoidi lanostano (Figura 1, composti 1-4) analizzati mediante cromatografia liquida ultra-prestazioni (UPLC) [32]. Il contenuto dei quattro principali triterpenoidi di lanostano era del 6,2%. Una capsula commerciale (FL) che contiene 27,0 mg di estratto di P. cocos è stata utilizzata per studiare l'effetto sull'attività immunoregolatoria.

2.2. Isolamento e purificazione dei triterpenoidi lanostano da P. cocos
Il P.cocos essiccato (10 kg) è stato estratto tre volte mediante riflusso con etanolo al 75% per 3 ore [24]. L'estratto concentrato è stato cromatografato su gel di silice ({4}} mesh) utilizzando miscele sempre più polari di CH2Cl e MeOH(CH2Cl:MeOH,97:3; CH2Cl2:MeOH, 96:4;CH2Cl:MeOH,90:10, e 100 percento MeOH). Secondo la cromatografia su strato sottile (TLC), sono state raccolte quattro frazioni (Fr.1-Fr.4) per un'ulteriore separazione. Il Fr.1-Fr.3 è stato sottoposto a cromatografia liquida preparativa ad alte prestazioni (HPLC) (Waters Prep 150 LCsystem, Milford, MA, USA) su una colonna Waters XBridge RP-18 (250 mm× 19 mm, 5 um, Milford, MA, USA) utilizzando l'80 percento di metanolo come sistema di fase mobile. La portata era di 18 ml/min. Sono stati raccolti selettivamente quattro picchi di interesse principali. Le frazioni contenenti i composti mirati sono state ulteriormente condensate in secchezza e hanno prodotto acido tumulosico(1)(120,1 mg), acido polifonico C(2)(16,0 mg),3-acido epi-deidrotumulosico (3)(12,1 mg) , e acido deidrotumulosico(4)(6,8 mg), rispettivamente. Le loro strutture sono state chiarite mediante analisi della spettroscopia NMR (risonanza magnetica nucleare) e spettrometro di massa a ionizzazione elettrospray (ESI-MS) e confrontandole con i dati della letteratura [32].
2.3. Studio preliminare sugli animali da parte dei composti triterpenoidi lanostano (1-3) per lo studio di analisi dell'IFN-r
Per questo studio, i composti triterpenoidi lanostano purificati, inclusi acido tumulosico (1), acido polifonico C(2) e acido 3-epideidrotumulosico (3), sono stati preparati per lo studio preliminare utilizzando BALB/c (un ceppo murino di topi albini) topi maschi. Dopo 4 giorni di somministrazione orale dei composti {5}} e dell'acqua distillata sterile (gruppo di controllo) (1 ml/topo), i topi sono stati sacrificati il quinto giorno e sono state raccolte le cellule della milza. La milza fresca è stata trasferita su una piastra di coltura contenente 10 ml di mezzo di coltura del Roswell Park Memorial Institute (RPMI)-1640. La milza è stata quindi macinata su una maglia fine per rilasciare le cellule della milza. Le cellule della milza sospese nel mezzo sono state quindi trasferite in una provetta da centrifuga conica da 50 ml e centrifugate a 1300 rpm per 10 minuti. Il supernatante è stato scartato e il pellet è stato risospeso in 1 ml di tampone lisante globuli rossi freddi (RBC) contenente EDTA-NH4Cl. Le cellule sono state incubate a temperatura ambiente per 10 minuti e poi lavate tre volte con un mezzo di coltura mediante centrifugazione. La sospensione di cellule della milza è stata quindi coltivata in una 24-piastra a pozzetti a una densità di 1 × 10 cellule/mL in un mezzo contenente RPMl 1640 integrato con il 10% di siero bovino fetale (FBS), 2 mM di L-glutammina, antibiotici e 1 ug/mL di concanavalina A (ConA) a 37 gradi per 3 giorni. Sono stati raccolti i supernatanti delle cellule della milza di coltura. Le concentrazioni di IFN- sono state misurate utilizzando un kit di test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, MN, USA).

