Effetti di diversi metodi di elaborazione sulla qualità intrinseca e sui caratteri di Cistanche
Sep 22, 2022
Obiettivo: ottimizzare i metodi di lavorazione delle Cistanche Cistanche e studiare gli effetti dei diversi metodi di lavorazione sulla qualità intrinseca e sulle caratteristiche delle Cistanche Cistanche.
Metodi: Diversi trattamenti di pre-essiccazione (non affettato e non cotto a vapore, non affettato e cotto a vapore per 20 min, affettato fresco, cotto a vapore per 5 min dopo le fette fresche) e metodi di essiccazione (essiccazione a 80, 70, 60, 50 gradi, naturale Il contenuto diechinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin, 2′-acetilverbasoside, tuberoside Aepolisaccaridenelle Cistanche sono stati determinati campioni essiccati al sole, essiccati all'ombra e liofilizzati ed è stato utilizzato il punteggio completo. Il metodo di elaborazione diCistancheè stato ottimizzato per metodo, il gusto dei campioni è stato determinato dalla tecnologia della lingua elettronica, la consistenza dei campioni è stata valutata indirettamente in base al tasso di reidratazione e all'indice di durezza ed è stata studiata la correlazione tra essi e il contenuto dei principali componenti chimici.
RISULTATI: Il metodo di punteggio completo è stato utilizzato per selezionare il miglior metodo di lavorazione delle Cistanche fresche, cuocendo a vapore per 20 minuti e poi asciugando a 60 gradi. Lo studio di correlazione ha rilevato che il gusto, la consistenza e altri tratti erano correlati con il contenuto di alcuni componenti in varia misura. .
Conclusione: Al fine di garantire efficacemente la qualità diCistanche, è necessario selezionare metodi di lavorazione appropriati per la lavorazione all'origine e le informazioni sul carattere come il gusto e la consistenza possono riflettere in una certa misura il contenuto di principio attivo del materiale medicinale, il che è conveniente per una rapida identificazione della qualità del materiale medicinale.
Parole chiaveCistanche; lavorazione dell'origine; glicosidi del feniletanolo (Phg); polisaccaridi; lingua elettronica; personaggi
GratuitoCampione di polvere di estratto di Cistanche
Cistancheè lo stelo squamoso secco diCistanche DeserticolaYC Ma oCistanche Tubulosa(Schenk) Wight, che ha le funzioni di rinvigorente yang renale,essenza nutriente e sangue, inumidimento intestinale e lassativo [1].
Il trattamento diCistancheè stato praticato fin dall'antichità. In "Zhenglei Materia Medica" c'è un record di "raccolta il 5 maggio e asciugatura all'ombra". Gli attuali metodi di lavorazione comprendono l'essiccazione, la salatura e la conservazione. A causa del grande volume diCistanche, alto contenuto di zuccheri e difficoltà di essiccazione, il metodo sopra descritto non è solo dispendioso in termini di tempo, laborioso e facilmente soggetto a condizioni naturali, ma anche con il passare del tempo e l'idratazione secondaria, i principi attivi si perdono facilmente, influendo sulla qualità materiali medicinali [2].
Al fine di garantire l'alta qualità e l'uniformità dei materiali medicinali diCistanche, è necessario ottimizzare le modalità di lavorazione della sua origine, così da standardizzarla e standardizzarla. Sulla base dell'esperienza degli allevatori di medicinali nella zona di produzione e dei rapporti di ricerca di studiosi correlati sui metodi di lavorazione delCistanchenell'area di produzione negli ultimi anni [3-6], questo esperimento ha preso il gambo carnoso della Cistanche fresca come oggetto di ricerca per studiare il trattamento di preessiccazione e le modalità di essiccazione delle Cistanche, utilizzando più indicatori. Per valutare la qualità diCistanchee ottimizzare il miglior metodo di lavorazione nella zona di produzione, mira a fornire una base per la standardizzazione della lavorazione nella zona di produzione diCistanche, e di fornire un nuovo metodo di riferimento per la valutazione globale e il controllo globale della qualità del materiale medicinale diCistanche.
