Progressi in dermatologia utilizzando l'aptamer del DNA Innovazione "Aptamin C": prevenzione dello stress ossidativo e massimizzazione dell'effetto della vitamina C attraverso l'antiossidazione

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Sooho Choi PhD1|Jeongmin Han Ph.D. Candidato2|Ji Hyun Kim Candidato SM1|A-Ru Kim Ph.D. Candidato3|Sang-Heon Kim Ph.D. Candidato3|Weontae Lee Ph.D., professore2|Moon-Young Yoon Ph.D., professore3|Gyuyoup Kim PhD1|Yoon‐Seong Kim Ph.D., professore1

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Sfondo:Vitamina C(noto anche come acido L-ascorbico) svolge un ruolo fondamentale nella riduzione delle specie reattive dell'ossigeno (ROS) e nella rigenerazione cellulare proteggendo le cellule dallo stress ossidativo. Sebbene la vitamina C sia ampiamente utilizzata nei mercati cosmetici e terapeutici, ci sono prove considerevoli che la vitamina C subisca facilmenteossidazionedall'aria, pH, temperatura e luce UV al momento della conservazione. Questa carenza di vitamina C diminuisce la sua potenza come antiossidante e riduce la durata di conservazione dei prodotti contenenti vitamina C come ingrediente. Per superare la carenza di vitamina C, abbiamo sviluppato Aptamin C, un innovativo aptamero del DNA che massimizza l'efficacia antiossidante della vitamina C legandosi alla forma ridotta di vitamina C e ritardandone laossidazione.

Metodi:Il legame dell'Aptamin C con la vitamina C è stato determinato utilizzando l'analisi ITC. L'esperimento ITC è stato eseguito con 0,2 mmol/Lvitamina Cche è stato iniettato 25 volte in aliquote da 2 µL nella cella campione da 1,8 mL contenente l'aptamin C a una concentrazione di 0.02 mmol/L. I dati sono stati adattati a un'isoterma di legame a un sito utilizzando il programma di origine per ITC v.5.0.

Risultati:Per studiare l'effetto di Aptamin C evitamina Ccomplesso nella pelle umana, sono stati eseguiti test sia in vitro che clinici. Abbiamo osservato che il complesso di Aptamin C e vitamina C era significativamente efficace nel miglioramento delle rughe, nell'effetto sbiancante e nell'aumento dell'idratazione. Nel test clinico, i soggetti trattati con il complesso hanno mostrato un notevole miglioramento dell'irritazione e del prurito della pelle. Nessuna reazione avversa è stata presentata dal complesso Aptamin C nel test.

Conclusione:Presi insieme, questi risultati hanno mostrato che l'Aptamin C, un composto innovativo e innovativo, dovrebbe essere potenzialmente servito come ingrediente cosmeceutico chiave per una serie di malattie della pelle.

PAROLE CHIAVEantiossidante, Aptamin C (aptamer legante la vitamina C),ossidazione, lo stress ossidativo,vitamina C(Acido L-ascorbico)

