Parte 2: Il cistanoside di Cistanche Herba migliora il danno riproduttivo maschile indotto dall'ipossia attraverso la soppressione dello stress ossidativo

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Effetti di Cis sulla riproduzione nei ratti ipobarici indotti dall'ipossia.

Per determinare gli effetti diipossia ipobaricasu ratti maschi, abbiamo prima testato le alterazioni morfologiche dei testicoli in ratti ipobarici indotti da ipossia. I risultati della colorazione HE hanno mostrato che nel gruppo di controllo, le cellule spermatogeniche normali in vari stadi erano disposte in modo ordinato dalla membrana basale al lume e lo sperma maturo era visibile nei lumi dei tubuli (Figura 4A). Rispetto ai controlli, nel gruppo modello sono state osservate alterazioni patologiche del tessuto testicolare, la membrana basale delle cellule epiteliali testicolari era disposta in modo lasco, l'epitelio spermatogenico era estremamente sottile e il livello e il numero di cellule germinali erano notevolmente ridotti (Figura 4A) . Tuttavia, il trattamento con Cis ha notevolmente migliorato l'istologia del danno testicolare indotto dall'ipossia ipobarica in vivo (Figura 4A). Abbiamo anche misurato il peso corporeo, il peso dei testicoli, il peso dell'epididimo e il peso della ghiandola seminale della vescicola, che ha portato al calcolo dell'indice dell'organo riproduttivo (il rapporto organo riproduttivo/peso corporeo). Come mostrato nella Figura 4B-D, l'indice dell'organo riproduttivo (testicoli, epididimo e vescicola seminale) era notevolmente inferiore nel gruppo modello (P< 0.01)than="" in="" the="" control="" group.="" however,="" the="" effect="">ipossia ipobaricasull'indice dell'organo riproduttivo dei ratti è stato invertito con il trattamento Cis (Figura 4B-D).

Successivamente, sono state misurate anche l'attività dell'enzima acrosomiale e il tasso di spermatozoi vivi dello sperma di ratto maschio per chiarire il danno alla funzione testicolare. Come mostrato nella Figura 4E, 4F, l'attività dell'enzima acrosomiale e la motilità degli spermatozoi erano inferiori nei ratti del gruppo modello rispetto a quella nel gruppo di controllo (P< 0.01).="" however,="" compared="" with="" rats="" in="" the="" model="" group,="" acrosome="" enzyme="" activity="" was="" restored="" in="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="">< 0.05)(figure="" 4d).="" moreover,="" as="" shown="" in="" figure="" 4f,="" treatment="" with="" cis="" also="" enhanced="" the="" live="" sperm="" rate;="" the="" rats="" treated="" with="" 8="" mg/kg/d="" cis="" all="" showed="" a="" significantly="" increased="" live="" sperm="" rate(55.83="" ±=""><><><0.05; and=""><0.05 respectively)="" when="" compared="" with="" the="" model="" rats="" (43.83="">

Presi insieme, questi risultati hanno suggerito che ilipobarico ipossicol'ambiente ha portato ad alterazioni morfologiche testicolari, perdita di peso degli organi riproduttivi e danni alla funzione testicolare nei ratti maschi e il Cis potrebbe proteggere efficacemente gli organi riproduttivi dal danno indotto dall'ipossia.

Effetti di Cis sull'OS nei testicoli di ratti ipobarici indotti da ipossia. I livelli di ROS e LPO nei testicoli dei ratti sono stati misurati per analizzare gli effetti del Cis sull'OS indotta dall'ipossia ipobarica. L'analisi ROS ha rivelato che rispetto al gruppo di controllo, i livelli di ROS nei testicoli nel gruppo modello erano significativamente aumentati (P ​​<0.01 figura="" 5a).="" al="" contrario,="" lpo="" era="" drammaticamente="" elevato="" nei="" testicoli="" (p=""><{8}}.01) in="" ipossia="" ipobarica="" rispetto="" a="" condizioni="" normossiche="" (figura="" 5b).="" tuttavia,="" il="" trattamento="" cis="" ha="" alterato="" le="" modifiche="" di="" cui="" sopra="" (p=""><0,05), in="" cui="" cis-b="" ha="" esercitato="" effetti="" migliori="" rispetto="" ad="" altri="" cis="" (figura="" 5a,="" 5b).="" cis="" sembrava="" proteggere="" i="" testicoli="" riducendo="" l'os="" in="" condizioni="" di="" ipossia="" ipobarica="" in="">

