L'apocinina migliora il danno ai testicoli indotto dal glutammato monosodico a causa della compromissione della barriera emato-testicolare e dei parametri dello stress ossidativoⅡ

Risultati

3.1. Livelli sierici di testosterone, FSH e LH

I livelli di testosterone nel gruppo MSG erano inferiori rispetto al gruppo di controllo. Sebbene il gruppo MSG più APO abbia mostrato un aumento dei livelli di testosterone rispetto al gruppo MSG, questo aumento non era statisticamente significativo (Figura 1A). Il livello di FSH era più alto nel gruppo MSG rispetto al gruppo di controllo. Il livello di FSH nel gruppo MSG plus APO è stato ridotto rispetto al gruppo MSG (Figura 1B). La diminuzione dei livelli di LH nel gruppo MSG e l'aumento dei livelli di LH nel gruppo MSG più APO non erano statisticamente significativi rispetto ai gruppi sperimentali (Figura 1C).

3.2. Livelli testicolari di MDA, GSH e SOD

Il livello di MDA tissutale è stato aumentato nel gruppo MSG rispetto al gruppo di controllo. D'altra parte, confrontando il gruppo MSG plus APO con il gruppo MSG, è stata osservata una significativa diminuzione dell'MDA (Figura 1D). I livelli di GSH e SOD sono diminuiti significativamente nel gruppo MSG rispetto ai gruppi di controllo e APO, rispettivamente. Un aumento significativo dei livelli di GSH e SOD è stato rivelato nel gruppo MSG plus APO rispetto al gruppo MSG (Figura 1E, F).

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3.3. Conteggio, motilità e morfologia degli spermatozoi

La morfologia normale è stata osservata nei campioni di sperma nel gruppo di controllo e nei gruppi APO (Figura 2A, B). Nel gruppo MSG è stato osservato un gran numero di spermatozoi con anomalie morfologiche (Figura 2C). Nel gruppo MSG più APO, sono stati rilevati pochi spermatozoi anormali, poiché la maggior parte degli spermatozoi era di morfologia normale (Figura 2D).

Il numero di spermatozoi e la motilità erano inferiori nel gruppo MSG rispetto ai gruppi di controllo e APO. Tali parametri sono stati aumentati in modo significativo nel gruppo MSG plus APO rispetto al gruppo MSG (Figura 2E, F).

3.4. Rapporto peso testicolare/peso corporeo

Sebbene il rapporto peso testicolare/peso corporeo del gruppo MSG fosse inferiore rispetto agli altri gruppi sperimentali, questa diminuzione non era statisticamente significativa. Non c'era alcuna differenza statistica nel rapporto peso testicolare/peso corporeo tra i gruppi sperimentali (Figura 3E).

3.5. Risultati istopatologici

L'esame microscopico leggero del tessuto testicolare mediante colorazione H&E ha rivelato la normale morfologia dei tubuli seminiferi nel gruppo di controllo. (Figura 3(A1)). La morfologia testicolare intatta è stata osservata nel gruppo APO (Figura 3 (B1)). Nel gruppo MSG, gli epiteli germinali dei tubuli seminiferi erano disorganizzati. I vacuoli che indicano un danno tissutale prominente sono stati rilevati nel compartimento basale dei tubuli seminiferi (Figura 3 (C1)). Quei disturbi morfologici si riflettevano in un punteggio istopatologico significativamente alto per questo gruppo. Nel gruppo MSG più APO, la maggior parte dei tubuli seminiferi rifletteva la normale morfologia, con un numero limitato di tubuli seminiferi degenerati (Figura 3 (D1)).

Rispetto al gruppo MSG, il punteggio istopatologico era significativamente basso nei gruppi di controllo e APO. Il punteggio istopatologico è aumentato significativamente nel gruppo MSG ed è stato significativamente ridotto nel gruppo MSG più APO, rispetto al gruppo MSG (Figura 3F). Inoltre, lo spessore dei tubuli seminiferi nel gruppo MSG era basso rispetto agli altri gruppi sperimentali. Nel gruppo MSG plus APO, si è verificato un aumento significativo dello spessore del tubulo rispetto al gruppo MSG (Figura 3G). I gruppi di controllo e APO hanno presentato una forte positività PAS (Figura 3 (A2, B2)) per le membrane basali dei tubuli seminiferi con morfologia regolare. Le membrane basali deteriorate dei tubuli seminiferi di MSG hanno provocato una diminuzione della PAS-positività delle sezioni. (Figura 3(C2)). La positività PAS del gruppo MSG plus APO era quasi equivalente al gruppo di controllo, con un piccolo numero di tubuli seminiferi disturbati che presentavano membrane basali distaccate (Figura 3 (D2)). Le morfologie dei tubuli testicolari e della tunica albuginea erano normali nel gruppo di controllo (Figura 3(A3)), nel gruppo APO (Figura 3(B3)) e nel gruppo MSG più APO (Figura 3(D3)). Tuttavia, nel gruppo MSG (Figura 3 (C3)), il tessuto adiposo è stato osservato nella tunica albuginea e anche la morfologia dello stroma tubulare era normale.

3.6. Risultati per PCNA

Un gran numero di cellule PCNA-positive nell'epitelio seminifero, come marrone scuro, sono state osservate nei gruppi di controllo e APO (Figura 4 (A1, B1)). Nel gruppo MSG è stata notata una diminuzione del numero di cellule PCNA-positive dell'epitelio seminifero (Figura 4 (C1)). Inoltre, nel gruppo MSG si osservano cellule spermatogeniche positive al PCNA nel lume dei tubuli seminiferi. L'indice di proliferazione, più basso nel gruppo MSG, è stato aumentato nel gruppo MSG plus APO rispetto al gruppo MSG (Figura 4E). Il gruppo MSG plus APO ha anche mostrato un aumento delle cellule PCNA-positive nell'epitelio seminifero (Figura 4 (D1)).

