Trasporto sensibile alla floridzina di echinacoside e acteoside e via di assorbimento intestinale alterata dopo l'applicazione dell'estratto di Cistanche tubulosa

Per ulteriori informazioni:ali.ma@wecistanche.com

Tadatoshi Tanino et al

Obiettivi astratti

L'obiettivo di questo studio era di affrontare gli effetti benefici diEstratto di Cistanche tubulosasul miglioramento della bassa permeabilità intestinale dell'echinacoside (ECH) e dell'acteoside (ACT).

Metodi

Assorbimento di ECH e ACT inEstratto di Cistanche tubulosaè stato caratterizzato utilizzando monostrati cellulari di Caco-2 intestinale umano con composti intatti. L'assorbimento dipendente dal trasportatore di glucosio di ECH e ACT è stato confermato da una tecnica di perfusione in-situintestinal.

Risultati chiave

La permeabilità apparente (Papp) non era significativamente diversa tra ECH intatta e ACT intatta. In presenza di floridzina, il Papp di ECH e ACT a dosi elevate è stato ridotto al 20 percento del rispettivo non trattamento ma non è stato alterato da floretina e verapamil.Estratto di Cistanche tubulosaa dosi basse e alte ha migliorato la Papp di ECH e ACT (entrambi di tre volte), determinando la loro ampia partecipazione all'assorbimento indipendente dal trasportatore del glucosio sodio-dipendente. A bassa concentrazione, i livelli concomitanti di ECH e ACT nel sangue portale sono stati significativamente soppressi dalla floridzina.

Conclusione

Il dietetico e medicinaleEstratto di Cistanche tubulosail miglioramento dell'assorbimento intestinale di ECH e ACT può servire a gestire meglio la salute umana, sebbene il coinvolgimento del trasporto sensibile alla floridzina dovrebbe essere ridotto.

Parole chiaveacteoside; Caco-2 monostrati cellulari;Estratto di Cistanchetubulosa; echinacoside;trasportatore del glucosio sensibile alla floridzina

Estratto di Cistanche tubulosa

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introduzione

Le radici della Cistanche tubulosa sono state tradizionalmente utilizzate per la medicina e l'alimentazione.Estratto di Cistanche tubulosaè noto per possedere effetti farmacologici in varie malattie del cervello, funzioni antietà, metabolismo dei grassi e crescita dei capelli.[1–4]Recentemente, iridoidi, monoterpenoidi, glicosidi feniletanoidi e lignani sono stati isolati daCistanche tubulose.[5,6] I glicosidi feniletanoidi, una classe di composti polifenolici, sono i principali ingredienti chimici nelle specie Cistanche,[7] sebbene le loro quantità variano tra specie diverse. L'echinacoside (ECH; Figura 1) è uno dei principali glicosidi feniletanoidi in HerbaCistanchis. Viene idrolizzato ad acteoside (ACT; detto anche verbascoside) da enzimi di origine batterica nell'intestino crasso.[8,9] ECH e ACT possiedono l'attività benefica di epatoprotezione[10] e antinfiammatoria[11] nei roditori. Sorprendentemente, l'ECH altamente idrosolubile migliora gli esiti comportamentali e neurochimici in un modello murino del morbo di Parkinson e inibisce l'attivazione della caspasi-3 e della caspasi-8 nei neuroni dei granuli cerebellari.[9] È noto che la barriera ematoencefalica limita rigorosamente l'ingresso e la distribuzione di xenobiotici nel cervello dal sangue. Wu et al.[12] ha anche mostrato che l'ACT solubile in acqua era distribuito rapidamente nei tessuti cerebrali dei ratti. Pertanto, ECH e ACT possono essere trasportati nel cervello, nell'intestino e nel fegato dai sistemi specifici.