Inoltre, sono state eseguite analisi dell'apoptosi per valutare ulteriormente il meccanismo con cui Cis ha protetto contro il danno della funzione testicolare indotto dall'ipossia ipobarica. I risultati della colorazione TUNEL (Figura 5C) hanno mostrato che esisteva un'apoptosi significativa nel gruppo modello com

pared al gruppo di controllo. Tuttavia, dopo il trattamento con Cis (8 mg/kg/giorno), si sono verificate meno cellule apoptotiche (P <{1}}.05) (figura="" 5c).="" anche="" i="" dati="" del="" western="" blot="" lo="" hanno="">ipossia e ipobaricail trattamento ha comportato l'attivazione di Caspase{{0}} e PARP e un aumento del rapporto Bax/Bcl-2 nel tessuto testicolare, indicando un aumento dell'apoptosi (Figura 5D). Inoltre, diversi tipi di trattamento Cis hanno ridotto significativamente l'apoptosi nel tessuto testicolare (Figura 5D). Allo stesso modo, l'analisi IHC del tessuto testicolare ha mostrato risultati simili (Figura 1 supplementare). Per verificare il meccanismo della OS ridotta da Cis innescata dall'ipossia ipobarica, abbiamo ulteriormente testato le attività di GR, GPx e SOD nel tessuto testicolare. Come mostrato nella Figura 5E, rispetto al gruppo di controllo, il trattamento dell'ipossia ipobarica ha ridotto significativamente le attività GR, GPx e SOD (P <{9}}.01). tuttavia,="" il="" trattamento="" con="" cis="" ha="" ripristinato="" le="" attività="" enzimatiche="" (gr,="" gpx="" e="" sod)="" del="" tessuto="" testicolare="" nei="" ratti="" trattati="" con="" ipossia="" ipobarica="" (p=""><0,05). in="" conclusione,="" cis="" sembrava="" proteggere="" i="" testicoli="" attivando="" un="" potente="" meccanismo="" di="" difesa="" enzimatica="" antiossidante="" endogeno="" in="" condizioni="" di="" ipossia="">

Discussione

Nelle zone d'alta quota,ipossia ipobaricaè noto che colpisce più sistemi negli esseri umani, incluso il sistema riproduttivo maschile [4, 20]. Recenti indagini sperimentali sono orientate alla comprensione dei meccanismi del comeipossia ipobaricacompromette il sistema riproduttivo maschile. In questo studio, l'effetto terapeutico dell'estratto di CisCistanceErbaè stato studiato il danno riproduttivo indotto dall'ipossia. I risultati hanno dimostrato che il Cis può proteggere il sistema riproduttivo maschile dal danno ipossico riducendo l'accumulo di ROS indotto dall'ipossia e l'OS attraverso il potenziamento dell'attività degli enzimi antiossidanti endogeni.