2.4. Modello Animale e Programma Sperimentale
I topi femmina BALB/c sono stati acquistati dal National Taiwan University Animal Center. Gli animali sono stati alloggiati in gabbie ventilate individualmente per l'assenza di agenti patogeni specifici a 22±2 gradi, con temperatura e umidità al 40-60 percento con un ciclo di luce/buio di 12 ore/12 ore e libero accesso a cibo e acqua. Dopo una settimana di acclimatazione, i topi sono stati raggruppati casualmente in base al peso corporeo e utilizzati per gli esperimenti. Quattro diverse dosi, 26 mg/kg (FL200), 52 mg/kg (FL400), 104 mg/kg (FL800), 156 mg/kg (FL1200), sono state sciolte rispettivamente in un distillato sterile acqua (0,4 ml) e somministrata per via orale per cinque giorni consecutivi alla settimana per 9 settimane. Il gruppo di controllo è stato alimentato con acqua distillata sterile (0,4 mL). I topi sono stati iniettati con l'antigene specifico dell'ovoalbumina (OVA) per via intraperitoneale alla terza, quinta e settima settimana. L'OVA è un allergene dell'albume d'uovo di gallina che si trova principalmente negli albumi. Di solito è usato per indurre allergie in modelli animali sperimentali. Le cellule della milza sono state raccolte per ulteriori studi. I topi sono stati sacrificati utilizzando l'eutanasia da anidride carbonica dopo 9 settimane di sperimentazione. Il numero di approvazione per questo studio da parte del comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali (IACUC) è A9647.
2.5. Raccolta di campioni di milza
È stata raccolta la milza, un organo allungato di colore rosso scuro nella parte superiore sinistra dell'addome dei topi. Dopo che il tessuto connettivo è stato accuratamente rimosso utilizzando piccole forbici e pinze, le milze sono state collocate in un mezzo di coltura cellulare (mezzo RPMI 1640 con siero bovino fetale al 10% (HyClone)). Dopo la pesatura, i campioni di milza sono stati macinati utilizzando uno spintore per siringa da 5 ml pulito e sterile. La sospensione delle cellule della milza è stata aspirata in una nuova provetta da centrifuga da 15 ml con un contagocce di plastica sterile a confezione singola da 3 ml. Le cellule sospese sono state raccolte dopo 5 minuti di precipitazione. Le cellule sospese sono state centrifugate a 1500 rpm per 7 minuti e il surnatante è stato scartato per ottenere i pallet cellulari. Quindi, è stato aggiunto 1 ml di tampone di lisi RBC per rimuovere i globuli rossi per 1 minuto. Nove ml di siero bovino fetale al 10 percento sono stati rapidamente aggiunti al mezzo di coltura, la fase di centrifugazione è stata ripetuta e il supernatante è stato scartato. Per evitare danni all'integrità delle cellule della milza a causa del tampone di lisi RBC, il campione è stato lavato tre volte con la soluzione tampone di Hank's Balanced Salt Solution (HBSS). Le cellule della milza sono state quindi sospese con un mezzo di coltura di siero bovino fetale al 10% per analisi ed esperimenti.
2.6. Risposta immunitaria non specifica
2.6.1.Analisi del marker della superficie delle cellule della milza
L'analisi delle cellule immunitarie è stata eseguita utilizzando anticorpi monoclonali fluorescenti che si legano specificamente a vari tipi di cellule immunitarie utilizzando un citometro a flusso fluorescente. La citometria a flusso (Epics XL-MCL Beckman Coulter, Brea, CA, USA) viene utilizzata per calcolare la proporzione di una specifica cellula immunitaria come i principali complessi di istocompatibilità di tipo I (MHC I), linfociti T CD4 più, linfociti T CD8 più, Cellule NK e macrofagi.
2.6.2. Analisi dell'attività delle cellule killer naturali
La linea cellulare di linfoma murino YAC-1 (una linea cellulare sensibile all'azione dell'attività delle cellule NK) è stata utilizzata come bersaglio delle cellule NK in questo esperimento. Quando le cellule della milza di topo femmina BALB/c sono state co-coltivate con cellule YAC-1 nella stessa piastra, le cellule natural killer uccideranno le cellule YAC-1. Dopo 3 ore di reazione di citotossicità, le cellule YAC-1 uccise sono state colorate con un colorante (Kit di citotossicità mediata da cellule LIVE/DEAD, Molecular Probes, L-7010). Pertanto la citometria a flusso è stata utilizzata per rilevare e analizzare l'intensità della fluorescenza utilizzando il software WinMDI 2.8 (Purdue University Cytometry Laboratories, West Lafayette, IN, USA). Il rapporto tra cellula effettrice (E) e cellula bersaglio (T) è 100:1 e 200:1 (la cellula effettrice è costituita da cellule della milza e la cellula bersaglio è costituita da cellule YAC-1).
