Uno studio sulla tossicità subcronica di 13-settimana sull'2-(l-mentossi)etanolo nei ratti F344 Ⅲ

Discussione

Ad oggi, 24 agenti aromatizzanti, tra cui l'2-(l-mentossi)etanolo, sono stati valutati dal JECFA come sostanze strutturalmente correlate al mentolo e sono tutti elencati come "nessun problema di sicurezza" agli attuali livelli di assunzione stimati1, 11. Il 2-(lMentossi)etanolo è classificato in un sottogruppo di alcoli o eteri aliciclici ed è considerato principalmente coniugato con l'acido glucuronico, seguito dall'escrezione urinaria1. Sebbene i valori LD50 orali di queste sostanze nei roditori siano relativamente elevati, i dati provenienti da studi sulla tossicità a dosi ripetute rimangono limitati. Uno studio di tossicità a dosi ripetute di 13-settimana ha rivelato che il mentilpirrolidone carbossilato (n. CAS 68127-22-0), un composto strutturalmente correlato al mentolo, può essere associato ad un aumento del peso relativo del fegato e dei reni negli uomini e nelle donne Ratti Wistar.

Integratore Cistanche Integratore di supporto alla funzione renale PhGs75% Ech 30% Act 12%

L'accumulo di 2u-globulina nei tubuli prossimali dei ratti maschi è stato osservato anche alla dose di 1.111 mg/kg di peso corporeo/giorno e il NOAEL è stato determinato come 109 mg/kg di peso corporeo/giorno1.Nel presente studio sulla tossicità subcronica di 13-settimana sull'2-(l-mentossi)etanolo, non sono stati osservati cambiamenti tossicologici nelle condizioni generali, nel peso corporeo e nell'assunzione di cibo. Dopo la valutazione ematologica, abbiamo osservato una diminuzione di HGB (96,6% rispetto ai valori medi di controllo), HCT (96,3%), MCV (98,4%) e MCH (98,2%) e un aumento di PLT (111%) nei maschi gruppo da 250 mg/kg, considerati effetti tossicologici del trattamento con 2-(l-mentossi)etanolo. Sia il peso assoluto del fegato (115% in entrambi i sessi) che relativo (119% nei maschi e 111% nelle femmine) era significativamente aumentato in entrambi i sessi nei gruppi da 250 mg/kg. Sebbene non siano stati riscontrati cambiamenti istopatologici nel fegato, sono stati riscontrati aumenti dei livelli sierici di T-Chol (110% nei maschi e 121% nelle femmine) e TP (105% nei maschi) e una riduzione dei TG (60,1% nelle femmine) nei 250 pazienti. I gruppi mg/kg indicano cambiamenti tossici associati al metabolismo dei lipidi e alla sintesi proteica nel fegato. Sono stati rilevati anche una riduzione di HGB e MCH e un aumento di PLT, T-Chol e TP nei maschi, una diminuzione dei TG e un aumento del peso assoluto e relativo del fegato in entrambi i sessi, con significatività statistica nello studio preliminare del 28-giorno (dati non mostrati ), confermando che questi parametri ematologici e biochimici sierici alterati, nonché il peso del fegato, non erano effetti accidentali ma correlati alla sostanza in esame. Al contrario, l’aumento significativo del peso relativo del fegato rilevato nel gruppo maschile 60 mg/kg nel presente studio non è stato accompagnato da un aumento del peso assoluto o da cambiamenti nei parametri biochimici correlati, suggerendo che questo aumento fosse un cambiamento adattativo.