I ROS sono radicali liberi derivati ​​dall'ossigeno che svolgono un ruolo vitale nella fisiologia e patologia umana. Basse dosi di ROS sono essenziali per la capacità degli spermatozoi, la reazione acrosomiale e la fusione spermatozoi-ovociti [24, 25]. Tuttavia, l'eccessivo accumulo di ROS porta spesso a danni alle cellule germinali e stromali, con conseguenteinfertilità maschile[26]. I ROS possono facilmente danneggiare le membrane cellulari, gli acidi nucleici, le proteine, gli enzimi e altre macromolecole biologiche attraverso la perossidazione. Inoltre, portano anche a potenziali danni cellulari e al DNA quando superano la capacità di trasporto degli antiossidanti. Prove accumulate supportano il ruolo fondamentale dei ROS nella patogenesi della fertilità maschile [27, 28]. La produzione di ROS è regolata dalla tensione di ossigeno. In condizioni ipossiche, l'ossigeno disponibile nell'ambiente diminuisce e la viscosità del sangue aumenta, influenzando così molti processi metabolici dipendenti dall'ossigeno nell'organismo [29, 30]. Tuttavia, la minore pressione atmosferica ad alta quota provoca uno scarso ritorno venoso e una diminuzione della quantità di ossigeno trasportata dal flusso sanguigno a tutte le cellule dell'organismo, che aumenta ulteriormente l'ipossia di organi e cellule [29, 30]. Pertanto, l'esposizione a un atteggiamento elevato dà luogo a una serie di risposte fisiologiche ipossiche, inclusa la produzione e l'accumulo di ROS, quando la domanda di ossigeno supera l'offerta vascolare. Come accennato in precedenza, l'accumulo di ROS porta a una varietà di effetti intracellulari, il più critico dei quali è causare OS nelle cellule.

OS si riferisce a uno squilibrio tra reazioni di ossidazione e riduzione, che porta alla generazione di ossidanti o molecole in eccesso che accettano un elettrone da un altro reagente, che a sua volta produce ROS [31, 32]. È ben noto che l'OS può essere innescato da una serie di fattori endogeni ed esogeni, inclusa l'esposizione ad alta quota. Gli spermatozoi sono cellule particolarmente suscettibili alla OS a causa dei loro sistemi di riparazione cellulare inadeguati e dell'alto contenuto di acidi grassi polinsaturi nella membrana plasmatica [33]. I tessuti testicolari ed epididimali non fanno eccezione, poiché la presenza di OS grave è stata osservata in spermatidi rotondi in ratti soggetti a ipossia [4]. L'OS influisce sulla stabilità del DNA, mettendo a repentaglio l'integrità del materiale genetico dei gameti [34-36]. Tuttavia, è stato confermato che un alto livello di danno al DNA nei gameti maschili porta all'attivazione della segnalazione dell'apoptosi, che si traduce in una riduzione del numero di spermatozoi dell'epididimo e un aumento della percentuale di cellule difettose [28, 37]. Nel presente studio, l'ipossia ha ridotto significativamente la vitalità delle cellule GC-1 attraverso l'induzione dell'apoptosi e l'arresto del ciclo cellulare. Ancora più importante, l'analisi FCM ha mostrato livelli di ROS significativamente aumentati dopo la stimolazione dell'ipossia, con un aumento del tasso di apoptosi e una maggiore attivazione del rapporto Caspase-3, PARP e Bax/Bcl-2, indicando che ROS potrebbe attivarsi apoptosi attivando la via di segnalazione della caspasi durante il danno alla fertilità indotto dall'ipossia. I risultati attuali hanno dimostrato che l'ipossia ha portato a un eccessivo accumulo di ROS, causando danno ossidativo alle cellule riproduttive. Pertanto, è significativo identificare nuovi antiossidanti che possono fungere da approccio efficace per alleviare il danno alla fertilità indotto dall'ipossia. Per proteggersi dall'OS, nel corpo esiste un complesso sistema antiossidante, composto principalmente da fattori enzimatici. In condizioni fisiologiche, il contenuto di ROS e il sistema antiossidante mantengono un certo equilibrio. Tuttavia, la sovrapproduzione di ROS esaurisce il sistema antiossidante dello sperma, portando alla OS, che provoca danni al DNA dello sperma e si traduce in tassi di fertilità e gravidanza inferiori [23]. Pertanto, per affrontare la sovrapproduzione di ROS e i relativi effetti deleteri a livello cellulare nel sistema riproduttivo maschile, sono state testate diverse strategie antiossidanti [23]. Attualmente, la letteratura sull'uso di composti con attività antiossidante e miglioramento della funzione spermatica è ampia. È importante sottolineare che la maggior parte dei rapporti descrive un miglioramento dei parametri spermatici dopo l'assunzione di antiossidanti per via orale, inclusi miglioramenti nella concentrazione e motilità degli spermatozoi o diminuzioni del danno al DNA [38]. Pertanto, un numero crescente di urologi prescrive antiossidanti per via orale per l'infertilità a causa di problemi legati alla OS [39]. Questi antiossidanti includono principalmente carnitine, vitamine, zinco, melatonina e composti naturali [23, 40]. Attualmente, con lo sviluppo della tecnologia di estrazione dei farmaci, si considera che anche un numero crescente di estratti di MTC possa attenuarsiinfertilità maschileperché questi antiossidanti possono ridurre gli effetti distruttivi della OS [41]. Yuce A. et al. riportato nel 2013 che la cannella ha effetti benefici sull'equilibrio ossidativo e antiossidante nei testicoli e sulla qualità dello sperma [42]. Zhang L et al. ha mostrato che la curcumina migliora significativamente la motilità degli spermatozoi nei pazienti e diminuisce l'H2O2 [43]. Inoltre, è stato dimostrato che una varietà di altri estratti vegetali come mirtillo, crocus sativus, semi di melograno e tè verde proteggono il sistema riproduttivo attraverso meccanismi antiossidanti [27, 44-47].Cstanches Herbaè un'importante MTC che possiede un profilo di sicurezza favorevole e ampie funzioni medicinali per il trattamento dell'infertilità, tra le altre condizioni [13]. Gli studi farmacologici moderni lo hanno dimostratoCstanches Herbapossiede varie attività, come attività antiossidante, antinfiammatoria, epatoprotettiva e antineuro degenerativa [13, 48]. Pertanto, estratti, frazioni o composti daCstanches Herbapossono avere potenziali caratteristiche antiossidanti per il trattamento dell'infertilità.