Sebbene ci siano forti prove che suggeriscono che il consumo diEstratto di Cistanche tubulosaè benefico per la salute umana, la permeabilità dell'ECC pura attraverso i monostrati cellulari di Caco{{0}} a una concentrazione apicale di 8,4 ± 1,6 ug/ml è uguale o inferiore a quella del marker di trasporto paracellulare mannitolo.[13] Quando l'ECC pura viene somministrata per via orale ai ratti (dose, 1{{10}}0 mg/kg), l'assorbimento è estremamente rapido (Tmax,15 min) e la concentrazione sierica massima è molto bassa (Cmax, 0,61 ± 0,32 ug/ml).[14] La biodisponibilità assoluta di ECH è solo del 0,83 percento. Allo stesso modo, quando le cellule Caco-2 vengono incubate con una frazione fenolica parzialmente purificata dalle acque reflue del frantoio, l'assorbimento di ACT puro è rapido con un picco di accumulo che si verifica dopo 30 min e un'efficienza di accumulo totale dello 0,1%, fornendo livelli intracellulari di130 pmol/mg di proteine ​​cellulari.[15] Nei ratti, la concentrazione massima (0,13 ± 0,03 ug/ml) di ACT puro è stata raggiunta entro 30 minuti dalla somministrazione orale di 100 mg/kg,[12] implicando un rapido assorbimento intestinale. La biodisponibilità orale di ACT, così come ECH, è piuttosto bassa (0,12 ± 0,04 per cento), suggerendo la possibilità di effetti di primo passaggio nel tratto intestinale e nel fegato. Nella bile di ratto, i coniugati di metilazione e glucuronidazione dell'ECH sono i principali metaboliti,[16] sebbene l'entità del metabolismo epatico rimanga poco chiara. Abbiamo preliminarmente scoperto che ECH e ACT erano abbastanza stabili negli omogenati della mucosa intestinale di ratto e nell'acido gastrico artificiale (dati non mostrati). Najar et al.[17] dimostrato che l'ACT inibisce l'attività della glicoproteina P (P-gp)-ATPasi in modo simile al verapamil (un inibitore rappresentativo della P-gp), implicando un modulatore della P-gp; tuttavia, non è chiaro se ACT sia disponibile come substrato P-gp. È interessante notare che i recenti risultati dei flavonoidi-D-glucosidi nella dieta hanno mostrato che la proteina multifarmaco-resistenza (MRP2) mascherava l'assorbimento mediato del trasportatore del glucosio sodio-dipendente (SGLT)1-della quercetina 4′-O- -glucosio,[18 ,19] che è responsabile di un assorbimento molto scarso. Tuttavia, si sa molto poco sulla sensibilità dei glucosidi polifenolici ai trasportatori di assorbimento, compresi i trasportatori del glucosio. Le informazioni sulle caratteristiche di assorbimento della quercetina4′-glucoside e dell'ECH rapidamente permeabile alla barriera ematoencefalica ci hanno spinto a studiare l'assorbimento sensibile al trasportatore dei glicosidi feniletanoidi nella dieta C .tubulosa.

In questo studio, abbiamo studiato l'assorbimento mediato dal trasportatore del glucosio di ECH e ACT intatti utilizzando monostrati cellulari di Caco-2 intestinale umano. Contemporaneamente, il trasporto di assorbimento di ECH e ACT concomitante con l'alimentazioneEstratto di Cistanche tubulosaera caratterizzato da un sistema di perfusione intestinale in vitromodello e in situ con campionamento del sangue portale, che può facilmente distinguere tra l'entità dell'assorbimento e l'evitamento della disposizione epatica di primo passaggio.

Materiali e metodi

Materiali

Intact ECH e ACT sono stati generosi doni di EishinTrading Co., Ltd (Osaka, Giappone). La floridzina e la floretina sono state acquistate da Tokyo Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Giappone). Verapamil e acido p-cumarico, usati come standard interni per il dosaggio HPLC (liquid cromatografia liquida ad alte prestazioni), sono stati ottenuti da Sigma-Aldrich (St Louis, MO ,STATI UNITI D'AMERICA). Tutte le altre sostanze chimiche utilizzate erano di grado analitico e disponibili in commercio.