cistancepossiedono una spiccata capacità antiossidante

1|INTRODUZIONE

Le specie reattive dell'ossigeno (ROS) sono specie chimiche chimicamente reattive contenenti ossigeno, che svolgono un ruolo importante nella segnalazione cellulare e nell'omeostasi.1-3 Questi includono non solo effetti positivi come l'induzione dei geni di difesa dell'ospite e la mobilizzazione dei sistemi di trasporto ionico, ma anche ruoli nell'apoptosi (morte cellulare programmata).4,5 I livelli di ROS possono essere aumentati dallo stress ambientale, portando a danni alle strutture cellulari.3 Questo fenomeno è chiamato "stress ossidativo". Lo stress ossidativo è una delle principali cause di varie malattie, comprese le malattie neurodegenerative, il morbo di Lou Gehrig, l'autismo, la sclerosi multipla e le malattie della pelle.6-15 Inoltre, lo stress ossidativo ha un'influenza diretta sul processo di invecchiamento della pelle16; proteine, lipidi e DNA reagiscono in modo sensibile allo stress ossidativo causato dai ROS.17 Gli antiossidanti sono altamente efficaci nella protezione della pelle poiché reagiscono direttamente ai ROS impedendo loro di raggiungere le molecole biologiche bersaglio.18,19 Antiossidanti comevitamina C, vitamina E, coenzima Q10 e composti polifenolici proteggono la pelle dai danni causati dai ROS. Gli antiossidanti aiutano quindi a prevenire e curare varie malattie della pelle e rallentano il processo di invecchiamento della pelle.20 L'uso della vitamina C nelle industrie è principalmente dovuto alle sue proprietà antiossidanti, che sono il risultato divitamina Ccapacità di neutralizzare i radicali liberi dell'ossigeno, attraverso un processo chiamato radical scavenging.21,22 Tuttavia, a causa di queste stesse proprietà antiossidanti, la molecola stessa è intrinsecamente suscettibile alla degradazione tramiteossidazione. Per risolvere questo problema, abbiamo sviluppato Aptamin C, un aptamero del DNA che si lega in modo specifico alla vitamina C e inibisce l'ossidazione della vitamina C. Gli aptameri sono oligonucleotidi a base di DNA o RNA a filamento singolo in grado di legare selettivamente un'ampia gamma di molecole. Gli aptameri sono comunemente identificati da un metodo di selezione in vitro denominato evoluzione sistematica dei ligandi mediante arricchimento esponenziale o "SELEX". Abbiamo identificato che l'Aptamin C inibisce ilossidazionedi vitamina C da diversi agenti ossidanti e mantiene l'attività antiossidante durante la conservazione a lungo termine. Per confermare la valutazione della sicurezza dell'Aptamin C, sono stati condotti esperimenti a livello cellulare e applicati direttamente all'uomo e non è stata osservata alcuna tossicità. Malattie della pelle come dermatite atopica, psoriasi e acne sono correlate alla risposta immunitaria e ai ROS.23Vitamina Cha la capacità di rimuovere i ROS e ha un effetto antinfiammatorio.24 L'aptamin C previeneossidazionedi vitamina C e massimizza la sua efficacia attraverso il lento rilascio. Pertanto, ci aspettiamo che il complesso Aptamin C-vitamina C mostri l'effetto sinergico.

2|MATERIALI E METODI

2.1|Screening dell'aptamer contro la vitamina C con ridotto ossido di grafene

Questo metodo è stato effettuato modificando il metodo della ricerca precedente.25 I candidati ssDNA che possono legarsi specificamente avitamina Csono stati sviluppati da una libreria ssDNA casuale composta da circa 1X1018 diverse sequenze. Per la libreria ssDNA, abbiamo utilizzato una sequenza personalizzata la cui dimensione è 60 mer e contiene 30 sequenze nucleotidiche generate casualmente e un sito di primer per l'amplificazione (5'‐ATGCGGATCCCGCGC‐(N)30‐GCGCGAAGCTTGCGC‐3′). Abbiamo eseguito un totale di cinque round modificando la condizione sperimentale per selezionare una sequenza più specifica. Il volume totale per la reazione era di 200 μL. Circa 20 μL di 10 × buffer di legame (10 × PBS aggiunti 10 mmol/L MgCl2), 80 μL di rGO (5 mg/mL, diluito in acqua) e 200 picomoli di libreria ssDNA (20 μL di 100 μmol/L stock ) sono stati aggiunti e depositati dH2O a 200 μL. La reazione è proseguita per 30 minuti per legare la libreria ssDNA su rGO, quindi la miscela è stata centrifugata a 20 000 g per 20 minuti per eliminare il surnatante. Il pellet rGO è stato lavato 1 volta con 200 μL di buffer di legame che è la stessa concentrazione della condizione di legame target di ogni round. Per eluire i candidati, 200 nanomoli divitamina Cdiluito in 200 μL di tampone legante sono stati aggiunti al pellet di rGO e la fase di eluizione è stata eseguita per 1 ora. L'ssDNA eluito è stato diviso mediante centrifugazione, fatto a 20 000 g per 20 minuti e amplificato. Abbiamo fatto la precipitazione di EtOH per eliminare le impurità ad eccezione dell'ssDNA prima dell'amplificazione. Abbiamo fatto la PCR asimmetrica per ottenere ssDNA amplificato. Il rapporto tra forwarding primer e reverse primer della PCR asimmetrica era 10:1. Abbiamo eseguito l'elettroforesi su gel di agarosio al 2,5% per confermare il prodotto PCR con pochi microlitri di esso. La PCR asimmetrica non può produrre solo ssDNA. Quindi, abbiamo fatto il metodo crush and soak per isolare i candidati ssDNA. Per il metodo, abbiamo eseguito l'elettroforesi su un gel nativo di poliacrilammide al 12% e colorato il gel con bromuro di etidio (EtBr). Per separare DNA a doppio filamento (dsDNA) e ssDNA, la parte di gel colorata con ssDNA è stata tagliata, polverizzata ed estratta ssDNA con tampone crush and soak (500 mmol/L NH4OAc, 0,1% SDS, 0,1 mmol/L EDTA) durante la notte. Il gel polverizzato è stato separato per centrifugazione. Il supernatante che contiene ssDNA viene concentrato e purificato mediante precipitazione di EtOH. L'ssDNA essiccato è stato raccolto con dH2O sterilizzato e questo è stato utilizzato per il round successivo come libreria.