1 Strumenti e materiali
1.1 Strumenti
cromatografo liquido ad alte prestazioni Agilent 1260 (Agilent Company, USA); Spettrofotometro UV UV6100S (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); Lingua elettronica ASTREE II (Francia Alpha MOS Company); Bilancia analitica FA2004 (Shanghai Sunny Hengping) Scientific Instrument Co., Ltd.); Bilancia analitica DV215CD (Ohaus Instrument Co., Ltd.); Tester di durezza digitale GY-4 (Yueqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); Pulitore ad ultrasuoni SB-3200DTN (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).
1.2 Materiali
Echinacea (Lotto: Y29M10H84490), Verbasin (Lotto: Y21A9H59554), Cistanoside A (Lotto: P14N9F74960), Isorrascoside (Lotto: Y12D8H50507), 2′-acetil Verbasin (Lotto: P27N6F6623), Tubetto Antoside A (numero di lotto: P226N6F6) Riferimento le sostanze sono state acquistate da Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd., frazione di massa maggiore o uguale al 98 per cento; sostanza di riferimento del glucosio D-anidro (numero di lotto: 110833-201707, China National Institute for Food and Drug Control); acetonitrile È di grado cromatografico; il resto dei reagenti è di grado analitico. Il frescoCistancheper l'esperimento è stato raccolto dalColtivazione delle cistanzebase di Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. della Mongolia Interna AlxaCistancheGruppo nell'ottobre 2019. Gambi succulenti con foglie squamose. Il raccolto frescoCistancheè stato equamente mescolato e diviso casualmente in gruppi. Ogni gruppo di campioni è stato impostato per avere 3 repliche. I metodi di trattamento del campione sono mostrati nella Tabella 1.
2 Metodi e risultati
2.1 Determinazione dei glicosidi del feniletanolo
2.1.1 Condizioni cromatografiche: è stata utilizzata la colonna Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm), la fase mobile era 0,1 percento di soluzione di acido formico (A)-acetonitrile (B), eluizione del gradiente (0 ~ 10 min, 9 percento ~ 15 percento B; 10 ~ 40 min, 15 percento ~ 26 percento B; 40 ~ 45 min, 26 percento ~ 9 percento B;
La portata era 1.0 ml/min; la lunghezza d'onda di rilevamento era di 330 nm; la temperatura della colonna era di 30 gradi; il volume di iniezione era di 10 μL e il cromatogramma è mostrato nella Figura 1.
2.1.2 Preparazione della soluzione della sostanza di riferimento: pesare con precisione una quantità adeguata di echinacoside, verbascoside,cistanoside A, isoverbasin, 2′-acetylverbbasin e tuberoside A e inserirli in 5 mL In un matraccio tarato marrone, sciogliere con il 50 percento di metanolo e diluire a volume per preparare una soluzione di riferimento con concentrazioni di {{6} },809, {{10}},932, 0,185, 0,272, 0,582 e 0,068 mg/mL, rispettivamente.
2.1.3 Preparazione della soluzione di prova: prendere 0,5 g diCistanche Tubulosacampione di polvere (passato attraverso un setaccio n. 4), pesarlo accuratamente, metterlo in un matraccio tarato marrone, aggiungere accuratamente 25 ml di metanolo al 50 per cento, sigillarlo ermeticamente e pesarlo. Dopo immersione per 30 min, ultrasuoni (150 W, 40 kHz) per 40 min, lasciare raffreddare e poi recuperare il peso, agitare bene, lasciare riposare, prendere il supernatante e filtrarlo con una membrana microporosa da 0,45 μm.
2.2 Determinazione dei polisaccaridi
2.2.1 Preparazione della soluzione della sostanza di riferimento: prelevare 10,03 mg di sostanza di riferimento D-anidroglucosio, pesare accuratamente, sciogliere in acqua e diluire a 100 mL per ottenere una soluzione della sostanza di riferimento con una concentrazione di 100,3 ug/mL.