Materiale vegetale e preparazione dell'estratto metanolico

C. tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) è una pianta parassitaria perenne che cresce sulle radici delle specie Salvadora o Calotropis e distribuita nei paesi nordafricani, arabi e asiatici. Gli steli essiccati di C. tubulosa sono stati polverizzati ed estratti tre volte con metanolo a riflusso per 3 h. L'evaporazione della pressione ridotta del solvente ha fornito l'estratto metanolico. L'estratto metanolico (grado commerciale, lotto n. 20070130; nome commerciale del registro, Sabaku Ninnjinn Kanka) è stato un generoso dono di Eishin Trading Co., Ltd tramite Muraoka e Morikawa (Università di Kinki, Giappone) e l'identificazione botanica è stata intrapresa dal professor Jia Xiaoguang in theXinjiang Institute of Traditional Chinese and Ethnologic Medicines.

Analisi dell'estratto vegetale: cromatografia

Abbiamo determinato i contenuti ECH e ACT nelEstratto di Cistanche tubulosa(Lotto n. 20070130) mediante un'analisi HPLC descritta di seguito. I dati ottenuti sono riportati nella tabella 1.

Coltura cellulare

Nei passaggi 38–53 sono state utilizzate celle Caco{{0}}, acquistate dall'American Type CultureCollection (ATCC, Rockville, MD, USA). Sono stati coltivati ​​in un mezzo di coltura costituito da mezzo di Eagle modificato di Dulbecco (DMEM, Nacalai Tesque Co., Kyoto, Giappone) integrato con 0.1 mM di aminoacidi non essenziali, 10% di siero bovino fetale inattivato termicamente, 100 U/ml di penicillina G e 0,1 mg/ml di streptomicina solfato.

Studi sui trasporti

Le celle Caco-2 sono state placcate a una densità di 6,4 × 103 celle/cm2 su filtri in policarbonato. I monostrati sono stati utilizzati per esperimenti di trasporto 21-25 giorni dopo la semina. ECH e ACT intatti che erano equivalenti al loro contenuto inEstratto di Cistanche tubulosa (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·cm2.

Echinacoside dentroEstratto di Cistanche tubulosa

Perfusione intestinale in situ

Ratti Wistar maschi (230–250 g) sono stati ottenuti da SLCJapan (Hamamatsu, Giappone). Gli animali sono stati alloggiati in una stanza climatizzata con un ciclo luce/buio di 12 ore per 1 settimana prima dell'uso. I ratti sono stati alimentati con cibo di laboratorio standard (Oriental Yeast Co., Ltd., Tokyo, Giappone) con acqua ad libitum e sono stati lasciati a digiuno per una notte prima del test. Lo studio di perfusione circolante in situra è stato condotto secondo la procedura modificata descritta da Mihara et al.[20]In breve, i ratti sono stati anestetizzati con una soluzione di uretano al 25% (1 mg/kg) per evitare diminuzioni della pressione sanguigna. È stata praticata un'incisione midlineaddominale e l'intestino tenue è stato esposto. Il dotto biliare è stato legato per evitare la secrezione biliare nel perfusato. L'intero intestino tenue come un unico segmento (dal duodeno all'ileo) è stato risciacquato con soluzione salina normale a 37 gradi per 10 minuti fino a quando il lavaggio non è apparso limpido. Tubi di vetro collegati a tubi di silicone sono stati quindi incannulati in entrambe le estremità dell'intestino tenue e fissati con filo di sutura. Quindi, l'intestino tenue è stato sostituito nell'addome e le cannule sono state collegate a una pompa peristaltica. La vena porta è stata incannulata con un tubo in polietilene (PE10).Estratto di Cistanche tubulosadisponibile in commercio è stato sospeso in tampone bicarbonato Krebs–Henseleit (pH 7,4) per ottenere una concentrazione finale di 4,5 mg/ml ed è stato centrifugato per 10 min a8{11}}00 rpm per rimuovere i componenti insolubili. Il supernatante in assenza o presenza di floridzina (1 mM) è stato raccolto in un serbatoio, che è stato mantenuto ad una temperatura di 37 ± 0,5 gradi per tutto il corso dell'esperimento. Negli orari indicati, il sangue è stato prelevato attraverso la cannula della vena porta. Dopo aver centrifugato i campioni di sangue, il plasma risultante è stato deproteinizzato con acetonitrile contenente lo standard interno ed è stato centrifugato a 3000 rpm. I surnatanti sono stati evaporati e il residuo è stato risolto con una fase mobile costituita da acetonitrile e 0,5% di acido acetico. La soluzione mista è stata caricata su una colonna HPLC. I ratti sono stati utilizzati in conformità con le procedure etiche che seguono le Linee guida per la cura e l'uso degli animali da laboratorio emesse dal governo giapponese e dalla Kinki University.