Tabella 2. Dati biochimici del siero per ratti F344 trattati con 2-(l-mentossi)etanolo per 13 settimane

Si è ritenuto che un aumento significativo del peso assoluto (120%) e relativo (118%) delle ghiandole surrenali nel gruppo maschile trattato con 250 mg/kg fosse associato alla sostanza chimica in esame. Inoltre, l'aumento del peso assoluto e relativo delle ghiandole surrenali in entrambi i sessi ha mostrato una chiara dipendenza dalla dose nello studio preliminare del 28-giorno (dati non mostrati), indicando l'associazione con il trattamento con la sostanza chimica in esame. Sebbene l’ipertrofia surrenale possa derivare dallo stress, non sono stati riscontrati risultati suggestivi di stress, come un ridotto aumento di peso corporeo o atrofia del timo e di altri organi linfoidi, sia negli studi attuali che in quelli preliminari. Poiché in caso di inibizione degli enzimi correlati alla steroidogenesi12 potrebbero non verificarsi alterazioni istopatologiche nella ghiandola surrenale anche con una ridotta produzione di glucocorticoidi, non si può escludere la possibilità che l'aumento di peso della ghiandola surrenale sia un risultato tossico. Al contrario, l’aumento del peso relativo della milza e dei testicoli nel gruppo maschile trattato con 250 mg/kg, non osservato nello studio preliminare, è stato considerato tossicologicamente insignificante a causa dell’assenza di lesioni istopatologiche o dell’aumento significativo del peso assoluto. Allo stesso modo, la biochimica del siero ha rivelato una diminuzione di A/G e un aumento di Ca in entrambi i sessi, che non è stato considerato avere alcun significato tossicologico, considerando che non sono state rilevate anomalie nei parametri correlati. Inoltre, la diminuzione dei livelli di Bil e ALP in entrambi i sessi e la diminuzione di AST e ALT nelle femmine erano in contrasto con gli effetti tossici attesi e sono stati considerati non significativi.

Tabella 3. Dati sul peso degli organi per ratti F344 trattati con 2-(l-mentossi)etanolo per 13 settimane

È stata osservata con significatività statistica una nefropatia cronica caratterizzata da tubuli basofili, cast ialino e infiammazione interstiziale focale nei maschi di tutti i gruppi trattati. Inoltre, nei gruppi maschili trattati con 60 e 250 mg/kg sono stati rilevati un aumento della Cre sierica e del peso assoluto e relativo dei reni; questi cambiamenti non sono stati osservati nei gruppi di trattamento femminili. In questi casi, il grado di accumulo dei granuli eosinofili nelle cellule epiteliali del tubulo prossimale risultava aumentato in modo apparentemente dose-dipendente. Questi granuli sono stati confermati come 2u-globulina mediante immunoistochimica, indicando la presenza di nefropatia da 2u-globulina. Le 2u-globuline legate a determinate sostanze chimiche, come il d-limonene, si accumulano nei lisosomi e si osservano nei tubuli prossimali come granuli eosinofili o ialini9. Questo accumulo può danneggiare le cellule epiteliali, portando a nefropatia cronica progressiva e conseguente formazione di tumori9. Pertanto, sebbene non sia stato identificato il NOAEL per l'2-(l-mentossi)etanolo associato alla nefropatia da 2u-globulina nei reni dei ratti maschi, questo tipo di nefropatia sarebbe specifico per i ratti maschi e quindi non rilevante per la valutazione del rischio umano13. Un aumento del rischio di insufficienza renale mediato da meccanismi legati all'accumulo di 2u-globulina è altamente improbabile, poiché questa proteina è assente nell'uomo14. Pertanto, si è ritenuto ragionevole escludere dalla determinazione del NOAEL i cambiamenti associati alla nefropatia cronica osservati nei maschi.

In conclusione, il presente studio sulla tossicità subcronica della 13-settimana ha dimostrato che il trattamento con 250 mg/kg di peso corporeo/giorno di 2-(l-mentossi)etanolo ha causato cambiamenti tossici nell'ematologia, nella biochimica sierica e nel peso degli organi nei maschi e nei ratti F344 femmine. Sulla base dei risultati osservati, il NOAEL dell'2-(l-mentossi)etanolo è stato valutato come 60 mg/kg di peso corporeo/giorno per entrambi i sessi.

Divulgazione del potenziale

Conflitti di interessi: Gli autori dichiarano che non esiste alcun conflitto di interessi.

Ringraziamenti: questo studio è stato sostenuto dal Ministero della sanità, del lavoro e del welfare del Giappone. Gli autori ringraziano Ayako Saikawa e Yoshimi Komatsu per l'assistenza tecnica esperta nell'elaborazione dei materiali istologici.

Riferimenti

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