2.2.2 Preparazione della soluzione test: prelevare 0,5 g di polvere campione di Cistanche Tubulosa (passata al setaccio n. 4), pesarla accuratamente, metterla in un matraccio conico tappato, aggiungere 25 ml di 80 percento di etanolo e sonicare a 80 gradi. (150 W, 40 kHz) per 30 min, filtrato a caldo ed estrazione ripetuta una volta. Dopo che il residuo del filtro è stato evaporato a secco, sono stati aggiunti 25 mL di acqua e sonicati per 30 minuti. , Aspirare con precisione 1 ml di soluzione e diluirlo a 10 ml.
2.2.3 Condizioni di rilevamento: prelevare 2 ml della soluzione di prova diCistanche, aggiungere 1 ml di reagente fenolico al 6 percento, agitare bene, aggiungere rapidamente 5 ml di acido solforico concentrato, agitare per 5 minuti, riscaldare a bagnomaria bollente per 15 minuti, raffreddare e posizionare a 482 gradi. L'assorbanza è stata misurata a nm. Utilizzare l'acqua invece della soluzione di prova come controllo in bianco.
2.3 Esame della relazione lineare Diluire la soluzione di riferimento secondo un determinato rapporto per preparare una soluzione di riferimento mista di una serie di concentrazioni e misurare secondo il metodo sopra. Prendi la concentrazione della soluzione di riferimento come ascissa e l'area del picco o assorbanza come ordinata. Regressione lineare, i risultati sono mostrati nella Tabella 2.
2.4 Indagine metodologica
2.4.1 Prova di precisione:
Disegnare accuratamente ciascuna soluzione di riferimento e misurarla continuamente per 6 volte secondo i metodi in "2.1.1" e "2.2.3", e calcolare per ottenere echinacoside, verbascoside,cistanoside A, isaveraside, 2′ Le RSD delle aree di picco di -acetil verbasoside e tuberoside A e l'assorbanza del glucosio erano 0,76 percento, 0,53 percento, 0,81 percento, 0,25 percento, {{10}},44 percento, 0,62 percento, 0. . 49 percento, indicando che la precisione dello strumento è buona.
2.4.2 Prova di ripetibilità:
Prendi 6 copie dello stesso lotto diCistancheper testare la polvere, pesare accuratamente, preparare la soluzione di prova secondo i metodi in "2.1.3" "2.2.2" e premere "2.1.1" "2.2". 2,3", i RSD calcolati di echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverbasin, 2'-acetilverbasoside, tuberoside A e polisaccaride erano rispettivamente del 0,82 percento. , 1,47 percento, 0,88 percento , 1,53 percento , 0.55 percento , 0.44 percento , 1,13 percento , indicando che il metodo ha una buona ripetibilità.
2.4.3 Prova di stabilità:
Disegnare accuratamente la soluzione di prova diCistancheal punto "2.1.3" e iniettare campioni a 0, 2, 4, 8, 12 e 24 h secondo le condizioni cromatografiche al punto "2.1.1" e calcolare le pigne. Le RSD delle aree di picco del glicoside del crisantemo, del verbascoside, del cistanoside A, dell'isoverascoside, del 2′-acetilverbasoside e del tuberoside A erano 0. 47 percento , 1. 12 percento , 0. 42 percento, {{20}}. 65, rispettivamente. percento, 0,57 percento, 0,47 percento, indicando che la soluzione di prova ha una buona stabilità entro 24 h; assorbire accuratamente la soluzione di prova diCistanchein "2.2.2", premere "2.2.3" Le condizioni di rilevamento sotto l'elemento sono state misurate rispettivamente a 0, 15, 30, 60, 120 e 240 min e l'RSD dell'assorbanza del polisaccaride è stato calcolato essere 1,24 percento, indicando che la soluzione di prova era stabile entro 240 min.
2.4.4 Prova di recupero del campione:
Prendi 6 parti diCistancheper testare polvere con contenuto di componenti noto, ogni parte è 0,25 g, accuratamente pesata, aggiungere
Aggiungere la soluzione di riferimento con il contenuto di ciascun componente nel campione, preparare la soluzione di prova secondo i metodi di cui al punto "2.1.3" "2.2.2" e secondo il punto "2.1.1" "2.2. Misurato con il metodo di cui al punto la voce 3", e calcolata per ottenere Echinacea
24 percento , 1{{20}}2. 69 percento, 101. 13 percento, 101. 13 percento, 101. 13 percento, 101. 13 percento, 101. 102. 38 percento, 101. 27 percento, 99. 94 percento, 99. 23 percento, RSD erano 0. 98 percento, 2. 18 percent , 0. 86 percent , 1. 26% , 1. 13% , 0. 94% , 2. 34% , indicando che i due metodi sono accurati e affidabili.