Analisi HPLC

L'analisi HPLC è stata eseguita su un sistema dotato di aShimadzu SPD{{0}}A, rivelatore UV, pompa Shimadzu LC-10A e integratore cromatopac Shimadzu C-R4A (Kyoto, Giappone). ECH e ACT sono stati separati utilizzando una colonna Inertsil ODScolumn (5 μm, 4,6 × 150 mm, GL Sciences Inc., Osaka, Giappone). Una fase mobile di acetonitrile e acido acetico allo 0,5% in un rapporto di 15:85 (v/v) è stata utilizzata a una portata di 1,0 ml/min. Il rilevamento è stato eseguito a 334 nm

Analisi cinetica

I coefficienti di permeabilità apparente (Papp) sono stati stimati dalla pendenza della porzione lineare dell'andamento temporale del trasporto dei composti attraverso i monostrati cellulari di Caco-2, come segue: P dQ dt AC app=( ) ( )

dove dQ/dt è il tasso di permeabilità, C0 è la concentrazione iniziale del soluto nella camera del donatore e A è l'area superficiale della membrana (4,7 cm2).

Nello studio di perfusione intestinale in situ nel ratto, l'area sotto la curva concentrazione plasmatica-tempo (AUC0-90) nella vena porta dal tempo zero all'ultima misurazione è stata calcolata secondo la regola del trapezoidale lineare.

Acteoside dentroEstratto di Cistanche tubulosa

Proprietà fisico-chimiche

La superficie polare e la superficie non polare dei composti sono state calcolate utilizzando il programma SAS (versione 0.8, Olsson, T.; Sherbukhin, V., Synthesis and Structure Administration, 1997–2001, AstraZeneca, Cary , NC, USA). Dalla letteratura sono stati ottenuti valori di log P e pKa determinati sperimentalmente.

analisi statistica

I dati sono stati analizzati mediante analisi unidirezionale della varianza seguita dal test post-hoc di Tukey. Sono stati considerati significativi valori di probabilità inferiori al 5%.

Risultati

Trasporto assorbente di echinacoside e acteoside attraverso i monostrati cellulari di Caco-2

Nei topi e nei ratti, ECH[10,14] e ACT[12,21] intatti vengono somministrati per via orale a dosi di 100–1000 mg/kg. IlEstratto di Cistanche tubulosautilizzato conteneva circa il 30 percento di ECH e il 15 percento di ACT per dose. Poiché l'estratto ha modificato la pressione osmotica e il pH nel mezzo di incubazione, sono state determinate concentrazioni di 4,5 e 13,5 mg/ml in base al dosaggio orale (composti intatti: 2–20 mg/2{{2{{31} }}} g di peso corporeo) nei topi. L'estratto a dosi basse (4,5 mg/ml) e alte (13,5 mg/ml) conteneva 2.{33}} e 6,1 mg per ECH e 1.0 e 3.0 mg perACT, rispettivamente. Abbiamo applicato quantità di estratto di C. tubulosa molto inferiori al dosaggio orale di ECH e ACT riportato nell'uomo (dose di estratto dietetico consigliata: 150 mg contenenti circa 45 mg per ECH e 22,5 mg per ACT). A dosi basse e alte di composti intatti, i profili di assorbimento (Figura 2) e Papp non erano significativamente diversi tra ECH e ACT come equivalente ECH (Tabella 2). Quando l'estratto di C. tubulosa a una dose elevata di 13,5 mg/ml è stato caricato nel mezzo, i valori Papp (1,27 ± 0,13 e 0,34 ± 0,03 × 10-6 cm/s, rispettivamente) di ECH e ACT concomitanti erano tre volte superiori a quelli (0,38 ± 0,09 e 0,10 ± 0,03 × 10-6 cm/s, rispettivamente) di ECH e ACT intatti (Tabella 2). L'estratto, a differenza dei composti intatti, ha migliorato significativamente il trasporto di assorbimento di ECH e ACT.