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2.2|Esperimento di calorimetria isotermica di titolazione (ITC).

L'esperimento di calorimetria di titolazione isotermica è stato eseguito utilizzando un sistema VP-ITC (MicroCal Inc Northampton) a 25 gradi in una soluzione salina tampone fosfato composta da 1 mmol/L di cloruro di magnesio (pH 7,4). Prima di ogni esperimento di titolazione, Aptamin C 2 mL evitamina C600 µL di campioni sono stati degasati per 30 minuti sotto vuoto, senza agitazione, a una temperatura di alcuni gradi inferiore a quella dell'esperimento. Abbiamo preparato 0,2 mmol/L di vitamina C che è stata iniettata 25 volte in aliquote da 2 µL nella cella campione da 1,8 mL contenente l'Aptamin C ad una concentrazione di 0,02 mmol/L. I dati sono stati adattati a un'isoterma di legame a un sito utilizzando il programma di origine per ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Saggi in micropiastra basati sulla fluorescenza per l'ossidazione della vitamina C

Ossidazionedivitamina Cè stato misurato rilevando il prodotto ossidato deidroascorbato (DHA) utilizzando una versione modificata del metodo descritto da Vislisel et al.7 In questo metodo, il DHA viene rilevato mediante reazione con o-fenilendiammina (OPDA) per formare il prodotto di condensazione fluorescente 3-( diidrossietil)furo[3,4-b]chinoxalina-1-one. Il test è stato eseguito come segue in piastre nere da 384 pozzetti (Greiner Bio-One). Gli aptameri sono stati prima disciolti in soluzione salina tamponata con fosfato, pH 7,2, contenente 1 mM MgCl2, a una concentrazione di 200 µmol/L, quindi piegati riscaldando a 95 gradi e lasciati raffreddare lentamente a temperatura ambiente per 15 minuti. Gli aptameri piegati sono stati quindi diluiti 1:1 (v:v) in una soluzione appena preparata di 5 mmol/Lvitamina Cin tampone di dosaggio [50 mmol/L di acetato di sodio, 1% (p/v) di BSA, 0,05% (v/v) di Tween 20, 1 mM MgCl2 (Sigma, tutti i componenti) regolato a pH 5,5] e la miscela è stata incubata per 30 minuti a temperatura ambiente, per consentire agli aptameri di legarsi prima dell'aggiunta di ossidante. Gli ossidanti sono stati quindi aggiunti alle soluzioni di vitamina C/aptamer a concentrazioni di (EM) H2O2 (Sigma). Gli ossidanti sono stati pre-diluiti alle loro concentrazioni di lavoro nel tampone del test. I campioni sono stati quindi incubati a temperatura ambiente per 10 minuti prima dell'aggiunta di OPDA (Sigma) ad una concentrazione di 5,5 mmol/L nel tampone del test. Immediatamente dopo l'aggiunta di OPDA, la fluorescenza dei campioni a 425 nm è stata determinata utilizzando un lettore di piastre SpectraMax® i3X (dispositivi molecolari) con eccitazione a 345 nm, in un arco temporale di 45 minuti con misurazioni effettuate ogni 60 secondi. Tutti i campioni e i recipienti contenenti reagenti sono stati avvolti in un foglio per proteggerli dalla luce durante tutte le incubazioni eseguite per i saggi di fluorescenza.

2.4|Misurazione della riduzione della vitamina C mediante DCPIP (2,6-diclorofenolindofenolo)

Per determinare la riduzione divitamina C, abbiamo condotto gli esperimenti utilizzando la reazione DCPIP. La vitamina C reagisce con DCPIP, cambiando il colore da blu a incolore. La vitamina C preparata è stata trattata con Aptamin CTM al 5% e la vitamina C non trattata è stata incubata a temperatura ambiente per 8 settimane. Il campione è stato misurato dopo 2, 4 e 8 settimane. Circa 2 ml di DCPIP sono stati aggiunti al matraccio conico usando una pipetta e la prima vitamina C non trattata è stata aggiunta fino a quando la soluzione è diventata incolore. La quantità divitamina Caggiunto è stato misurato e ripetuto con altri campioni. Il grado di riduzione di ciascun campione è stato calcolato sulla base di questi dati.