I principi attivi nelle piante che migliorano la fertilità includono vari gruppi chimici come PhG, saponine, composti volatili ossigenati e alcaloidi [41]. Studi sull'attività farmacologica dei PhG hanno dimostrato che i PhG esibiscono un'ampia gamma di bioattività, come l'antiossidazione, la neuroprotezione antiradiazioni e il miglioramento della funzione sessuale [49, 50]. Tra queste attività, l'antiossidazione sta gradualmente attirando l'attenzione. È stato riportato che alcuni singoli componenti o frazioni di PhG inibiscono l'apoptosi delle cellule germinali indotta da varie sostanze chimiche e le loro capacità antiossidanti in vitro sono state dimostrate anche in vivo in diversi modelli animali [51, 52]. Questi risultati indicano che i PhG potrebbero essere un candidato attraente per il trattamento diinfertilità maschile. Cis è un PhG attivo da cui può essere isolatoCstanches Herba. Nel presente studio, abbiamo esplorato gli effetti del Cis sulle cellule trattate con ipossia o su un modello di ratto e abbiamo studiato i meccanismi molecolari sottostanti. Cis ha mostrato attività protettive sulla diminuzione della vitalità indotta dall'ipossia e sull'aumento dell'apoptosi nelle cellule GC-1 e ha anche mostrato un effetto protettivo sul danno indotto dall'ipossia nel sistema riproduttivo dei ratti in vivo. È stata osservata una significativa diminuzione delle attività GR, GPx e SOD in ipossia rispetto ai gruppi normossici, mentre le attività specifiche di GR, GPx e SOD sono aumentate significativamente nei testicoli o nelle cellule GC-1 trattate con Cis. Cis sembrava proteggere i testicoli e le cellule GC-1 in condizioni ipossiche migliorando le attività degli enzimi antiossidanti.