Effetto inibitorio di floridzina, floretina e verapamil

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>0.3 mM) di floretina non può essere utilizzato a causa della notevole tossicità cellulare. Inoltre, la P-gp è stata identificata come un attore importante responsabile dell'interazione tra medicinali a base di erbe e substrati P-gp clinicamente importanti. Verapamil non ha migliorato il trasporto assorbente dei composti intatti (Figura 3).

Il trasporto assorbente di ECH e ACT nell'estratto (bassa dose) è stato significativamente inibito dalla floridzina (Tabella 2 e Figura 4). L'estratto alla dose elevata ha soppresso l'inibizione sensibile alla floridzina, sebbene il trasporto di ECH e ACT intatti fosse più sensibile alla floridzina (Tabella 2).

Lo studio della perfusione intestinale in situ

In uno studio in situ, abbiamo testato se ECH e ACT inEstratto di Cistanche tubulosasono stati trasportati da SGLT1 situato sul lato apicale dell'intestino tenue. Quando l'estratto alimentare alla dose bassa (4,5 mg/ml) è stato perfuso, ECH e ACT sono comparsi rapidamente nel sangue portale (Figura 5). L'AUC è stato determinato come 2702,8 ± 384,1 μm·min per ECH e 698,3 ± 197,2 μm·min per l'ACT. Dopo che l'AUC è stata normalizzata con il contenuto diEstratto di Cistanche tubulosa, la quantità assorbita non era significativamente diversa tra ECH e ACT. La floridzina sensibile all'SGLT1-, a differenza della floretina, ha soppresso in modo significativo il trasporto di assorbimento dell'ECH concomitante (AUC, 649,4 ± 248,2 μm·min) e dell'ACT (non rilevato).

Discussione

Alcuni ingredienti a base di erbe sono substrati della P-gp altamente espressi nel fegato, nell'intestino, nel cervello e nei reni. La P-gp è un fattore determinante per la biodisponibilità in vivo, la disposizione e la distribuzione di rimedi erboristici, tra cui erba di San Giovanni, curcumina, echinacea, ginseng, ginkgo e zenzero.[22,23]La biodisponibilità della genisteina{5} }il glucoside, un flavonoidderivativo, era limitato anche dal trasportatore intestinale MRP2.[24] Pertanto, questo studio è stato progettato per studiare le proprietà di assorbimento di ECH e ACT concomitanti per uso alimentare e medicinaleEstratto di Cistanche tubulosa.