3.7. Risultati per TUNEL Immunocitochimica

Nei gruppi di controllo e APO, le cellule TUNEL positive erano basse (Figura 4 (A2, B2)). Il numero di cellule TUNEL positive era più alto nel gruppo MSG rispetto agli altri gruppi sperimentali (Figura 4 (C2)). Le cellule TUNEL-positive erano meno nel gruppo MSG plus APO rispetto al gruppo MSG (Figura 4 (D2)). L'indice apoptotico era più alto nel gruppo MSG rispetto agli altri gruppi sperimentali. C'è stata una diminuzione comparativa di questo indice nel gruppo MSG plus APO (Figura 4F).

3.8. Risultati per l'immunofluorescenza NOX-2

È stata osservata una debole immunopositività NOX -2 nei gruppi di controllo (Figura 5A-C) e APO (Figura 5D-F). La più alta immunoreattività è stata osservata nel gruppo MSG (Figura 5G-I), mentre è stata rilevata una diminuzione nel gruppo MSG più APO (Figura 5J-L). I controlli negativi dell'analisi dell'immunofluorescenza NOX-2 sono stati mostrati nella Figura S1.

3.9. Risultati per ZO-1 e immunoistochimica dell'occludina

Le positività ZO-1 e occludina sono state rilevate come un colore rosso scuro nel citoplasma basolaterale delle cellule di Sertoli situate nel tubulo seminifero dell'epitelio germinale. Mentre le intensità di ZO-1 e immunoreattività dell'occludina erano più alte nel gruppo di controllo (Figura 6A–C, Figura 7A–C, Figura 8(A1, A2) e Figura 9A, B) e gruppo APO (Figura 6D– F, Figura 7D-F e Figura 8(B1, B2)) e una diminuzione della distribuzione delle immunoreattività è stata osservata nel gruppo MSG (Figura 6G-I, Figura 7G-I e Figura 8(C1, C2)). Sono stati osservati aumenti di positività ZO-1 e occludina nel gruppo MSG più APO, rispetto al gruppo MSG (Figura 6J–L, Figura 7J–L e Figura 8(D1, D2)).

3.10. Risultati al microscopio elettronico a trasmissione

Nei gruppi di controllo e APO, sono state osservate la normale ultrastruttura dell'epitelio germinale tubolare seminifero che presenta numerosi spermatozoi e cellule di Sertoli interconnesse con giunzioni strette (Figura 10A). Il gruppo APO aveva un'ultrastruttura simile al gruppo di controllo (Figura 10B). Nel gruppo MSG, sono state osservate vacuolizzazione e goccioline lipidiche nelle cellule epiteliali germinali del tubulo seminifero, separazioni tra le giunzioni cellulari Sertoli-Sertoli e lamina basale deteriorata dei tubuli seminiferi (Figura 10C). L'ultrastruttura del gruppo MSG plus APO rifletteva la normale organizzazione dei tubuli seminiferi con poche goccioline lipidiche nel citoplasma (Figura 10D)

In che modo Cistanche aumenta il testosterone?

Cistanche è un'erba tradizionalmente utilizzata nella medicina cinese per aumentare l'energia, la libido e la vitalità generale. Si ritiene che Cistanche possa aumentare i livelli di testosterone inibendo l'attività di un enzima chiamato aromatasi, che converte il testosterone in estrogeni. È stato anche scoperto che la cistanche aumenta la produzione di ormone luteinizzante (LH) nel corpo. LH svolge un ruolo cruciale nella regolazione della produzione di testosterone nei testicoli. Aumentando i livelli di LH, Cistanche può aumentare indirettamente la produzione di testosterone. Inoltre, Cistanche contiene anche diverse sostanze fitochimiche come l'echinacoside e l'acteoside, che possiedono proprietà antiossidanti. Questi composti possono aiutare a proteggere i testicoli e altri organi riproduttivi dal danno ossidativo, migliorando così la loro funzione e aumentando la produzione di testosterone. Nel complesso, i meccanismi esatti con cui Cistanche aumenta i livelli di testosterone non sono completamente compresi, ma è probabile che si tratti di un'interazione tra l'inibizione dell'aromatasi, l'aumento della produzione di LH e la fornitura di supporto antiossidante al sistema riproduttivo.

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Merve Acikel-Elmas 1,*, Salva Asma Algilani 1 , Begum Sahin 1 , Ozlem Bingol Ozakpinar 2 , Mert Gecim 2 , Kutay Koroglu 3 e Serap Arbak 1

1 Dipartimento di Istologia ed Embriologia, Facoltà di Medicina, Università Acibadem Mehmet Ali Aydinlar, Icerenkoy Mah., Kayisdagi Cad. No. 32, Atasehir, Istanbul 34752, Turchia

2 Dipartimento di Biochimica, Facoltà di Farmacia, Università di Marmara, Basibuyuk Yolu, 4/A, Basibuyuk, Istanbul 34854, Turchia

3 Dipartimento di Istologia ed Embriologia, Facoltà di Medicina, Università di Marmara, Basibuyuk Yolu No. 9 D:2, Maltepe, Istanbul 34854, Turchia