Gli antiossidanti enzimatici funzionano principalmente scavenging anioni superossido, prevenendo così la perossidazione lipidica e danni al DNA per prevenire l'infertilità. I meccanismi antiossidanti enzimatici svolgono un ruolo cruciale nella prevenzione del danno ossidativo [23]. Il meccanismo enzimatico contro l'OS comprende scavenger di radicali liberi ed enzimi dipendenti dal glutatione tra cui GR, GPx e SOD [12]. È ben noto che gli enzimi antiossidanti sono essenziali per il sistema riproduttivo maschile. Nel presente studio, l'effetto della ridotta attività enzimatica antiossidante in ipossia ipobarica è stato accompagnato da un aumento di ROS e LPO nel gruppo modello, il che è coerente con i precedenti rapporti [12]. Tuttavia, la somministrazione di Cis ha portato a un recupero delle attività enzimatiche antiossidanti nelle cellule GC-1 e nei testicoli dei ratti, rendendo possibile la generazione di strategie per la somministrazione di Cistanche Herba per prevenire il danno indotto dall'ipossia ipobarica, come precedentemente suggerito. Sebbene i risultati attuali abbiano mostrato che il trattamento con Cis ha in parte ridotto il danno alle cellule germinali indotto dall'ipossia nei ratti, sono necessarie ulteriori indagini per svelare il quadro completo dei suoi effetti protettivi riproduttivi. Ad esempio, il meccanismo specifico del Cis influenza l'attività degli enzimi antiossidanti. Inoltre, c'è la questione se anche altri meccanismi possano essere pertinenti poiché Cis ha recuperato solo parzialmente il danno riproduttivo causato dall'ipossia. Infine, si dovrebbe considerare anche se il Cis abbia un effetto diretto sulla promozione della crescita sulle cellule germinali.

Conclusioni

In generale, i risultati di questo studio sottolineano il potenziale del Cis come antiossidante per il trattamento del danno riproduttivo maschile indotto dall'ipossia. Cis può proteggere dal danno riproduttivo maschile indotto dall'ipossia ripristinando l'attività dell'enzima antiossidante, riducendo l'OS indotta da ROS, aumentando contemporaneamente la vitalità cellulare e diminuendo l'apoptosi. È importante sottolineare che i sottotipi Cis (Cis-A, Cis-B, Cis-C e Cis-H) studiati in questo studio hanno mostrato tutti un certo effetto protettivo sul sistema riproduttivo e Cis-B ha mostrato l'effetto più significativo. Pertanto, ipotizziamo che il Cis potrebbe essere un buon candidato antiossidante per il trattamento del danno riproduttivo maschile indotto dall'ipossia, sebbene il preciso meccanismo sottostante richieda ulteriori indagini.

Ringraziamenti

Questo studio è stato sostenuto da sovvenzioni della National Natural Science Foundation of China (n. 81672535; 82002686) e dell'Esercito popolare di liberazione cinese (Fondo per la ricerca in scienze mediche; n. 16QNP114). Divulgazione del conflitto di interessi Nessuno.

Riferimenti

[1] Bracke A, Peeters K, Punjabi U, Hoogewijs D e Dewilde S. Una ricerca sui meccanismi molecolari alla base dell'infertilità idiopatica maschile. Reprod Biomed in linea 2018; 36: 327-339.

[2] Agarwal A, Mulgund A, Hamada A e Chyatte MR. Una visione unica dell'infertilità maschile in tutto il mondo. Reprod Biol Endocrinolo 2015; 13:37.

[3] Jankovic Velickovic L e Stefanovic V. Ipossia e spermatogenesi. Int Urol Nephrol 2014; 46: 887-894.

[4] Farias JG, Bustos-Obregon E, Orellana R, Bucarey JL, Quiroz E e Reyes JG. Effetti dell'ipossia ipobarica cronica sull'istologia del testicolo e sul metabolismo ossidativo degli spermatidi rotondi. Andrologia 2005; 37: 47-52.

[5] Liao W, Cai M, Chen J, Huang J, Liu F, Jiang C e Gao Y. L'ipossia ipobarica provoca effetti deleteri sulla spermatogenesi nei ratti. Riproduzione 2010; 139: 1031-1038.