2.5 Effetti dei diversi metodi di lavorazione sul contenuto di componenti attivi in Cistanche La somma dei contenuti di echinacoside e verbascoside nelCistanchecampioni era superiore a 0,30 percento, che era in linea con l'edizione 2020 della farmacopea cinese [1].
Lo studio ha rilevato che la quantità totale dei componenti dell'indice nell'intero materiale medicinale essiccato era superiore a quella delle fette fresche e la quantità totale dei componenti dell'indice nel campione cotto a vapore RZ3 prima dell'essiccazione era la più alta. percento, che è più di 14 volte il livello specificato nella Farmacopea. Si può notare che il contenuto di principi attivi dopo la cottura a vapore e la lavorazione dei materiali medicinali all'origine è maggiore. Confrontando gli effetti di essiccazione al sole, essiccazione all'ombra, essiccazione rapida e liofilizzazione sul contenuto di principi attivi nelle Cistanche Cistanche non affettate e cotte a vapore, si è riscontrato che il contenuto di echinacoside nel campione RZ2 era il più elevato; Il contenuto di '-acetilverbasina e tuberoside A era il più alto, il contenuto diCistancheA nel campione RZ6 era il più alto e il contenuto di polisaccaride nel campione RZ5 era il più alto, indicando che diversi metodi di essiccazione avevano effetti diversi sul contenuto di componenti attivi in CistancheCistanche. È necessario utilizzare più indicatori per valutarne in modo completo la qualità.
Il metodo AHP è stato utilizzato per determinare il coefficiente di peso dell'indice di valutazione della qualità diCistanche, e sono stati calcolati rispettivamente i coefficienti di peso dei sette indicatori di echinacoside, verbascoside, cistanoside A, glicoside isoverbasin, glicoside 2′-acetilverbasico, piploside A e polisaccaride. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0,0561, 0,0561.
In base all'importanza dei componenti misurati inCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberosina A{0}}polisaccaride, costruendo così il momento di priorità di giudizio per il confronto a coppie. Il rapporto di consistenza casuale CR è un indice per misurare se il coefficiente di peso ottenuto è ragionevole. In questo esperimento, CR= 0. 0066 < 0.="" 10,="" indicando="" che="" la="" matrice="" di="" priorità="" di="" giudizio="" per="" il="" confronto="" a="" coppie="" di="" indicatori="" è="" conforme="" al="" test="" di="">
Il coefficiente è ragionevole ed efficace e può essere utilizzato per un punteggio completo dei metodi di lavorazione nell'area di produzione ottimale diCistanche [7].
Per rendere i dati uniformi, gli indicatori di valutazione devono essere normalizzati, la formula è yi=xi-xmin*xmax-xmin, dove yi è il valore normalizzato dell'indicatore, xi è il valore effettivo dell'indicatore indicatore e xmax e xmin sono rispettivamente gli indicatori. I valori massimo e minimo del gruppo e il punteggio complessivo ponderato sono calcolati secondo la formula K=y1×l1 più y2×l2 più …y6×l6 più y7×l7, dove K è il valore del punteggio complessivo , y1, y2…y6, y7 rispettivamente è il risultato della normalizzazione del contenuto di echinacoside, verbascoside, cistanoside A, isoverascoside, glicoside 2′-acetilverbasico, tuberoside A e polisaccaride. Pesi. I risultati completi del punteggio hanno mostrato che la qualità complessiva del campione RZ3 era la migliore, cioè l'intero frescoCistancheè stato cotto a vapore per 20 minuti e poi essiccato a 60 gradi come il miglior metodo di lavorazione all'origine. I risultati sono mostrati nella tabella 3.