2.6.3. Secrezione di citochine mediante analisi delle cellule della milza
Dopo aver stimolato le cellule della milza con ConA (concentrazione 2,5 ug/mL) per 48 h, il supernatante di coltura cellulare è stato raccolto e conservato a -20 gradi per l'analisi delle citochine utilizzando un kit ELISA di topo OptEIA IL-5 ( Pharmigen, 555236, Franklin Lake, NJ, USA) e un kit IFN-ELISA per mouse DouSet (R&D Systems, DY485, Minneapolis, MN, USA). Il tampone di rivestimento (pH:9,6) è stato preparato per contenere la quantità appropriata di anticorpi anti-citochine (L-5 e IFN-y) su una 96-piastra a pozzetti (piastra Nunc-Immuno, MaxiSorp, Thermo Scientifico, Roskilde, Danimarca). Dopo essere rimasti a 4°C per una notte, gli anticorpi non legati sono stati risciacquati con la soluzione salina tamponata con fosfato con tampone Tween20 (PBST) e sono stati quindi aggiunti 200 μL/pozzetto di tampone bloccante (1% di BSA in PBS). Dopo 2 ore a temperatura ambiente, il campione è stato risciacquato con tampone PBST e 100 μL/pozzetto di surnatante di coltura cellulare o standard di citochine ricombinante aggiunti al campione. Dopo 4 gradi durante la notte, il campione è stato risciacquato con tampone PBST. È stata quindi aggiunta la concentrazione appropriata di anticorpo secondario legato alla biotina (biotina) anti-citochina (100 ul/pozzetto). Dopo 2 ore a temperatura ambiente, il campione è stato risciacquato con tampone PBST. È stata quindi aggiunta l'avidina-perossidasi (100 μL/pozzetto) (Sigma, St. Louis, MO, USA). Dopo 1 ora a temperatura ambiente, è stato aggiunto il substrato tetrametilbenzidina (TMB) (R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) per 5 minuti di reazione cromatica e sono stati quindi aggiunti 50 μL di H2SO4 al 2,5 percento per fermare la reazione cromatica. L'assorbanza è stata misurata a 450 nm.

2.7. Risposta immunitaria specifica da topi indotti dall'ovoalbumina (OVA).
Topi femmina BALB/c sono stati iniettati per via intraperitoneale con OVA come antigene e CFA (Complete Freund's Ajuvant) come adiuvante. Le condizioni di coltura cellulare della milza erano le stesse di cui sopra. Le citochine (L-4) sono state analizzate mediante ELISA.
2.8.Analisi statistiche
I dati sono stati riportati come media (SD) e analizzati utilizzando ANOVA unidirezionale. I valori sono stati considerati statisticamente significativi a p<0.05. dunnett's="" test="" was="" used="" to="" identify="" the="" differences="" between="">0.05.>
3. Risultati
3.1. Isolamento e identificazione di quattro composti triterpenoidi lanostano 1-4 di P.cocos
Il p.Cistanche antietàCocos (10 kg) è stato estratto tre volte mediante riflusso con etanolo al 75% per 3 ore. L'estratto concentrato è stato cromatografato su gel di silice e colonna C18 per fornire quattro principali composti triterpenoidi lanostano: acido tumulosico (1), acido polifonico C (2), 3-acido epi-deidrotumulosico(3) e acido deidrotumulosico(4 ), rispettivamente (Figura 1). Le loro strutture sono state chiarite mediante spettroscopia NMR (Tabella S1) e analisi ESI-MS (Figure S2, S4, S6 e S8) e confronto con i dati della letteratura [32,33]. I cromatogrammi UPLC di 1-4 sono stati mostrati nelle figure S1, S3, S5 e S7.
3.2. Studio preliminare su topi maschi BALB/c con composti triterpenoidi lanostane 1-3
Le cellule della milza isolate dai topi trattati con composti triterpenoidi lanostano (1-3) sono state coltivate per cinque giorni in presenza di uno. È stata misurata la quantità di IFN-y secreta dai linfociti T della milza. Dopo che i topi sono stati alimentati con 2,5 mg/kg/giorno o una dose maggiore di composto 1,5 e 10 mg/kg/giorno di 2 e 20 mg/kg/giorno di 3, rispettivamente, l'IFN-y secreto da ConA - le cellule T spleniche stimolate sono state significativamente aumentate (Tabelle 1 e 2). Lo studio preliminare mostra che il lanostane 1-3 ha aumentato la secrezione di IFN-y da parte delle cellule della milza stimolate da ConA.