I monostrati cellulari di Caco{{0}} polarizzati, così come l'intestino,[25], esprimono i principali trasportatori intestinali di efflusso di farmaci, come P-gp, MRP e proteine ​​di resistenza al cancro al seno.[26]Flavonoidi alimentari di quercetina[27] e miricetina[28] ha dimostrato di inibire l'efflusso mediato dalla P-gp sia nelle linee cellulari che nei modelli animali. Verapamil, un inibitore della P-gp, non ha alterato la permeabilità di ACT ed ECH attraverso i monostrati cellulari di Caco-2 (Figura 3), indicando che ECH e ACT intatti non erano limitati dalla pompa di efflusso della P-gp. I nostri studi precedenti hanno mostrato che le proteine ​​MRP2 non erano espresse nei monostrati cellulari di Caco-2.[29] L'efflusso mediato da P-gp e MRP2-potrebbe essere escluso nel trasporto ECH e ACT. Alcuniglicosidi della quercetina con bassa lipofilia sono stati assorbiti in modo più efficiente rispetto alla quercetina stessa.[30] È anche importante notare che l'ACT con una porzione di zucchero si distribuisce rapidamente nei tessuti cerebrali. La nostra attenzione è stata focalizzata sull'azione combinata di due trasportatori di glucosio inenterociti: SGLT nella membrana brush-border e trasporto di glucosio a diffusione facilitata (GLUT) nella membrana basolaterale. La coltura cellulare di Caco-2 può essere utilizzata come modello per lo studio dei trasportatori GLUT2 floretina-sensibili e SGLT1 e 2 sensibili alla floridzina.[31–34]Il glucosio viene trasportato dall'apicale al lato basolaterale dei monostrati Caco-2 ad alta velocità con un Pappof 36,8 ± 1,1×10-6 cm/s.[35] Possiede un Papp superiore al marcatore di trasporto transcellulare propranololo (23,4 ± 2,8 × 10-6 cm/s). Come mostrato nella Tabella 2, ECH e ACT intatti avevano una Papp molto più bassa di quella riportata nel glucosio e nel propranololo passivo. Abbiamo calcolato che il logaritmo del coefficiente di partizione (ottanolo-acqua), log P, è stato calcolato come -2,32 e 0,077 per ECH e ACT, rispettivamente. Si ritiene che i composti polari idrofili vengano trasportati attraverso un percorso paracellulare (attraverso giunzioni strette). I due glicosidi feniletanoidi, come il mannitolo, sembrano essere trasportati attraverso una via paracellulare. Tuttavia, la floridzina ha ridotto drasticamente la permeabilità di assorbimento di ECH e ACT intatti (Tabella 2), suggerendo che l'SGLT1 apicale svolge un ruolo importante nell'assorbimento intestinale di ECH e ACT intatti. A una dose equivalente, una maggiore permeabilità ACT idrofobica era vicina alla permeabilità ECH (Figura 2 e Tabella 2). Yoshikawa et al.[36] hanno dimostrato che i trasportatori facilitatori (GLUT 1 e 2), così come l'SGLT1 sensibile alla floridzina, sono espressi intensamente nell'intestino tenue. Poiché le quantità assorbite di composti si basano sul bilancio di massa tra assorbimento ed eliminazione, abbiamo valutato la partecipazione di GLUT2. Il glucosio attraversa le membrane apicali degli enterociti mediante SGLT1 con alta affinità e bassa capacità ed esce attraverso la membrana basolaterale attraverso GLUT2 con bassa affinità e alta capacità. La floretina (un inibitore specifico di GLUT2) non ha abolito il trasporto di ECH e ACT intatti (Figura 3). Funes et al.[37] dimostrato che ACT interagiva fortemente con i gruppi fosfato delle membrane fosfolipidiche. Poiché i gruppi idrossilici sono abbondanti nella struttura dell'ACT, i legami idrogeno tra questi gruppi e le teste polari del glicerolo oi gruppi fosfato dei fosfolipidi sono le interazioni più probabili. Quando l'ECH intatto e il suo ACT equivalente sono stati incubati con monostrati Caco-2 per 11 ore, l'accumulo cellulare di ACT (0,24 ± 0,04 nmol/cm2) era tre volte maggiore di quello dell'ECH (0,07 ± 0,01 nmol/cm2). Abbiamo pensato che l'ECC e l'ACT sensibili all'SGLT1-si spostassero lentamente dagli enterociti al flusso sanguigno, portando probabilmente al basso Papp osservato. Rispetto all'ECH altamente idrofila, la bassa permeabilità dell'ACT può essere dovuta all'intercalazione nelle membrane cellulari.