2.5|Studio in vitro dell'effetto antirughe nei fibroblasti dermici umani

Per valutare la vitalità cellulare nei fibroblasti dermici umani, le cellule sono state trattate con diverse concentrazioni finali di Aptamin C convitamina C(Aptamina C ug più vitamina C ug/mL) {{0}}.01 più 0,5 ug/mL, 0,1 più 5 ug/mL, 0,5 più 25 ug /mL, 1 più 50 ug/mL e 2 più 100 ug/mL. E poi, le cellule sono state trattate a concentrazioni di Aptamin C con vitamina C per rilevare l'attività di collagene intracellulare, collagenasi intracellulare (MMP-1) ed elastasi.

I fibroblasti cutanei umani (HDF) sono stati selezionati sulla base delle "Linee guida per la valutazione dell'efficacia dei cosmetici funzionali (ΙI)" di MFDS. Gli HDF sono stati coltivati ​​in DMEM/F12 3:1 miscela ad alto contenuto di glucosio integrata con il 10% di FBS e l'1% di antibiotico-antimicotico in un'atmosfera umidificata al 5% di CO2 a 37˚C.

Le HDF (5 × 104 cellule/pozzetto) sono state seminate in piastre da 24 pozzetti e incubate per 24 ore e sono state trattate con varie concentrazioni di Aptamin C convitamina Ce incubato per 24 ore. Dopo 24 ore, il surnatante è stato raccolto e la quantità di procollagene liberata nel mezzo è stata misurata a 450 nm utilizzando il kit ELISA Procollagen Type IC-Peptide (PIP). Il grado di produzione di collagene è stato calibrato in base al contenuto proteico totale e confrontato con il TGF-1 come controllo positivo. I mezzi senza materiali di prova sono stati usati come controllo del solvente.

Le HDF (5 × 104 cellule/pozzetto) sono state seminate in piastre da 24 pozzetti e incubate per 24 ore e sono state trattate con varie concentrazioni di Aptamin C convitamina Ce incubato per 48 ore. Dopo 48 ore, l'attività della collagenasi è stata misurata a 450 nm utilizzando il kit MMP-1 Human ELISA. L'attività di MMP-1 è stata valutata in base al contenuto proteico totale e confrontata con il TGF-1 come controllo positivo. I mezzi senza materiali di prova sono stati usati come controllo del solvente.

Tutti i dati sono stati espressi come media ± deviazione standard e provenivano da 3 esperimenti indipendenti. L'analisi statistica è stata condotta da campioni indipendenti t-test utilizzando il programma software SPSS® (IBM) al livello di significatività P <>

2.6|Misurazione delle rughe cutanee mediante sistema di analisi di immagini 3D

Ventidue soggetti di sesso femminile (età media: 50,05 ± 2,94 anni) hanno partecipato a questo studio. La ruga della pelle delle zampe di gallina è stata valutata da un sistema di analisi di immagini 3D al basale, a 4 e 8 settimane. L'idratazione cutanea è stata valutata con il metodo della capacità e il TEWL con il metodo di diffusione dell'acqua sulla superficie della pelle e l'elasticità della pelle con il metodo di aspirazione sono state valutate al basale, 2, 4 e 8 settimane dopo il trattamento. Inoltre, gli auto-questionari sull'efficacia sono stati compilati dai soggetti a 2 e 4 e 8 settimane e quello sull'usabilità è stato compilato dai soggetti a 8 settimane dopo il trattamento. Tutti i dati ottenuti sono stati analizzati statisticamente dal software SPSS®. I parametri delle rughe delle zampe di gallina sono stati valutati utilizzando PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). Questo sistema ha consentito l'analisi quantitativa della rugosità, della profondità, dell'area e del volume di sporgenza della ruga cutanea. L'immagine è stata analizzata nella stessa area in termini di parametri delle rughe della pelle (1, Profondità media delle rughe; 2, Profondità media della ruga più grande; 3, Profondità massima della ruga più grande; 4, Area totale delle rughe; 5, Volume totale delle rughe; 6 , Rughe totali del fattore di forma; 7, Lunghezza totale delle rughe; 8, Ra; 9, Ry; e 10, Rz) al basale, 4 e 8 settimane dopo il trattamento con Primos 5.8 E ver. Software.