3.3.Valutazione della sicurezza da uno studio sugli animali dell'estratto di P. cocos
Le tabelle 3 e 4 indicano che l'estratto di P. cocos non ha influenzato il peso corporeo e il peso della milza.cistanche benefíciosLa tabella 5 mostra anche che le cellule immunitarie come cellule T totali, cellule B totali, MHC II (complesso maggiore di istocompatibilità di tipo II, cellule T CD4 più, cellule T CD8 più, cellule NK e macrofagi nel gruppo estratto di P. cocos avevano nessuna differenza significativa rispetto al gruppo di controllo Sulla base dei risultati di cui sopra, dovrebbe essere valutato che non dovrebbe esserci alcun rischio di immunotossicità durante l'esperimento di alimentazione dell'estratto di P. cocos.

3.4. Valutazione della risposta immunitaria non specifica
Le cellule killer della natura (cellule NK) svolgono un ruolo fondamentale nell'immunità non specifica. La tabella 6 mostra che il gruppo FL400 ha indotto significativamente un aumento dell'attività delle cellule NK rispetto al gruppo FL200. È una tendenza all'aumento dell'effetto dell'attività delle cellule NK dell'estratto di P.cocos. Le citochine sono sostanze chimiche tra cui interleuchine (IL) e interferone (IFN) che regolano la risposta immunitaria o la crescita cellulare 【34】. Abbiamo analizzato la concentrazione di IFN- (risposta immunitaria Th1) delle cellule della milza indotte da ConA e LPS e la concentrazione di IL-5 (risposta immunitaria Th2) delle cellule della milza indotte da ConA isolate da topi trattati con FL200, FL400, FL800, e FL1200 (tabelle 7 e 8). I gruppi FL800 e FL1200 hanno stimolato significativamente la produzione di IFN-y nelle cellule della milza di topo in presenza di ConA (Tabella 7). La tabella 7 mostra anche che la concentrazione di cellule della milza dei topi IL-5 isolata dai topi trattati con FL200, FL400, FL800 e FL1200 ha avuto un effetto significativamente ridotto in modo dose-dipendente. Inoltre, i gruppi FL400, FL800 e FL1200 hanno anche stimolato significativamente la produzione di IFN nelle cellule della milza di topo in presenza di LPS (Tabella 8).
4. Discussione
Il sistema immunitario umano è responsabile della lotta contro gli agenti patogeni estranei per proteggere la salute.puritani vitamina cUn'immunità insufficiente di solito rende il corpo suscettibile alle infezioni e quindi richiede un'immunità sufficiente, ma richiede anche meccanismi di regolamentazione rigorosi per evitare danni collaterali eccessivi. Il mantenimento dell'equilibrio immunitario è il compito più importante del sistema immunitario[35]. Molte prove hanno indicato che l'equilibrio immunitario è altamente correlato con la risposta delle cellule Th1/Th236,37]. Lo stress e l'invecchiamento possono far perdere l'equilibrio a Th1/Th2 e inclinarsi verso Th2, il che può causare infezioni e malattie allergiche [38-40]. Questa ricerca di un'immunità di equilibrio efficace è urgente. Inoltre, è gratificante che le conoscenze acquisite in decenni di ricerca scientifica accumulata sul sistema immunitario umano e sulla sua risposta alle malattie infettive aiutino a fornire informazioni sulla ricerca e lo sviluppo terapeutici e abbiano anche strategie preventive per la diffusione di focolai di virus [41] , A42]. Molti studi precedenti sullo studio farmacologico di P. cocos sono orientati verso la proteina P. cocos [43,44] oi polisaccaridi [45,46]. Esistono diversi studi sull'efficacia dei triterpenoidi lanostano da P. cocos come l'ipoglicemia [25], la funzione antitumorale [24] e la funzione sedativa [28].cos'è la cistancheStudi precedenti hanno dimostrato che la frazione di acetato di etile di P. cocos contiene il componente principale triterpenoidi e ha un'attività di potenziamento immunitario 31 Tuttavia, non sono state pubblicate ulteriori ricerche approfondite di follow-up. Il nostro studio ha valutato la funzione di immunità di P. cocos in un modello di topo consolidato, incluso lo studio preliminare di screening del composto triterpenoide di lanostano purificato. Abbiamo dimostrato in questo studio che l'estratto di P.cocos (Lipucan) contenente il 6,2 percento di quattro triterpenoidi di lanostano svolge ruoli multi-benefici nell'attività immunoregolatoria.