Estratto di Cistanche tubulosa

I composti polifenolici vengono consumati in miscele di erbe durante la loro applicazione clinica e sono disponibili in commercio come integratori alimentari. In uno studio in vitro, è stato dimostrato che l'assorbimento dell'epicatechina fenolica non è stato influenzato dalla composizione degli ingredienti delle bevande alimentari.[38] Al contrario, Hypericum perforatum L. le matrici del prodotto influenzano il trasporto dei quercetinglucosidi (rutina e isoquercitrina) e delle cellule del Caco-2 iperosideacross a causa delle differenze nella composizione fitochimica della matrice e nelle caratteristiche di trasporto, ovvero il trasferimento paracellulare e il trasporto mediato da carrier o attivo.[39] In questo studio, C. tubulosa ha fornito un trasporto transepiteliale tre volte superiore rispetto a ECH e ACT intatti (Figura 2 e Tabella 2). Ipotizziamo che i componenti nelEstratto di Cistanche tubulosaattivare il trasportatore sensibile alla floridzina e/o accelerare l'eliminazione di ECH e ACT intracellulari.Estratto di Cistanche tubulosaalla dose elevata sembrava mascherare notevolmente la potenza del trasporto sensibile alla floridzina (Tabella 2). I carboidrati alimentari[40] e le proteine[41] interagiscono con alcuni polifenoli nel tratto gastrointestinale.Morikawa et al.[10] dimostrato che cinque iridoidi, kancanoside AD e kankanol, un glicoside monoterpenico, kankanoside E, due oligoglicosidi feniletanoidi, kankanosides F e G, e un oligozucchero acilato, kankanose, potrebbero essere isolati dalEstratto di Cistanche tubulosa

attualmente utilizzato. Altri ingredienti, comprese le proteine ​​nelEstratto di Cistanche tubulosa, resta poco chiaro. Insieme alla speculazione di cui sopra, siamo progettati per esaminare se altri componenti interagiscono con SGLT1 e inibiscono l'assorbimento di ECH e ACT.

Gli esperimenti in vivo non possono distinguere facilmente tra l'entità dell'assorbimento e l'evitamento della disposizione di primo passaggio attraverso il fegato. Il modello di perfusione intestinale in situ presenta un vantaggio rispetto ai modelli in vivo e in vitro grazie al facile controllo dei parametri sperimentali, all'esclusione dell'impatto di altri organi e al mantenimento di un apporto sanguigno intestinale intatto.[22] Il coinvolgimento del trasportatore del glucosio sensibile alla tefloridzina è stato valutato nel sistema di perfusione intestinale anin-situ. Come mostrato nella Figura 5, quantità assorbite di ECH e ACT concomitanti inEstratto di Cistanche tubulosa (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10-6 cm/s sono completamente assorbiti nell'uomo, mentre i farmaci e i peptidi scarsamente assorbiti (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10-6 cm/s (Tabella 2), suggerendo un'elevata biodisponibilità orale negli animali e nell'uomo. Crespy et al.[43] dimostrato che l'efflusso in uno studio di perfusione intestinale in situ non era significativamente diverso tra floridzina e floretina. [44] hanno anche dimostrato che la biodisponibilità orale della floridzina con un'elevata sensibilità all'SGLT1 era solo del 10% nei ratti. Studi futuri dovranno valutare la biodisponibilità e l'effetto di primo passaggio epatico dell'ECH concomitante dopo la somministrazione orale dell'estratto dietetico a dosi elevate. I risultati in situ implicano che l'assunzione diEstratto di Cistanche tubulosapuò migliorare il basso assorbimento orale di ECH e ACT intatti.

Conclusione

Il dietetico e medicinaleEstratto di Cistanche tubulosail miglioramento dell'assorbimento intestinale di ECH e ACT può servire a gestire meglio la salute umana, sebbene il coinvolgimento del trasporto sensibile alla floridzina dovrebbe essere ridotto.

Dichiarazioni

Conflitto d'interessi

L'autore(i) dichiara(i) di non avere conflitti di interesse da rivelare

Finanziamento

Questo lavoro è stato in parte sostenuto dall'High-Tech Research Center della Kinki University.

Ringraziamenti

Gli autori desiderano ringraziare Osamu Muraoka (Kinki University, Osaka, Giappone) e Toshio Morikawa (Kinki University,Osaka, Giappone) per la fornitura diEstratto di Cistanche tubulosae costituenti puri. Siamo molto grati a Masahiro Iwaki (Kinki University) per il supporto allo studio.

Estratto di Cistanche tubulosaprodotti

Da: ' Trasporto sensibile alla floridzina di echinacoside e acteoside e alterata via di assorbimento intestinale dopo l'applicazione diEstratto di Cistanche tubulosa' diTadatoshi Tanino et al

---© 2015 Royal Pharmaceutical Society, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 67, pp. 1457–1465,Glucosidi feniletanoidi trasportati da SGLT1

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