[6] Paul C, Teng S e Saunders PT. Un singolo, lieve e transitorio stress termico scrotale provoca ipossia e stress ossidativo nei testicoli del topo, che induce la morte delle cellule germinali. Biol Reprod 2009; 80: 913-919.

[7] Gasco M, Rubio J, Chung A, Villegas L e Gonzales GF. Effetto dell'esposizione ad alta quota sulla spermatogenesi e sulla conta spermatica dell'epididimo nei ratti maschi. Andrologia 2003; 35: 368- 374.

[8] Zepeda AB, Figueroa CA, Calaf GM e Farias JG. Sistema riproduttivo maschile e antiossidanti nello stress ossidativo indotto dall'ipossia ipobarica. Andrologia 2014; 46: 1-8.

[9] Quindry J, Dumke C, Slivka D e Ruby B. Impatto dell'esercizio estremo ad alta quota sullo stress ossidativo nell'uomo. J Physiol 2016; 594: 5093-5104.

[10] Otasevic V, Stancic A, Korac A, Jankovic A e Korac B. Specie reattive di ossigeno, azoto e zolfo nella fertilità maschile umana. Un crocevia di segnalazione cellulare e patologia. Biofattori 2020; 46: 206-219.

[11] Bui AD, Sharma R, Henkel R e Agarwal A. Le specie reattive dell'ossigeno influiscono sul DNA dello sperma e sul suo ruolo nell'infertilità maschile. Andrologia 2018; 50: e13012.

[12] Bisht S, Faiq M, Tolahunase M e Dada R. Stress ossidativo e infertilità maschile. Nat Rev Urol 2017; 14: 470-485.

[13] Fu Z, Fan X, Wang X e Gao X. Cistanches Herba: una panoramica delle sue proprietà chimiche, farmacologiche e farmacocinetiche. J Etnofarmaco 2018; 219: 233-247.

[14] Wang T, Chen C, Yang M, Deng B, Kirby GM e Zhang X. L'estratto di etanolo di Cistanche tubulosa media i livelli di ormone sessuale del ratto mediante l'induzione di enzimi steroidogenici testicolari. Farm Biol 2016; 54: 481-487.

[15] Wong HS e Ko KM. Herba Cistanches stimola il ciclo redox del glutatione cellulare mediante specie reattive dell'ossigeno generate dalla respirazione mitocondriale nei cardiomiociti H9c2. Farm Biol 2013; 51: 64-73.

[16] Wang N, Ji S, Zhang H, Mei S, Qiao L e Jin X. Cistanches Herba: antietà. Invecchiamento Dis 2017; 8: 740-759.

[17] Gu C, Yang X e Huang L. Cistanches Herba: una rassegna di neurofarmacologia. Front Pharmacol 2016; 7: 289.

[18] Yan Q, He B, Hao G, Liu Z, Tang J, Fu Q e Jiang CX. KLF9 aggrava il danno ischemico nei cardiomiociti aumentando lo stress ossidativo. Scienza della vita 2019; 233: 116641.

[19] Xu F, Guo G, Zhu W e Fan L. I saggi della funzione acrosomiale dello sperma umano sono predittivi del tasso di fecondazione in vitro: uno studio di coorte retrospettivo e una meta-analisi. Reprod Biol Endocrinolo 2018; 16:81.

[20] Farias JG, Puebla M, Acevedo A, Tapia PJ, Gutierrez E, Zepeda A, Calaf G, Juantok C e Reyes JG. Stress ossidativo nel testicolo di ratto e nell'epididimo in ipossia ipobarica intermittente: ruolo protettivo dell'integrazione di ascorbato. J Androl 2010; 31: 314-321.

[21] Saleh RA, Agarwal A, Nada EA, El-Tonsy MH, Sharma RK, Meyer A, Nelson DR e Thomas AJ. Effetti negativi dell'aumento del danno al DNA dello sperma in relazione allo stress ossidativo seminale negli uomini con infertilità idiopatica e fattore maschile. Fertil Steril 2003; 79 Suppl 3: 1597-1605.