Un'indagine precedente ha riportato che le cellule CD4 umane più T-helper (Th) inclusi i sottoinsiemi Th1 e Th2 sono definite dalle citochine che secernono [36]. Le cellule Th1 secernono principalmente IFN-; Le cellule Th2 producono IL-4, IL{9}}, inducono la produzione di anticorpi e portano a risposte allergiche aumentando la produzione di IgE da parte dei linfociti B e promuovendo la crescita dei mastociti e la differenziazione degli eosinofili. È noto che le cellule NK e l'IFN- svolgono ruoli importanti nella difesa immunitaria contro le infezioni virali. Il sistema immunitario innato è molto importante per difendersi dai virus che hanno inizialmente invaso l'organismo e attivare la successiva immunità adattativa. Le cellule NK sono classificate come immunità non specifica (innata) responsabili dell'uccisione delle cellule infettate da virus【14】. IFN- inibisce il ciclo di vita del virus e previene la replicazione del virus. L'IFN- regola anche la risposta immunitaria attivando l'immunità cellulo-mediata non specifica e stimolando l'immunità specifica [17]. Sulla base dello studio preliminare sugli animali, i principali composti triterpenoidi di lanostano dell'estratto di P. cocos, acido tumulosico (1), acido polifonico C (2) e acido 3-epi-deidrotumulosico (3), stimolano significativamente la secrezione di IFN dalle cellule della milza. La conferma del componente dell'estratto di cocco di Poria attivo in questo studio preliminare sarà di grande importanza per il controllo di qualità del prodotto e per ulteriori studi sulla biodisponibilità e sui meccanismi. Inoltre, abbiamo dimostrato in questo studio che l'estratto di P. cocos stimola significativamente l'attività delle cellule NK e la secrezione di IFN senza proprietà immunotossiche. Questi risultati hanno dimostrato i significativi effetti stimolatori dell'estratto di P. cocos e dei principali triterpenoidi lanostano 1-3 sulla risposta immunitaria.
Inoltre, i nostri risultati hanno indicato che l'estratto di P. cocos sopprimeva la risposta immunitaria Th2 mediante una significativa inibizione di IL-5 (Tabella 7) nel modello di risposta immunitaria non specifica e una significativa inibizione di IL-4 (Tabella 9) nel modello di risposta immunitaria specifica indotta da OVA. IL-4 e IL-5 porterebbero a una risposta allergica.sistanoLe allergie, dette anche malattie allergiche, sono causate da un sistema immunitario ipersensibile alle sostanze presenti nell'ambiente, come l'asma allergico. La risposta immunitaria del paziente tende a Th2. Se Th1/Th2 nel corpo può essere bilanciato, dovrebbe migliorare i sintomi dell'allergia. Questo studio ha dimostrato che l'estratto di P. cocos può regolare la risposta immunitaria Th1/Th2, può ridurre l'insorgenza di malattie allergiche e può essere sviluppato in un potenziale candidato per la malattia antiallergica.
5. Conclusioni
Questo studio è il primo a dimostrare la regolazione dell'immunità non specifica e specifica dell'azione dell'estratto di P. cocos contenente triterpenoidi di lanostano nei topi. Queste risposte immunitarie includono l'attivazione delle cellule NK, l'aumento della secrezione di IFN e la diminuzione di IL-4 e IL-5. I nostri risultati supportano che l'estratto di P. cocos senza immunotossicità aggiunto alla dieta o utilizzato da solo svolgerà ruoli immunoregolatori benefici nel miglioramento dell'immunodeficienza e nel miglioramento della capacità di prevenire le infezioni e le risposte allergiche. Questa è la prima conferma che i triterpenoidi di lanostano sono ingredienti efficaci e possono essere utilizzati come ingredienti di controllo della qualità per mantenere la consistenza dell'efficacia dell'estratto di P. cocos.
Questo articolo è tratto da Life 2021, 11, 111. https://doi.org/10.3390/life11020111 https://www.mdpi.com/journal/life