3|RISULTATI

3.1|È stato necessario un approccio rigoroso alla preparazione del buffer per eseguire con successo rGO-SELEX con un target instabile

La libreria ssDNA, che era legata a rGO tramite interazioni di stacking π‐π tra gli anelli aromatici della superficie del grafene e le basi del DNA 26,27 e ssDNA non legato su rGO, è stata separata e rimossa mediante centrifugazione. ssDNA che è stato adsorbito sulla superficie rGO è stato eluito attraverso il trattamento con il composto target. Secondo i rapporti della letteratura, la conformazione dell'aptamero cambia dopo il legame con il bersaglio e indebolendo le interazioni di impilamento π‐π con rGO.28-31 Questo processo è stato ripetuto per cinque round. Ogni round successivo procedeva con condizioni tampone più dure e tempi di eluizione più brevi. Questa prestazione ci ha permesso di mantenere ssDNA con una migliore specificità per i composti target.

I dati NGS della libreria arricchita prodotta dal processo rGO-SELEX hanno prodotto 404071 sequenze. Abbiamo selezionato 119 sequenze da questi dati, le abbiamo ordinate in 11 gruppi in base alla somiglianza della struttura e abbiamo selezionato sequenze rappresentative per i candidati aptameri (Figura 1A).

3.2|Selezione dell'aptamina C

Le strutture secondarie dei candidati di Aptamin C sono state previste utilizzando il software libero M-Fold.32,33 I candidati sono stati raggruppati in base alla loro posizione, lunghezza, forma e numero di stelo e anello della struttura a potenziale più alto (Figura 1B). DHA, ossido divitamina C, viene rilevato dalla sua reazione con o-fenilendiammina (OPDA) che svolge il ruolo di indicatore.34 Se l'aptamero si lega e ne impedisceossidazione, alla vitamina C e ne previene l'ossidazione, il segnale di fluorescenza da 3‐(diidrossietil)‐furo‐[3,4‐b]chinoxalina‐1‐one, il prodotto di condensazione della vitamina C e dell'OPDA, sarà inferiore a quello di controllo no-aptamer. Un diagramma di ogni aptamero candidato mescolato con vitamina C e ossidante, con i controlli positivi,vitamina Cpiù sequenze ossidanti e scramble mescolate con vitamina C e ossidante (Figura 1C). Cinque aptameri, Aptamin Cb, Cc, Cf, Cg e Ck, hanno dimostrato di avere effetti antiossidanti.

3.3|Inibizione dell'ossidazione della vitamina C da parte dell'Aptamin C

L'aptamin C ha un'elevata affinità di legame pervitamina C. Il legame dell'aptamin C con la vitamina C è stato determinato utilizzando l'analisi ITC. Dall'isoterma di legame si possono ottenere l'entalpia (ΔH), l'entropia (ΔS) e la stechiometria (n) della reazione di legame. Il legame esotermico dell'aptamin Cb è stato rilevato dalla misurazione dell'ITC e l'entalpia (ΔH) è stata calcolata come 302,5 ± 3,788, l'entropia (ΔS) è stata calcolata come 18,9, la stechiometria(n) è stata calcolata come 56,7 ± {{21 }}.426 e le costanti di dissociazione (Kd) sono state calcolate come 2,13 uM per la vitamina C. Il legame esotermico dell'aptamin Cf è stato rilevato dalla misurazione ITC e l'entalpia (ΔH) è stata calcolata come 279,2 ± 2,992, è stata calcolata l'entropia (ΔS) come 18,4, la stechiometria(n) è stata calcolata come 167 ± 1,15 e le costanti di dissociazione (Kd) sono state calcolate come 0.89uM per la vitamina C. Il legame esotermico dell'aptamin Ck è stato rilevato dalla misurazione ITC e l'entalpia (ΔH ) è stato calcolato come 250.4 ± 3,742, l'entropia (ΔS) è stata calcolata come 19,8, la stechiometria(n) è stata calcolata come 82,2 ± 0,732 e le costanti di dissociazione (Kd) sono state calcolate come 0,90 µmol/L per vitamina C (Figura 2A). Le misurazioni ITC rivelano che il cambiamento nell'entropia in seguito all'associazione con l'Aptamina C è una delle principali forze trainanti pervitamina C. Impedireossidazionedi vitamina C allo stato liquido, tutte le soluzioni sono state preparate con acqua deionizzata trattata con azoto. La fluorescenza è stata espressa e quantitativamente analizzata quando l'OPDA (o-fenilendiammina) si è legato al DHA generato daossidazionedi vitamina C. Il grado di ossidazione della vitamina C in base alla concentrazione di Aptamin C (125, 250, 500 e 1000 nmol/L) è stato confrontato e confermato dal test OPDA. I risultati hanno dimostrato che ilvitamina Cla conversione in acido deidroascorbico era più lenta quando la concentrazione di Aptamin C era più alta. (Figura 2B). Questi dati dimostrano che l'Aptamin C è un inibitore dose-dipendente dell'ossidazione della vitamina C.