[22] Aitken RJ e Baker MA. Cause e conseguenze dell'apoptosi negli spermatozoi; contributi all'infertilità e impatti sullo sviluppo. Int J Dev Biol 2013; 57: 265-272.

[23] Martin-Hidalgo D, Bragado MJ, Batista AR, Oliveira PF e Alves MG. Antiossidanti e fertilità maschile: dagli studi molecolari alle evidenze cliniche. Antiossidanti (Basilea) 2019; 8:89.

[24] Drevet JR. La famiglia dell'antiossidante glutatione perossidasi e gli spermatozoi: una storia complessa. Mol Cell endocrinolo 2006; 250: 70-79.

[25] Aitken RJ, Clarkson JS, Hargreave TB, Irvine DS e Wu FC. Analisi della relazione tra la funzione difettosa dello sperma e la generazione di specie reattive dell'ossigeno nei casi di oligozoospermia. J Androl 1989; 10: 214-220.

[26] Agarwal A, Sharma RK, Nallella KP, Thomas AJ, Jr, Alvarez JG e Sikka SC. Specie reattive dell'ossigeno come marker indipendente di infertilità maschile. Fertil Steril 2006; 86: 878- 885.

[27] Gli estratti di Zepeda A, Aguayo LG, Fuentealba J, Figueroa C, Acevedo A, Salgado P, Calaf GM e Farias J. Blueberry proteggono il testicolo dallo stress ossidativo indotto dall'ipossia ipobarica nei ratti. Oxid Med Cell Longev 2012; 2012: 975870.

[28] Yang S, Zhang W, Xuan LL, Han FF, Lv YL, Wan ZR, Liu H, Ren LL, Gong LL e Liu LH. Akebia Saponin D inibisce la formazione di aterosclerosi nei topi ApoE(-/-) attenuando l'apoptosi indotta da stress ossidativo nelle cellule endoteliali. Aterosclerosi 2019; 285: 23-30.

[29] Saxena, Danimarca. Effetto dell'ipossia da esposizione intermittente all'altitudine sulle caratteristiche dello sperma e sulla morfologia testicolare delle scimmie rhesus maschi. Int J Biometeorol 1995; 38: 137- 140.

[30] Verratti V, Berardinelli F, Di Giulio C, Bosco G, Cacchio M, Pellicciotta M, Nicolai M, Martinotti S e Tenaglia R. Evidenza che l'ipossia cronica causa compromissione reversibile della fertilità maschile. asiatico J Androl 2008; 10: 602-606.

[31] Henkel RR. Leucociti e stress ossidativo: il dilemma della funzione spermatica e della fertilità maschile. asiatico J Androl 2011; 13: 43-52.

[32] Tremellen K. Stress ossidativo e infertilità maschile--una prospettiva clinica. Hum Reprod aggiornamento 2008; 14: 243-258.

[33] Saradha B e Mathur PP. Induzione dello stress ossidativo da parte del lindano nell'epididimo di ratti maschi adulti. Environ Toxicol Pharmacol 2006; 22: 90-96.

[34] Aitken RJ e Roman SD. Sistemi antiossidanti e stress ossidativo nei testicoli. Adv Exp Med Biol 2008; 636: 154-171.

[35] Wagner H, Cheng JW e Ko EY. Ruolo delle specie reattive dell'ossigeno nell'infertilità maschile: una revisione aggiornata della letteratura. Jurol arabo 2018; 16: 35-43.

[36] Agarwal A, Saleh RA e Bedaiwy MA. Ruolo delle specie reattive dell'ossigeno nella fisiopatologia della riproduzione umana. Fertil Steril 2003; 79: 829-843.

[37] Redza-Dutordoir M e Averill-Bates DA. Attivazione delle vie di segnalazione dell'apoptosi da parte di specie reattive dell'ossigeno. Biochim Biophys Acta 2016; 1863: 2977-2992.

[38] Zengerling F e Schmidt S. [Antiossidanti per la subfertilità maschile]. Urologia A 2016; 55: 956- 959.

[39] Esteves SC e Agarwal A. Nuovi concetti sull'infertilità maschile. Int Braz J Urol 2011; 37: 5-15.

[40] Pisoschi AM e Pop A. Il ruolo degli antiossidanti nella chimica dello stress ossidativo: una rassegna. Eur J Med Chem 2015; 97: 55-74.

[41] Tahvilzadeh M, Hajimahmoodi M, Toliyat T, Karimi M e Rahimi R. Un approccio basato sull'evidenza alle piante medicinali per il trattamento delle anomalie dello sperma nella medicina tradizionale persiana. Andrologia 2016; 48: 860-879.

[42] Yuce A, Turk G, Ceribasi S, Sonmez M, Ciftci M e Guvenc M. Effetti dell'olio di corteccia di cannella (Cinnamomum zeylanicum) sui valori di antiossidanti testicolari, sulle cellule germinali apoptotiche e sulla qualità dello sperma. Andrologia 2013; 45: 248-255.

[43] Zhang L, Diao RY, Duan YG, Yi TH e Cai ZM. Effetto antiossidante in vitro della curcumina sulla qualità dello sperma umano nella leucocitospermia. Andrologia 2017; 49: e12760.

[44] Heidary M, Vahhabi S, Reza Nejadi J, Delfan B, Birjandi M, Kaviani H e Givrad S. Effetto dello zafferano sui parametri dello sperma di uomini sterili. Urol J 2008; 5: 255-259.

[45] Safarinejad MR, Shafiei N e Safarinejad S. Uno studio prospettico in doppio cieco randomizzato controllato con placebo sull'effetto dello zafferano (Crocus sativus Linn.) sui parametri dello sperma e sulla capacità antiossidante del plasma seminale in uomini infertili con oligoasthenoteratozoospermia idiopatica. Phytother Res 2011; 25: 508-516.

[46] Kolahdooz M, Nasri S, Modarres SZ, Kianbakht S e Huseini HF. Effetti dell'olio di semi di Nigella sativa L. sulla qualità anormale dello sperma negli uomini sterili: uno studio clinico randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo. Fitomedicina 2014; 21: 901-905.

[47] Jiao N, Chen Y, Zhu Y, Wang W, Liu M, Ding W, Lv G, Lu J, Yu B e Xu H. Effetti protettivi del catalpol sul danno riproduttivo maschile indotto dal diabete mellito attraverso la soppressione degli AGE /RAGE/Via di segnalazione Nox4. Scienza della vita 2019; 116736.

[48] ​​Xiong Q, Kadota S, Tani T e Namba T. Effetti antiossidanti dei feniletanoidi da Cistanche deserticola. Biol Farm Bull 1996; 19: 1580-1585.

[49] Shao SY, Feng ZM, Yang YN, Jiang JS e Zhang PC. Forsythenethosides A e B: due nuovi glicosidi feniletanoidi con un 15-anello membro da Forsythia suspensa. Org Biomol Chem 2017; 15: 7034-7039.

[50] Xue Z e Yang B. Glicosidi feniletanoidi: progressi della ricerca nella loro fitochimica, attività farmacologica e farmacocinetica. Molecole 2016; 21: 991.

[51] Chen W, Lin HR, Wei CM, Luo XH, Sun ML, Yang ZZ, Chen XY e Wang HB. L'echinacoside, un glicoside feniletanoide di Cistanche deserticola, prolunga la durata della vita di Caenorhabditis elegans e li protegge dalla tossicità indotta da Abeta. Biogerontologia 2018; 19: 47-65.

[52] Xuan GD e Liu CQ. [Ricerca sull'effetto dei glicosidi feniletanoidi (PEG) della Cistanche deserticola sull'anti-invecchiamento nei topi anziani indotti dal D-galattosio]. Zhong Yao Cai 2008; 31: 1385-1388.