Abbiamo condotto esperimenti per determinare se l'Aptamin C potesse prevenire ilossidazionedi vitamina C per un lungo periodo di tempo. Aptamina C co-trattatavitamina C, e la vitamina C non trattata è stata esposta alla luce e lasciata riposare a temperatura ambiente per 8 settimane. Di conseguenza, quando la vitamina C non trattata è stata lasciata sola, il grado di riduzione è stato ridotto a meno della metà in 2 settimane e quasi tutte sono state ossidate dopo 4 settimane. In presenza di Aptamin C, la vitamina C è stata ridotta a circa la metà di 8 settimane (Figura 2C). Ciò suggerisce che l'Aptamin C previene l'ossidazione della vitamina C per un lungo periodo di tempo.

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3.4|Analisi dell'attività della collagenasi intracellulare (MMP-1) e del collagene

All'analisi dell'attività della collagenasi, la produzione di metalloproteinasi-1 della matrice (MMP-1) è stata significativamente ridotta in modo dose-dipendente, con 7,{8}}6 percento, 9,29 percento e 31,81 percento a concentrazioni di {{1{ {12}}}}.01 più 0,5 ug/mL, 0,1 più 5 ug/mL e 0,5 più 25 ug/ ml, rispettivamente (Figura 3A). All'analisi della sintesi del collagene, il peptide carbossiterminale (PIP) di procollagene di tipo Ι è stato significativamente aumentato in modo dose-dipendente, con un aumento del 25.{{20}} percentuale a 0,01 più 0,5 ug/mL , 41,99 percento a 0,1 più 5 ug/ml e 71,18 percento a 0,5 più 25 ug/ml (Figura 3B).

3.5|Uno studio clinico sugli effetti di miglioramento delle rughe della pelle sulla pelle umana

L'analisi statistica dei parametri delle rughe è stata eseguita da un sistema di analisi di immagini 3D, per valutare gli effetti di miglioramento delle rughe della pelle del prodotto di prova sulla pelle umana. Rispetto al gruppo di controllo, il parametro "Profondità media delle rughe" è stato ridotto del 4,77 percento a 4 settimane e del 4,25 percento a 8 settimane, il parametro "Profondità media delle rughe più grandi" è stato ridotto del 3,37 percento a 4 settimane e del 4,53 percento a 8 settimane, " Il parametro "Profondità massima delle rughe più grandi" è stato ridotto del 4,36% a 4 settimane e del 7,19% a 8 settimane, il parametro "Lunghezza totale delle rughe" è stato ridotto dell'1,61% a 4 settimane e del 2,67% a 8 settimane, il parametro "Ra" è ​​stato ridotto del 4,22% a 4 settimane e del 3,90 percento a 8 settimane, il parametro "Ry" è stato ridotto del 2,66 percento a 4 settimane e del 7,11 percento a 8 settimane, il parametro "Rz" è stato ridotto del 3,69 percento a 4 settimane e del 6,22 percento a 8 settimane, il decremento è stato di 3,69 percento -7,11 percento (Figura 4).

4|CONCLUSIONE

Vitamina Cè una molecola commercialmente importante ma instabile, quindi migliorarne la stabilità è di interesse per vari settori di mercato. Il nostro lavoro dimostra che l'Aptamin C, aptameri del DNA, potenzialmente prolunga la durata di conservazione e aumenta la potenza di tali prodotti ritardandovitamina C ossidazionein una soluzione. Abbiamo mostrato l'efficacia clinica del complesso di Aptamin C nel miglioramento delle rughe e nell'idratazione della pelle. Il complesso di Aptamin C potrebbe anche aiutare ad alleviare la pelle in condizioni difficili.

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